11dna重組技術(shù)的基本工具_2-文庫吧資料
2025-03-03 16:57本頁面
【正文】 質(zhì)，但組成和性質(zhì)各不相同。 ⑵ DNA聚合酶是以 DNA一條鏈為模板，將單個核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補的子鏈；而DNA連接酶是將 DNA雙鏈上的兩個缺口同時連接起來。 DNA連接酶和 DNA聚合酶都是形成磷酸二酯鍵，那么， 二者的差別主要表現(xiàn)在什么地方呢 ？ DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？ 不是。另一種是 T4DNA連接酶。 作用部位： 基因工程中所用的連接酶有兩種：一種是 E （二） “分子縫合針” —— DNA連接酶 種類： 兩類 E 這兩類酶都是將雙鏈 DNA片段 “ 縫合”起來， 恢復(fù) 被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 ，但這兩種酶的作用有所差別： DNA片段互補的黏性末端之間連接起來， 不能將雙鏈 DNA片段平末端之間進行連接。 根據(jù)酶的來源不同，可以將這些酶分為兩類：一種是從大腸桿菌中分離得到的，稱為 。這樣，盡管細菌中含有某種限制酶也不會使自身的 DNA被切斷，并且可以防止外源 DNA的入侵． 將切下來的 DNA片段拼接成新的 DNA分子 , 是靠DNA連接酶來完成的。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源 DNA、使之失效，從而達到保護自身的目的。那么這類原核生物之所以長期進化而不絕滅，有何保護機制？ 原核生物在長期的進化過程中形成了一套完善的防御機制，以防止外來病原物的侵害。 中軸線 思考：①限制酶所識別的序列有什么特點？ 限制酶所識別的序列，都可以找到一條中心軸線，中心軸線兩側(cè)的雙鏈 DNA上的 堿基是旋轉(zhuǎn)對稱的 。 是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就形成了重組的 DNA分子了 ? 實際還不夠 ,還需要 DNA連接酶進行連接。 ? 要想獲得某個目的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產(chǎn)生幾個黏性末端？一個目的基因有幾個黏性末端？ 要切兩個切口，產(chǎn)生四個黏性末端，兩個。 DNA分子經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶切割產(chǎn)生的 DNA片段末端通常有哪兩種形式？ 有 黏性末端 和 平末端 兩種。 限制酶 限制酶 ? 什么叫黏性末端？ 當(dāng)限制酶在它識別的中心軸線兩側(cè)將 DNA兩條鏈切開時，切開的 DNA兩條單鏈的切口 ，帶有幾個伸出的核苷酸 ， 它們之間正好互補配對 ，這樣的切口叫 黏性末端 。 來源： 種類： 作用： 結(jié)果： 形成兩種末端 （一）限制性核酸內(nèi)切酶 —— “分子手術(shù)刀” 黏性末端 平末端 能將外來的 DNA切斷 ，由于這種切割作用是在 DNA分子內(nèi)部進行的，故名限制性核酸內(nèi)切酶。 主要是從
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