11dna重組技術(shù)的基本工具用-文庫(kù)吧資料
2025-03-08 22:53本頁(yè)面
【正文】 生物進(jìn)化論 基礎(chǔ)理論和技術(shù)發(fā)展催生了基因工程 科技探索之路 早期基礎(chǔ)理論 孟德?tīng)?提出基因的 分離定律 和 自由組合定律 基礎(chǔ)理論和技術(shù)發(fā)展催生了基因工程 科技探索之路 早期基礎(chǔ)理論 摩爾根 證明 基因在染色體上 ，并提出基因的 連鎖互換定律 。 DNA連接酶有連接單鏈 DNA的本領(lǐng)嗎？ 迄今為止，所發(fā)現(xiàn)的 DNA連接酶都不具有 連接單鏈 DNA的能力，至于原因，現(xiàn)在還不清楚，也許將來(lái)會(huì)發(fā)現(xiàn)可以連接單鏈 DNA的酶。coli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵 T4 DNA連接酶 還可把 平末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)，但效率較低 T4DNA連接酶 三、“分子運(yùn)輸車(chē)” —— 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 ⒈載體需要的條件： ⑴ 有 1~多個(gè)限制酶切點(diǎn) ⑵對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害 ⑶導(dǎo)入基因 能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá) ⑷ 有某些標(biāo)記基因，便于篩選 ⒉常用運(yùn)載體： ⑴細(xì)菌的質(zhì)粒 ⑵ λ 噬菌體衍生物或某些動(dòng)植物病毒 ? 常用的載體：質(zhì)粒 能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制 有切割位點(diǎn) 有標(biāo)記基因的存在，可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基鑒別 思考與探究 P7 （ 2） 為什么限制酶不剪切細(xì)菌本身的 DNA？ 通過(guò)長(zhǎng)期的進(jìn)化，細(xì)菌中含有某種限制酶的細(xì)胞，其 DNA分子中或者 不具備 這種限制酶的 識(shí)別切割序列 ；或者通過(guò)甲基化酶 將甲基轉(zhuǎn)移 到所 識(shí)別序列 的堿基上，使 限制酶不能將其切開(kāi) 。 形成磷酸二酯鍵 其作用與限制酶相反，作用點(diǎn)相同 ③類(lèi)型： 類(lèi)型 E ? 如果把兩種來(lái)源不同的 DNA用同一種限制酶來(lái)切割，會(huì)怎樣呢？ 會(huì)產(chǎn)生 相同的黏性 (平 )末端 ，然后讓兩者的黏性 (平 )末端 黏合 起來(lái)，就似乎可以合成重組的 DNA分子了。 EcoRⅠ ? 什么叫黏性末
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