【正文】 4 病理改變 本法造模動(dòng)物病變以腺胃小彎、前壁受累較明顯，病變不僅見于幽門區(qū)，遍及胃體各處。方法是：每星期先用蒸餾水配成 1g／ L濃度的儲(chǔ)存液，避光冷藏保存，同時(shí)用蒸餾水將其配成含 MNNGl67ug／ ml的飲用液，裝入 200ml的飲水瓶，外涂黑色，每日更換，大鼠盡量飲用，連續(xù) 2個(gè)月。 2．方法 雄性 Wistar大鼠，體重 180200g，常規(guī)顆粒鼠料喂養(yǎng)。 此法造模動(dòng)物胃黏膜病理學(xué)改變以胃竇部及胃體部改變明顯，表現(xiàn)為胃黏膜變薄、黏膜肌增厚、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，胃的泌酸功能下降。在低倍鏡觀察全層胃黏膜，每一切片取 10個(gè)視野：竇部 4個(gè)，竇體交界處 1個(gè)，體部 4個(gè)，前胃與腺胃交界處 1個(gè)。 (2)組織病理學(xué)：沿胃小彎自前胃至幽門取全層胃壁一塊，用 10％甲醛溶液固定，常規(guī)包埋切片， HE染色，作光鏡檢查。 3．模型考核 造模結(jié)束，隨機(jī)抽取少量動(dòng)物進(jìn)行組織病理學(xué)檢測(cè)和胃酸、胃蛋酶測(cè)定。 (2)主動(dòng)免疫：造模的第一星期和第五星期，每只大鼠皮下注射佐劑抗原(同種大鼠胃黏膜的生理鹽水組織勻漿與福氏佐劑以 1： 1成的乳劑 )0． 3ml。 2 方法 與前法不同的是，本法以去氧膽酸鈉飼養(yǎng)代替人的膽汁灌胃，并以熱糊灌胃主動(dòng)免疫的方法。動(dòng)物的飼養(yǎng)、衛(wèi)生條件都進(jìn)行嚴(yán)格控制．確保模型成功的同時(shí)，不受其他疾病的干擾。 4．藥物療效觀察 造模結(jié)束，確認(rèn) CAG成功后，將動(dòng)物隨機(jī)分組進(jìn)行給藥觀察，治療時(shí)間通常 45~60日，治療結(jié)束進(jìn)行上述組織病理學(xué)，病理生理學(xué)指標(biāo)檢測(cè)，綜合評(píng)價(jià)藥物的療效。 (2)組織病理學(xué)：固定部位取，通常在胃小彎及前后壁，常規(guī)石蠟包埋、切片、 HE染色、光鏡下觀察胃竇、胃體變化。 3．模型考核 造模結(jié)束，隨機(jī)取少數(shù)動(dòng)物進(jìn)行生理病理、組織病理學(xué)指標(biāo)檢測(cè)，確認(rèn)模型成功后才能進(jìn)行藥物療效觀察。 (2)膽汁灌胃：進(jìn)行第一次免疫的同時(shí)，采用無化膿性炎癥病人的引流膽汁，按 12． 5ml／ kg(體重 )給大鼠灌胃 (灌目前 4h停食、自由飲水 )，每日 1次，連續(xù)70日。 2 . 方法 采用主動(dòng)免疫 2次，同時(shí)膽汁及熱水灌胃連續(xù) 70日。鑒于目前市場(chǎng)療效肯定的中藥不多，研究者在選擇時(shí)應(yīng)加以注意，以保證陽性藥質(zhì)量。國(guó)內(nèi)在西藥多選擇維酶索作為對(duì)照藥。觀察藥物的止痛效果，也叫作為評(píng)價(jià)藥效的輔助指標(biāo)，通常采用醋酸扭體法試驗(yàn)、熱板法、離體腸管解痙試驗(yàn)等。除在 CAG模型評(píng)價(jià)藥物的作用外，也可采用一般的非特異性炎癥模型觀察藥物的抗炎效果，如棉球肉芽腫炎癥模型、免疫性關(guān)節(jié)腫模型等。由于 CAG存在輕重程度之分，同是治療 CAG的藥物，其適應(yīng)證從作用強(qiáng)度有所不同，研究者可根據(jù)藥物的作用特點(diǎn)及條件，選擇合適的造模方法。由于 CAG的形成是一個(gè)緩慢的過程，病因是多方面的，田此在動(dòng)物模型制備方法上采用綜合因素，取得較好效果，口前就 CAG動(dòng)物模型的制備來說仍以綜合法較為理想。由于刺激的因素和強(qiáng)度不一樣， CAG形成的時(shí)間和程度也有差別。 (3)其他指標(biāo)：膽汁返流是萎縮性胃炎的重要病因之一，螺旋桿菌 (HP)感染也是CAG的致病因素之一，胃液膽汁酸鹽和胃黏膜 HP的檢測(cè)也可作為評(píng)價(jià)藥效的輔助指標(biāo)之 — 。如何使組織病理學(xué)的指標(biāo)更加科學(xué)可靠，仍應(yīng)努力探討，研究指標(biāo)的定量化評(píng)價(jià)是發(fā)展的趨勢(shì)，研究者應(yīng)盡可能采用先進(jìn)的檢測(cè)方法或嚴(yán)密的科研設(shè)計(jì)，使研究指標(biāo)科學(xué)可靠。動(dòng)物模型之造模方法的不同，形成 CAG的病理改變程度有所不同，評(píng)價(jià)指標(biāo)也有所側(cè)重，觀察指標(biāo)常包括胃黏膜厚度、黏膜肌厚度、腺體數(shù)量、主壁細(xì)胞數(shù)、炎性細(xì)胞計(jì)數(shù)以及腸化發(fā)生率等。 2．觀察指標(biāo) (1)組織病理學(xué)：病理學(xué)的改變應(yīng)是反映新藥療效和評(píng)價(jià)藥效的最主要指標(biāo)。 (6)MNNG法：在飲水加入致痼劑 MNNG給大鼠飲用 60日。 (4)氨水法：給大鼠飲用 o． 02％濃度氨水 90日。 (2)主動(dòng)免疫加去氧膽酸鈉法：大鼠皮下注射佐劑抗原 (同種大鼠胃黏膜的生理鹽水的組織勻漿與福氏劑以 1： l配成的乳劑 )，加去氧膽酸鈉溶液飲用。如何復(fù)制出與人類臨床病理特征相似的、方法可靠、重復(fù)性好的、適合藥效學(xué)試驗(yàn)的模型仍在探索之中。由于各地標(biāo)準(zhǔn)不一致，療效評(píng)價(jià)存在 —定的差異。鑒于臨床多表現(xiàn)虛中夾實(shí)，在臨證時(shí)多采用一法為主多法結(jié)合的治療方法。國(guó)內(nèi)中醫(yī) CAG的分型多達(dá) 30種，比較集中的證型有脾胃虛弱 (或脾胃虛寒 )、肝胃不和、脾胃濕熱、胃陰不足、胃絡(luò)瘀血、痰濁中阻、熱毒溫結(jié)。治療方法主要有辨證論治、基礎(chǔ)方加減、專方以及中成藥。治療的藥物主要有維酶素、肽胃泌素、弱酸、消膽胺、嗎丁啉、硫糖鋁、復(fù)方鉍制劑以及必要時(shí)手術(shù)治療等。中醫(yī)對(duì)本病病因的認(rèn)識(shí)，認(rèn)為主要與飲食不節(jié)、嗜好煙酒、進(jìn)食熱燙粗糙或刺激性食物、情志不節(jié)、惱怒郁結(jié)、素體虛弱、勞倦內(nèi)傷，或用藥不當(dāng)、久病體虛等因素有關(guān)。 有關(guān)慢性萎縮性胃炎的病因尚未完全清楚。 慢性萎縮性胃炎藥 一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ) 慢性萎縮性胃炎 (簡(jiǎn)稱 CAG)是以胃黏膜固有腺體萎縮、黏膜變薄、黏膜肌層增厚、胃酸分泌減少，臨床上以上腹疼痛、脹滿、噯氣、納呆為主要表現(xiàn)的病變。某中約對(duì)胃排空呈抑制作用。 3．注意點(diǎn) 此類潰瘍發(fā)病部位在腺胃部，以條索狀出血性缺損為特征。 2．方法 大鼠禁食 24h，自由飲水，每只動(dòng)物選擇下列物質(zhì)灌胃：0． 6mol／ l鹽酸、 0． 2mol／ L氫氧化鈉、上水乙醇 1． 0ml。 (六 )無水乙醇、 O． 6mol／ L鹽酸、 O． 2mol／ L氫氧化鈉胃損傷模型 1．原理 給動(dòng)物某些化學(xué)物質(zhì)如強(qiáng)酸 (HCL)、強(qiáng)堿 (NaOH)、無水乙醇。觀察中藥的效應(yīng)一般應(yīng)預(yù)先給藥．給藥后 30—60min給吲哚美辛。潰瘍指數(shù)的評(píng)定及計(jì)算與應(yīng)激性潰瘍模型相同。此溶液為等張， pH介于 7． 5— 8． 0)。 (五 )吲哚美辛潰瘍模型 1．原理 美辛通過抑制胃黏膜前列腺素合成酶，使胃黏腆內(nèi)前列腺素減少，細(xì)胞保護(hù)作用減弱，以致胃黏膜防御因素減弱而形成潰瘍。 (3)觀察藥物對(duì)潰瘍的作用時(shí)，動(dòng)物應(yīng)預(yù)先給藥，或同時(shí)給藥，若粗制劑采用灌胃給藥，應(yīng)確認(rèn)胃內(nèi)藥物已排空手術(shù)結(jié)扎。結(jié)扎時(shí)間的長(zhǎng)短、室溫的高低直接影響潰瘍的形成；時(shí)間太短潰瘍輕微，太長(zhǎng)易致穿孔死。因?yàn)槲竷?nèi)容會(huì)影響潰瘍的形成，干擾結(jié)果。潰瘍的最大徑大于 1mm者計(jì)算面積。觀察前胃部潰瘍發(fā)生情況，并同時(shí)分析胃液分泌情況。 2．方法 大鼠禁食 36h，自由飲水。該模型的穩(wěn)定性與動(dòng)物體質(zhì)、禁食時(shí)間、利血平的量、室溫等同素有關(guān)，應(yīng)盡量控制實(shí)驗(yàn)條件 — 致。 3．注意點(diǎn) 利血平的劑量不宜過大，否則動(dòng)物容易死亡。 2．方法 取體重 160～ 180g大鼠，禁食 24h，自由飲水，腹腔注射利血平5mg/kg(體重 )， 18h處死動(dòng)物，取胃按上法用福爾馬林固定，沿胃大彎割開胃腔平鋪紙上，觀察潰瘍發(fā)生情況，潰瘍位于腺胃部，以條索狀和點(diǎn)狀為主。 (3)潰瘍程度與應(yīng)激強(qiáng)度有關(guān)，包括應(yīng)激時(shí)間、水溫、水浸部位的高度等因素，故應(yīng)嚴(yán)格控制。禁食宜每只 — 籠，籠底應(yīng)不能積留糞便，以免動(dòng)物自食。潰瘍發(fā)生率：潰瘍發(fā)生的動(dòng)物數(shù)占試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)的百分比。觀察脾胃部潰瘍發(fā)生的情況。 2．方法 取禁食 24h大鼠，關(guān)進(jìn)特制的圓形鐵絲籠內(nèi)，浸入水中至劍突部位，水溫18~20C， 7h后處死動(dòng)物，打開腹腔，結(jié)扎賁門與幽門后將胃取出，由幽門向胃內(nèi)注入 1％甲醛溶液 10ml，將胃浸入同濃度甲醛溶液中 10min，固定內(nèi)外層。操作過程應(yīng)嚴(yán)格掌握，否則形成潰瘍差異較大。發(fā)現(xiàn)有誤者應(yīng)棄去，以免影響結(jié)果。 3．注意點(diǎn) (1)技術(shù)操作過程應(yīng)嚴(yán)格消毒，籠具也應(yīng)消毒，以免術(shù)后感染影響藥物的觀察治療。然后沿胃大彎將胃剪開，用自來水洗去胃內(nèi)容物，將胃鋪于紙上觀察，測(cè)量潰瘍面積。一般術(shù)后的次日可分組進(jìn)行給藥治療。術(shù)后常規(guī)喂養(yǎng)，術(shù)后 3～ 5日形成潰瘍。 2．方法 大鼠禁食 24h，自由飲水，乙醚麻醉，常規(guī)消毒開腹，輕輕將胃取出，在腺胃部前壁竇體交界處注入 30％乙酸 0． 03ml于漿膜下，緩慢出針，勿使乙酸流出。對(duì)照藥劑量應(yīng)與受試藥的劑量相呼應(yīng) (等效量或給藥倍數(shù)相等 )，以資比較。常用有 H2受體拮杭劑如西咪替丁、雷尼替丁、法莫替丁等；加強(qiáng)胃黏膜防衛(wèi)功能的有生胃酮、硫糖等。 (三 )陽性對(duì)照藥 陽性對(duì)照藥既可選西藥，也可以選用中藥。