【正文】 效數(shù)字），并判斷是否符合藥典規(guī)定。 ★①聚酰胺 TLC分離黃酮類成分效果較好故選之。 測(cè)定法 精密吸取供試品溶液 5? 、對(duì)照品溶液 2 ? 與 5 ? ，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇為展開劑，展開，展距約 3cm ，取出，晾干，噴以 1％三氯化鋁的甲醇溶液，放臵 3 小時(shí)，在紫外光燈 (365nm) 下定位。 供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號(hào)篩）約 ，精密稱定（ ），臵索氏提取器中，加甲醇 90ml，加熱回流 4 小時(shí)，趁熱濾過至 100ml 量瓶中，用少量甲醇洗滌容器，洗液與濾液合并，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，精密量取 5ml ，臵 25ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。（保留兩位有效數(shù)字） ① 求出供試品斑點(diǎn)中士的寧的質(zhì)量 ② 求出供試品中士的寧的含量 Ms = MR X =5 μl x μg/ μl x = As AR 含量（ mg/包） = Ms X 稀釋倍數(shù) X 標(biāo)示重量 取樣量 = X 5ml X 20ml X = （ mg/包） 本品系由枳實(shí)、大黃和黃連等八味藥材制成的水丸。已知： AR＝ ， As＝ ，取樣量 。（ 16∶12∶1∶4 ）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。 對(duì)照品溶液的制備 取士的寧對(duì)照品，加氯仿制成每 1ml含 ，作為對(duì)照品溶液。精密稱取 2g臵具塞錐形瓶中，精密加氯仿 20ml與濃氨試液 1ml，輕輕搖勻，稱重，于室溫下放臵24小時(shí)，再稱重，補(bǔ)足氯仿減失的重量，充分振搖，濾過。中國(guó)藥典規(guī)定按干燥品計(jì)每包含馬錢子以士的寧計(jì)應(yīng)為 ～ 。 （ 7）含量計(jì)算 ①外標(biāo)一點(diǎn)法 ▲求出供試品被測(cè)成分（斑點(diǎn)）的質(zhì)量 Ms = MR X As AR Ms被測(cè)成分的質(zhì)量（ M n=2） MR被測(cè)對(duì)照品的質(zhì)量 As被測(cè)成分吸收度（熒光強(qiáng)度）積分值（ A n=2） AR被測(cè)對(duì)照品吸收度（熒光強(qiáng)度）積分值（ A n=2） __ _ _ ▲求出供試品中被測(cè)成分的含量 含量（ W/W） = Ms X 稀釋倍數(shù) 取樣量 含量（ W/片） = Ms X 稀釋倍數(shù) X 平均片重 取樣量 ②外標(biāo)兩點(diǎn)法 ▲求出供試品斑點(diǎn)中被測(cè)成分的質(zhì)量 Ms = ? C +V1C (V2V1) (AA1) (A2A1) Ms被測(cè)成分的質(zhì)量（ mg n=2） A1對(duì)照品小點(diǎn)樣量吸收度 V1對(duì)照品小點(diǎn)樣量（ μl） （熒光強(qiáng)度）積分值（ A n=2 ） V2對(duì)照品大點(diǎn)樣量（ μl ） A2對(duì)照品大點(diǎn)樣（熒光強(qiáng)度） A被測(cè)成分吸收度（熒光強(qiáng)度） 積分值（ A n=2） 積分值（ A n=2） C對(duì)照液的濃度（ mg/ml） __ 五、應(yīng)用實(shí)例 九分散是由馬錢子粉、麻黃、乳香和沒藥等制成。 外標(biāo)兩點(diǎn)法 外標(biāo)一點(diǎn)法 （ 4）展開 （ 5）顯色定位 供試品色譜中待測(cè)斑點(diǎn)的比移值（ Rf值）和光譜掃描得到的吸收光譜最大吸收與最小吸收應(yīng)與對(duì)照品相符，以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。 ①外標(biāo)一點(diǎn)法 ：至少 6個(gè)原點(diǎn) 對(duì)照品（ R） 2個(gè)（同一質(zhì)量）： 2R 供試品（ S） 4個(gè)（同一質(zhì)量）分 2組： 2S1 2S2 ② 外標(biāo)兩點(diǎn)法 ：至少 8個(gè)原點(diǎn) 對(duì)照品（ R） 4個(gè) 分 2組 大質(zhì)量的 2個(gè)： 2R1 小質(zhì)量的 2個(gè)： 2R2 供試品（ S） 4個(gè)（同一質(zhì)量）分 2組： 2S1 2S2 對(duì)照品與供試品應(yīng)交叉點(diǎn)加在同一塊薄層板上，目的在于消除各種誤差。 若標(biāo)準(zhǔn)曲線不通過原點(diǎn)，采用外標(biāo)兩點(diǎn)法。 根據(jù)對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線性質(zhì)的不同，外標(biāo)法又分為外標(biāo)一點(diǎn)法和外標(biāo)兩點(diǎn)法。 四、含量測(cè)定方法（外標(biāo)法） TLCS含量測(cè)定有 外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法 ，中國(guó)藥典僅采用 外標(biāo)法 。 （ 2）氘燈（ D2） 供紫外光（ 200～ 400nm）測(cè)定，掃描有紫外吸收的成分斑點(diǎn)。 （ 2）鋸齒掃描 適用于不規(guī)則的斑點(diǎn)，測(cè)量誤差小，被測(cè)成分積分值重現(xiàn)性好，故吸收測(cè)定法常用此掃描方式。測(cè)定時(shí)，樣品波長(zhǎng)（ λs ）和參比波長(zhǎng)（ λR ）依次掃描斑點(diǎn)，所測(cè)吸收度為Δ A=Aλs － Aλ R 樣品波長(zhǎng)（ λs ）：即被測(cè)成分的 λmax 參比波長(zhǎng)（ λR ）：即被測(cè)成分的 λmin 或此波長(zhǎng)處無吸收。 （ 2）雙波長(zhǎng) 主要用于吸收測(cè)定法。 （ 1）單波長(zhǎng) 一般用于熒光測(cè)定法，即用某一波長(zhǎng)的紫外光（激發(fā)光）進(jìn)行掃描。 （ 2）熒光法 適用于有熒光性質(zhì)的成分，例如小檗堿等。該法又可采用反射法或透射法測(cè)定。常用的有島津 CS930型和 CAMAGⅡ 型等。《中國(guó)藥典》中有 32個(gè)中成藥品種采用該法進(jìn)行含量測(cè)定。與高效液相色譜法比較，具有多通道效應(yīng)，可同時(shí)平行分離分析多個(gè)樣品；流動(dòng)相用量少且選擇范圍寬、更換方便；固定相為一次性使用，對(duì)樣品的預(yù)處理要求不高等優(yōu)點(diǎn)。 （原計(jì)算分光光度法取消） 第四節(jié) 薄層掃描法 （ Thin Layer Chromatography Scan TLCS ） 一、定義 薄層掃描法（ TLCS）系指用一定波長(zhǎng)的光照射在薄層板上，對(duì)薄層色譜中有紫外或可見吸收的斑點(diǎn)或經(jīng)照射能激發(fā)產(chǎn)生熒光的斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，將掃描得到的圖譜及積分值用于藥品定性定量分析的方法。 主要用于 Vis,需用對(duì)照品。但本法不具分離功能，常用于總成分的測(cè)定。 五 、 含量計(jì)算 含量 （ V/W ％ ） = 100% 含量 （ V/W ％ ） = 100% 含量 （ V/W ％ ） = 100% 揮發(fā)油體積 （ ml） 樣品體積 （ ml） 樣品重量 （ g） 揮發(fā)油密度 （ g/ml） VO WS WS VO DO VS VO VO WS DO VS 第三節(jié) 可見 紫外分光光度法 （ Ultraviolet and Visible Spectrophotometry） 一、定義 根據(jù)被測(cè)物質(zhì)在可見 紫外光的特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析的方法稱可見 紫外分光光度法。 30分鐘后，停止加熱，放臵 15分鐘以上，讀取二甲苯的容積。自測(cè)定器上端加水使充滿刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止，再用移液管加入二甲苯 1ml，然后連接回流冷凝管。 本法適用于測(cè)定相對(duì)密度在 。 臵電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱至沸 ， 并保持微沸約 5小時(shí) ，至測(cè)定器中油量不再增加 ， 放臵片刻 ， 開啟測(cè)定器下端的活塞 ，將水緩緩放出 ， 至油層上端到達(dá)刻度 0線上面 5mm處為止 。 取供試品適