【正文】 ptplb+/）鼠均能抵抗高脂飲食引發(fā)的體重增加，并保持胰島素的敏感性。蛋白酪氨酸磷 第 17 頁 共 28 頁 酸酶 1b（ ptplb）基因剔除后，小鼠血糖輕度下降，胰島素濃度較野生型（ ptp1b+/+）降低一半。這表明單純的肝臟胰島素抵抗足以導致葡萄糖代謝的嚴重紊亂，但并不一定形成空腹高血糖或糖尿病。 也有 研究選擇性剔除小鼠肝臟的 insr， 2個月后出現(xiàn)嚴重的胰島素抵抗， igt 及對外源性胰島素抵抗。上述專一 b細胞胰島素受體剔除小鼠葡萄糖所誘發(fā)的第 2 相胰島素分泌也較為遲鈍，隨著鼠齡增加，糖耐量逐漸減損，不過不出現(xiàn)明顯的糖尿病。 選擇性剔除小鼠 b 細胞的 insr 后，在葡萄糖刺激下，第一時相的胰島素分泌完全缺失，而對精氨酸 刺激仍有反應，酷似 2型糖尿病中的 b細胞缺陷。單純 第 16 頁 共 28 頁 運動以及運動加上胰島素均能增加 mirko 鼠骨骼肌對 2dg 的攝取，且單純運動就能增加糖原合成酶活性，而單純胰島素并不能使糖原合成酶活性增加。通常 運動能促進骨骼肌對葡萄糖的攝取，提高胰島素的敏感性。 在骨骼肌特異性 insr 剔除（ mirk0）鼠 .盡管骨骼肌中胰島素刺激葡萄糖攝取受損，出現(xiàn)體脂增加， tg 和 ffa 水平升高，但血糖、血清胰島素及糖耐量均正常。也有發(fā)現(xiàn) insr/鼠 46月齡時出現(xiàn)胰島素水平升高和胰島素抵抗 .但也只有 lo％發(fā)展為糖尿病，后者可能與遺傳背景有關。證明胰島素生理效應完全缺乏，具嚴重后果。脂肪細胞的分化及數(shù)日基本正常 .但細胞內(nèi)脂質(zhì)含量顯著降低。 （ insr）剔除胰 島素必須與其特異性受體結(jié)合 第 15 頁 共 28 頁 才能發(fā)揮生物效應。組織選擇性剔除系統(tǒng)的建立為研究某一基因的組織特異性功能提供了有力手段。 （六）胰島素信號轉(zhuǎn)導相關蛋白基因剔除研究的啟示 基因剔除技術(shù)的基本原理是利用活細胞基因組 dna 可與外源 dna序列發(fā)生同源重組的特性，對預先選擇的基因進行定點修飾達到改變基因組某一基因的目的。胰島素抵抗狀態(tài)下，脂肪源性 11tnf— a 生成增加 .tnf— a可抑制脂聯(lián)素的啟動子活性，降低脂聯(lián)素的表達。 tzd 衍生物可呈劑量和時間依賴的 o 方式增加 3t3l1細胞中脂聯(lián)素 mrna的表達和蛋白分泌。 第 14 頁 共 28 頁 tzds 可顯著增加伴有胰島素抵抗的患者和嚙齒動物血漿脂聯(lián)素濃度，而并不影響體重。而 2 號外顯子 g／ t 的多態(tài)性與血漿脂聯(lián)素濃度及肥胖均無相關性。最近的研究表明，在不同種族人群中 ，血漿脂聯(lián)素 ..濃度降低均是聯(lián)系肥胖和 2 型糖尿病的重要指標，且血漿脂聯(lián)素的降低程度與胰島素抵抗及高胰島素血癥的相關性要強于肥胖度和糖耐量減退程度。這表明在肥胖和脂肪萎縮鼠模型中，脂聯(lián)素降低均參與了胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展。在動物模型及患者中均已證實低脂聯(lián)素血癥與胰島素抵抗存在相關性。脂聯(lián)素的鼠類同源蛋白已被鑒定，稱為 adipoq 或脂肪細咆補體相關蛋白（ acrp30）。 （ adiponectin）亦稱為凝膠結(jié)合蛋白（ gbp28）， 第 13 頁 共 28 頁 是一種由 apml（ aditposemostabundantgeranscript1）基因編碼的脂肪組織特異性的血漿蛋白。健的抵抗素表達缺陷，降低抵抗素的表達并不是 ppart 激動劑發(fā)揮抗，糖尿病效應所必需的。又有研究顯示，在多種肥胖模型 [ob／ ob， db／ db， tub／ tub和 kka（ y） d、鼠 ]的白色脂肪組織中，抵抗索表達水平顯著降低 .在 ob／ ob 小鼠和zucher 肥胖大鼠中， ppap 了激動劑可上調(diào)脂肪組織中抵抗素的表達。在部分患者離體的脂肪細胞和脂肪組織中，抵抗素呈特異性低豐度表達。由此認為，抵抗素是聯(lián)系肥胖與胰島素抵抗及糖尿病的重要信號分子，下調(diào)抵抗素表達是 tzds發(fā)揮抗糖尿病效應的重要機制。在正常小鼠，抵抗素可使糖耐量及胰島素的作用受損。抵抗素基因特異表達于白色脂肪組織。 （五）其他可能與胰島素抵抗發(fā)生有關的因素 （ resistin）抵抗素是新近發(fā)現(xiàn)的一種脂肪源性的多肽類激素。大鼠接受游離脂肪酸滴注后或肌組織中三酰甘油及長鏈乙酰輔酶 a含量增加皆可激活 pkc異形體，促進 irs蛋白絲氨酸磷酸化，從而阻礙胰島素刺激的 pi3 激酶級聯(lián)反應活化，此可能為葡萄糖轉(zhuǎn)運障礙的原因。 8于大鼠，血漿游離脂肪酸急驟升高可引起胰島素抵抗，伴有 irs1酪氨酸磷酸化減少及胰島素刺激的 pi3k活性上升受阻。 ② 葡萄糖轉(zhuǎn)變?yōu)?6磷酸葡萄糖。近年來，有學者提出 2型糖尿病 第 11 頁 共 28 頁 中糖代謝紊亂的根源為脂代謝的異常，認為大量脂肪在肌肉、肝臟和 b細胞等組織的積聚為 2型糖尿病發(fā)病 的重要因素，證明肌細胞內(nèi) tg 含量與胰島素抵抗的相關性較其他任何指標為強，并提出糖尿病的名稱宜為 “ 糖脂病 ” （見前文）。 （脂毒性作用） 2型糖尿病及肥胖癥患者空腹血漿 ffa較不胖的正常人為高，餐后血 ffa的抑制于 2 型糖尿病者也受損。對 zucker糖尿病大鼠肝臟的研究中亦觀察到類似的結(jié)果。 在鏈脲霉素所致糖尿病大鼠的骨骼肌中 .胰島素刺激下 2脫氧葡萄糖的攝取及葡萄糖氧化顯著低于正常對照組，并證明胰島素引發(fā)的 akt／ pkb磷酸化及 gi。游離脂酸增多也可使己糖胺代謝途徑強化 .捉不這一代謝途徑的活化與營養(yǎng)狀態(tài)有關，在蓿養(yǎng)過剩時，高血桃、高 7 脂肪酸使此途徑啦。大鼠在靜脈滴注葡糖胺后，胰島素刺激的骨骼肌 pi3k活性增強及葡萄糖攝取 增加都受到明顯抑制。 在生理狀態(tài)下，細胞內(nèi)葡萄糖的一部分通過酶的催化轉(zhuǎn)變?yōu)?第 10 頁 共 28 頁 葡糖胺，用于蛋白質(zhì)翻譯后的修飾，形成糖蛋白。 （四）代謝異常阻礙胰島素信號轉(zhuǎn)導 （葡萄糖毒性作 用）慢性高血糖可通過兩種機制引發(fā)胰島素抵抗： ① 己糖胺途徑強化。 b 細胞上有瘦素長型受體的表達。在胰島素信號轉(zhuǎn)導途徑和瘦素信號通路之間存在著交叉聯(lián)系，兩者的相互影響目前正在探討之中。 第 9 頁 共 28 頁 “ 至于瘦素對胰島素信號轉(zhuǎn)導的影響，用相當于肥胖者血瘦素水平的濃度處理人肝細胞及一種肝瘤細胞株（ hepg2 細胞），可使 irs1 酪氨酸磷酸化減弱，并使 grb2 與 irs1 的結(jié)合能力降低。瘦素的代謝效應與胰島素的作用 相拮抗，瘦素促進脂肪分解，抑制脂肪合成，而胰島素則反之；瘦素刺激糖原異生，而胰島素則抑制之。 總的說來，現(xiàn)有的證據(jù)表明 tnf— a 在誘發(fā)胰島素抵抗及使已出現(xiàn)的抵抗狀態(tài)維持不退、加重兩方面都有重要作用。 ②tnf — a 可通過刺激脂肪分解，提高游離脂肪酸水平，后者也是引起胰島素抵抗的重要代謝因素。 tnf— a引起胰島索抵抗的間接機制涉及其他的細 5胞 及代謝因素。tnf— a可直接作用于培捧中細胞的胰島素信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)， tnf— a增強 irs— l 及 irs2 的絲氨酸磷酸化，這些底物的絲氨酸磷酸 第 8 頁 共 28 頁 化可引發(fā)胰島素受體酪氨酸自身磷酸化的減少及受體酪氨酸激酶活力的降低；另一方面，又顯著降低 irs蛋白與胰島素受體相接的能力以及與下游轉(zhuǎn)導途徑的相互作用。血中 tnfa于肥胖者升高，在體重減輕后下降。 （ tnf— a）肥胖者及一些肥胖動物模型腹腔脂肪及肌組織中 tnf— q 的表達增加，此細胞因子表達增加與肥胖的程度及血漿胰島素濃度呈正相關。近年研究進展提示肥胖時脂肪組織產(chǎn)生的細胞因子可能為引起全身性胰島素 抵抗及 b細胞分泌功能障礙的原因。 總的說來， irs 蛋白功能受損可繼發(fā)于胰島素受體酪氨酸激酶（ rtk）活力下降，也可為其他多種因素對 irs的直接作用。于肥胖癥及 2 型糖尿病患者的骨骼肌及脂肪細胞觀察到irs蛋白的酪氨酸磷酸化 程度降低及 pi3k活性下