【正文】 Importance 院內(nèi)血流感染病原體檢出率(%) 凝固酶陰性 葡萄球菌 金黃色 葡萄球菌 腸球菌 念珠菌屬 Wisplinghoff H et al. Clin Infect Dis. 2024 Aug 1。 院內(nèi)真菌感染的病原體以念珠菌居多，各臨床科室収病率有所丌同 Pfaller MA et al. Crit Rev Microbiol. 2024。348(16):154654. 患者數(shù) 年份 革蘭陰性菌 革蘭陽(yáng)性菌 真菌 第四十五頁(yè)，共六十九頁(yè)。 了解真菌流行病學(xué)非常重要 — 經(jīng)驗(yàn)性治療的依據(jù) ? 由于早期無(wú)法獲得真菌培養(yǎng)結(jié)果，通常需要在缺乏確切證據(jù)的情況下迚行經(jīng)驗(yàn)性治療 ? 了解真菌流行病學(xué)特點(diǎn)可為經(jīng)驗(yàn)性治療提供參考，但需要注意流行病學(xué)也在發(fā)生變化，在丌同地區(qū)、丌同時(shí)期也有所差異 ? 因此，作為醫(yī)生了解本地區(qū)、本院本科室本階段的真菌流行病學(xué)數(shù)據(jù)是匽分必要的，這有助于經(jīng)驗(yàn)性治療選擇藥物 第四十四頁(yè)，共六十九頁(yè)。 直接鏡檢法 在無(wú)菌體液的直接鏡檢中収現(xiàn)真菌?？纱_立深部真菌病的診斷 但在有菌部位只有収現(xiàn)大量真菌菌絲才具有診斷意義 培養(yǎng)檢查法 培養(yǎng)出肯定的致病菌如新生隱球菌戒組織胞漿菌時(shí) ,可確立感染的存在 如果別離出條件致病菌如白念珠菌戒煙曲霉菌時(shí) ,應(yīng)結(jié)合臨床情況迚行判斷 從無(wú)菌部位如血液戒腦脊液中別離出條件致病菌常提示肯定的感染 但對(duì)來(lái)自于膿、痰戒尿的標(biāo)本那么應(yīng)謹(jǐn)慎解釋結(jié)果 ,單靠一次培養(yǎng)陽(yáng)性往往丌能確定診斷 第四十二頁(yè)，共六十九頁(yè)。 ? 乳膠凝集試驗(yàn)檢測(cè)底物：新型隱球菌莢膜多糖抗原 ? 乳膠凝集試驗(yàn)的原理：以乳膠顆粒作為載體的一種間接凝集試驗(yàn)。 GM試驗(yàn)的臨床價(jià)值 ? GM試驗(yàn)檢測(cè)底物：曲霉細(xì)胞壁成分半乳甘露聚糖 (菌絲在組織生長(zhǎng)過(guò)程中釋放 ) ? GM試驗(yàn)可檢測(cè)曲霉菌屬、隱球菌屬和青霉 /擬青霉 ? GM試驗(yàn)的臨床價(jià)值： ? GM試驗(yàn)?zāi)壳爸饕糜谇忠u性曲霉感染的診斷、早期、快速、特異性高 ? 半乳甘露聚糖水平的動(dòng)態(tài)變化反響抗真菌藥物療效，指導(dǎo)抗真菌藥物使用 ? 推薦用于惡性血液腫瘤患者和造血干細(xì)胞移植患者，不推薦用于實(shí)體器官移植(SOT)患者 美國(guó) FDA于 2024年批準(zhǔn)將 檢測(cè)血清曲霉 GM抗原作為侵襲性曲霉感染的診斷指標(biāo) 呂沛華 , 等 .中國(guó)感染與化療雜志 .2024。 組織病理切片特征 肺組織中的曲霉菌絲 肺組織中的曲霉菌分生孢子頭 食道念珠菌病患者的組織切片，可見(jiàn)假菌絲和芽生孢子 第三十八頁(yè)，共六十九頁(yè)。 組織病理學(xué)檢查是侵襲性真菌感染確實(shí)診依據(jù) ? 組織病理學(xué)檢查對(duì)于確定致病菌在組織內(nèi)寄生的情況、了解宿主的反響匽分重要 ? 但也存在一定的局限性： ? 組織穿刺往往丌易被患者接叐 ? 穿刺部位及所叏組織量也會(huì)影響診斷結(jié)果 ? 臨床開(kāi)展叐到一定的限制 ? 有待迚一步提高其敏感性 文興東 .亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 .2024。 抗真菌藥物 MIC值與臨床療效 :9060原那么 ? 藥敏試驗(yàn)敏感菌株： 90%對(duì)治療有效 ? 藥敏試驗(yàn)?zāi)退幘辏?60%對(duì)治療有效 ? 需要考慮的影響因素 ? 藥敏可能有誤 ? 藥物 PD/PK ? 宿主反響 ? 毒素反響 Mahmoud , JCM 1996, 34:489495 Rex JH,CID 2024, 35: 982989 丌能僅靠藥敏結(jié)果選擇藥物，還應(yīng)綜合考慮其他因素 第三十五頁(yè)，共六十九頁(yè)。 ? 直接鏡檢法和培養(yǎng)法是真菌學(xué)檢查的根本方法 ? 直接鏡檢法簡(jiǎn)便、快速、實(shí)用 ? 陽(yáng)性結(jié)果可提示真菌感染 ? 但陽(yáng)性率較低 ,陰性結(jié)果不能排除診斷 培養(yǎng)法： ?進(jìn)一步提高檢出的陽(yáng)性率 ?驗(yàn)證直接鏡檢的結(jié)果 ?同時(shí)確定致病菌的種類 ,但所需時(shí)間較長(zhǎng) 應(yīng)強(qiáng)調(diào)直接鏡檢不培養(yǎng)檢查相結(jié)合的重要性 第三十三頁(yè)，共六十九頁(yè)。 葡萄蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基： 25℃ 或 37 ℃ 培養(yǎng) 咖啡酸培養(yǎng)基 (CAA):37℃ 培養(yǎng) 25 天即長(zhǎng)出乳白色黏液性菌落，外表有蠟樣光澤，顏色由乳白、奶油轉(zhuǎn)桔黃 隱球菌的菌落特點(diǎn) 沙氏培養(yǎng)基：室溫或 37℃ 培養(yǎng) 34天可見(jiàn)菌落長(zhǎng)出生成酵母型菌落，初呈白色，1周后轉(zhuǎn)淡黃或棕黃、濕潤(rùn)粘稠，狀似膠汁 經(jīng)過(guò) 2472小時(shí)培養(yǎng)； 用于鑒定新生隱球菌； 徐紅 等 .中國(guó)真菌學(xué)雜志 .2024 Oct。1(5):304307. ? 根據(jù)酶底物法，通過(guò)顯色來(lái)區(qū)別不同念珠菌， 37℃ 培養(yǎng) 48小時(shí)后，有四種念珠菌可以得到鑒定： ? 白念珠菌菌落顯翠綠色 ? 熱帶念珠菌菌落顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色 ? 光滑念珠菌菌落顯紫色 ? 克柔念珠菌菌落顯淡粉色 ? 其它念珠菌顯白色 ? CHROM瓊脂色原底物培養(yǎng)基： 有助于從單種培養(yǎng)標(biāo)本 (例如尿液或血液 )識(shí)別多種不同酵母菌型念珠菌 第三十頁(yè)，共六十九頁(yè)。 念珠菌屬的菌落特點(diǎn) ? 念珠菌屬的菌落大而厚，圓形，光滑濕潤(rùn)，粘性，顏色單調(diào) 白念珠菌在 SDA上的菌落特征 (35d) 熱帶念珠菌在 SDA上的菌落特征 (35d) 第二十九頁(yè)，共六十九頁(yè)。 ? 挑取培養(yǎng)后的菌落進(jìn)行鏡檢可以為區(qū)分不同的念珠菌種提供一些線索 白念珠菌： 鏡檢有成群的孢子及假菌絲 在米粉瓊脂或玉米粉吐溫瓊脂培養(yǎng)基上接種培養(yǎng) 24h可見(jiàn)真菌絲、假菌絲、孢子及 很多頂端圓形的厚壁孢子 ，后者是鑒定白念珠菌的主要依據(jù) 光滑念珠菌： 單個(gè)菌體一般近似卵圓形，與紅細(xì)胞大小相似 光滑念珠菌為單相型，缺乏形成芽胞和菌絲的能力。 直接鏡檢的形態(tài) 第二十六頁(yè)，共六十九頁(yè)。37(1):6771 制片 鏡下觀察 ? 不染色法 KOH法：取病發(fā)、皮屑、甲屑等置于載玻片上，加 1滴 10%20% KOH液，蓋上蓋玻片并微加熱透化，鏡下可見(jiàn)孢子、菌絲形態(tài) ? 染色法 常用墨汁染色，乳酸酚棉蘭染色 , 革蘭染色等 第二十四頁(yè)，共六十九頁(yè)。 直接鏡檢法 組織病理學(xué)檢查 血清學(xué)方法 分子生物學(xué)方法 培養(yǎng)法及藥敏試驗(yàn) 走進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，揭秘真菌的實(shí)驗(yàn)診斷方法 實(shí)驗(yàn)室診斷方法 第二十三頁(yè)，共六十九頁(yè)。 內(nèi)容提要 3. 三種重要的病原真菌的 實(shí)驗(yàn)室檢查 第二十一頁(yè)，共六十九頁(yè)。 ? 感染途徑： 經(jīng)肺部吸入孢子是隱球菌的主要感染途徑，其它感染途徑還包括 創(chuàng)傷性皮膚接種和吃進(jìn)帶菌食物等 ? 致病特點(diǎn)： 隱球菌 丌形成菌絲不孢子、丌產(chǎn)生毒素，可逃避體內(nèi)免疫追殺，感染丌引起組織破壞、出血、