植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建與操作技術(shù)-文庫吧資料
2025-01-20 04:57本頁面
【正文】 度、濕度、氧氣 １、光照 光照強(qiáng)度 、 光質(zhì)以及光照時(shí)間 ， 對(duì)細(xì)胞的增殖 、 器官的分化都有很大影響 。 （ 4）工具用后應(yīng)及時(shí)滅菌，避免 交叉污染 。 （ 2）將培養(yǎng)基放入超凈工作臺(tái)內(nèi)， 火焰灼燒培養(yǎng)基瓶口 ，然后打開培養(yǎng)瓶口，置培養(yǎng)瓶為 斜角 ，避免灰塵雜菌落入瓶中。 整個(gè)過程均需無菌操作。 最好采用莖尖 ，后代性狀較穩(wěn)定，攜帶細(xì)菌較少。 ?有 代表性 的主要植物 ?優(yōu)良 的種質(zhì)、 特殊 的基因型 ?在植株生長(zhǎng)的最適時(shí)期取材（花藥培養(yǎng)在 單核期 取材） ?大小一般在 （胚胎培養(yǎng)或脫毒在 下），材料太大易污染，材料太小難于成活。 激素難溶于水，配制母液時(shí)用 95%酒精 或 1NHCl， 1NNaOH溶解后再定容。 （５）激素 每種單獨(dú)配成母液儲(chǔ)于冰箱，濃度一般為－ 1mg/ml。 （３）鐵鹽 硫酸亞鐵 和 EDTA鈉鹽 易沉淀，需單獨(dú)配制，配成100— 200倍 鰲合劑 不易沉淀。 一般母液配成比所需濃度高 10100倍。 ? KM— 8P培養(yǎng)基 有機(jī)成分較復(fù)雜，它包括了所有的單糖和維生素，廣泛用于原生質(zhì)融合的培養(yǎng)。 ? N6培養(yǎng)基 成分較簡(jiǎn)單 ， KNO3和 （ NH4） 2SO4含量高 。 ? White培養(yǎng)基 1963年又作了改良 ， 稱作 White改良培養(yǎng)基 。 ? MS培養(yǎng)基 無機(jī)鹽和離子濃度較高 ， 硝酸鹽含量較其他培養(yǎng)基為高 。 完全 培養(yǎng)基：包含使植物離體生長(zhǎng)全面營(yíng)養(yǎng)。 生根 培養(yǎng)基：誘導(dǎo)離體培養(yǎng)苗生根。 １、培養(yǎng)基種類 ? 根據(jù)作用分： 誘導(dǎo) 培養(yǎng)基：誘導(dǎo)外植體啟動(dòng)生長(zhǎng)。 （２）活性炭 (active carbon) 常用的吸附劑，某些培養(yǎng)類型中，可以吸附培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的一些有毒物質(zhì)，有利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。 Growth medium is optimised for regeneration of plantlets No sucrose (0%) Sucrose reduced to 1% Sucrose increased to 5% The explant is pletely covered with green shoots, and roots are developing on the lower surface Very few shoots have developed on the explant. No roots and no callus. Shoots developed on edges of upper surface, and some root development has occured Shoots have developed over the surface of the explant, along with roots from the lower surface. The result is parable with the control medium tissue culture in the African Violet No 6BA 6BA reduced to mg. l1 No NAA Poor shoot development and no roots. Extensive callus generation Poor shoot development and no roots NAA reduced to mg. l1 More balanced development of roots and shoots. However, undifferentiated callus is developing at the edges of the explant Profuse development of roots and a reduced number of shoots. Undifferentiated callus is developing at the edges of the explant NAA increased to mg. l1 Profuse development of roots over the explant upper and lower surface, and few shoots. Some callus No MS salts No sign of regeneration from explant at all. MS salts reduced to g. l1 Some root growth but reduced development of shoots MS salts increased to g. l1 Shoots developed on upper surface of explant. No roots or callus. （１） 瓊脂 (agar) 是一種由海藻中提取的高分子碳水化合物，本身并不提供任何營(yíng)養(yǎng)。 生長(zhǎng)素 /細(xì)胞分裂素 高 利于根、愈傷組織的形成 適中 利于根芽的分化 低 有利于芽的形成 生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素同時(shí)使用有 協(xié)調(diào) 作用。 ?打破休眠 ，促進(jìn)種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)。 ?作用： ?誘導(dǎo) 芽 的分化 ?促進(jìn) 側(cè)芽 萌發(fā)生長(zhǎng) ?促進(jìn)細(xì)胞 分裂與擴(kuò)大（莖增粗） ，抑制根的分化，延緩衰老 ?多用于誘導(dǎo)不定芽的分化、芽的增殖。適宜的用量范圍較狹窄 ， 過量常有 毒效應(yīng) ?腺嘌吟的衍生物，包括 6BA、 Kt、 Zt 等。組織培養(yǎng)中常用人工合成 的生長(zhǎng)素類物質(zhì) ?常用 IAA、 IBA、 NAA、 2,4D
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