【正文】 04:13:3304:13:3304:132/2/2023 4:13:33 AM 1越是沒有本領(lǐng)的就越加自命不凡。 04:13:3304:13:3304:13Thursday, February 2, 2023 1乍見翻疑夢，相悲各問年。 ? 外界環(huán)境條件 溫度不斷變化 ，其調(diào)節(jié)由太陽輻射決定， 溫差很大（季節(jié)、日夜） ，而且一般不會達(dá)到 25+2℃ 。 培養(yǎng)室溫度是 25177。一般一次只配 50ml或 100ml。 ? 根據(jù)營養(yǎng)水平分： 基本 培養(yǎng)基：包含無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)成分。 ? 2， 4— D 啟動能力比 IAA高 10倍 ， 特別是 促進(jìn)愈傷 組織的形成 ， 同時強(qiáng)烈 抑制芽 的形成 ， 影響器官的發(fā)育 。 細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)還用麥芽糖、葡萄糖、果糖 （２）維生素 明顯的 促進(jìn) 離體培養(yǎng)物的 生長 。 ? 主要設(shè)備 ? 培養(yǎng)架、培養(yǎng)箱、空調(diào)機(jī)、除濕機(jī)、換氣扇、臭氧發(fā)生器等。 小型臭氧發(fā)生器 培養(yǎng)器皿 （包括 玻璃 器皿和 塑料 器皿） 各種規(guī)格的培養(yǎng)皿、三角瓶、試管、培養(yǎng)瓶。 鹽酸硫胺素 VB 鹽酸吡哆醇 VB 煙酸 、 生物素 、 抗壞血酸 Vc等 。適宜的用量范圍較狹窄 ， 過量常有 毒效應(yīng) ?腺嘌吟的衍生物，包括 6BA、 Kt、 Zt 等。 完全 培養(yǎng)基：包含使植物離體生長全面營養(yǎng)。 激素難溶于水，配制母液時用 95%酒精 或 1NHCl， 1NNaOH溶解后再定容。 2℃ 。 組織培養(yǎng)出來的苗通稱試管苗或組培苗 ⑵ 高濕 ? 試管瓶內(nèi)水分移動途徑有兩條： 試管苗水分從氣孔蒸騰 培養(yǎng)基向外蒸發(fā)，凝結(jié)后又進(jìn)入培養(yǎng)基 ? 瓶內(nèi)相對濕度接近 100%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于瓶外空氣濕度，故 試管苗蒸騰小 。 :13:3304:13:33February 2, 2023 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 :13:3304:13Feb232Feb23 1越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯兒。 , February 2, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 :13:3304:13Feb232Feb23 1故人江海別，幾度隔山川。并且溫度一般控制在 25+2℃ 甚至更高。 ２ 、 溫度 大所數(shù)植物最適溫度在 2332℃ 之間 。 （５）激素 每種單獨配成母液儲于冰箱，濃度一般為－ 1mg/ml。 生根 培養(yǎng)基：誘導(dǎo)離體培養(yǎng)苗生根。組織培養(yǎng)中常用人工合成 的生長素類物質(zhì) ?常用 IAA、 IBA、 NAA、 2,4D ?配成 1mg/ml的溶液貯于冰箱中 ? IAA天然生長素 ， 亦可人工合成 ， 其 活力較低 ， 是生長素中活力最弱的激素 ， 對器官形成的副作用小 ， 高溫高壓易被破壞 ， 受光也易分解 ? NAA啟動能力比 IAA高出 34倍 ， 可大批量人工合成 ，耐高溫高壓 ， 不易被分解破壞 ， 應(yīng)用較 普遍 ? IBA促進(jìn) 發(fā)根 能力較強(qiáng) ?NAA和 IBA廣泛用于生根 ， 并與細(xì)胞分裂素互作促進(jìn)芽的增殖和生長 。 不同濃度會影響細(xì)胞的增殖分化，試管苗生長與繁殖濃度 23%，幼胚培養(yǎng) 46%，某些特殊培養(yǎng)中用 810%。 ? 要求： ? 能控制光照和溫度 ? 保持相對的無菌環(huán)境 ? 有排風(fēng)窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置 ? 有適宜的培養(yǎng)架，日光燈照明。 微孔過濾器 （細(xì)菌過濾器） ，抽濾滅菌用，如激素 器械用具 鑷子、剪刀、解剖刀、接種針（鏟）等。 一般用量為 ～ ／ L。其中 Zt活性最強(qiáng)，但非常昂貴，常用的是 6BA。 ?1681， 出現(xiàn)由無機(jī)鹽組成的 Sacks和 Knop溶液 ， 至今仍在作為基本的無機(jī)鹽培養(yǎng)基 ?40年代多用 White培養(yǎng)基 ?60年代至今大多采用 MS等高濃度培養(yǎng)基 （ 可以保證培養(yǎng)材料對營養(yǎng)的需要 ， 由于濃度高 ， 在配制 、 消毒過程中某些成分有些出入 ， 也不致影響培養(yǎng)基的離子平衡 ） 培養(yǎng)基的名稱，多以發(fā)明人的名字來命名，也有對某些成分進(jìn)行改良稱作 改良 培養(yǎng)基。 生長素類用 NaOH、細(xì)胞分裂素用 HCl溶解 （ 6）有機(jī)附加物 ?椰乳 液體胚乳（紗布 濾渣 ） 80℃ 水浴濾液（ 20分鐘） 過濾 （去蛋白） 高溫高壓滅菌 冰箱保存 ?酵母提取液 酵母粉（加水煮沸 30分鐘） 過濾去渣 消毒 ２、培養(yǎng)基的配制及滅菌 培養(yǎng)基配制程序： 取適量蒸餾水放入容器 將母液取出混合 將瓊脂和糖加入容器 蒸餾水定容至 所需體積 調(diào)整 pＨ 分裝培養(yǎng)瓶 培養(yǎng)基的滅菌： 濕熱滅菌法，滅菌 15~20min 某些遇熱不穩(wěn)定的物質(zhì)如 IAA、 ZT等進(jìn)行過（抽）濾滅菌 植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的成敗除與培養(yǎng)基的組分有關(guān)外，另一個重要因素就是 外植體本身 ，為了使外植體適于在離體培養(yǎng)條件下生長，使組織培養(yǎng)工作順利進(jìn)行，有必要對外植體進(jìn)行選擇與處理。 ３、濕度 培養(yǎng)瓶內(nèi)相對濕度常是 100%，培養(yǎng)室一般要求相對濕度保持在 7080%，相對濕度 過低影響培養(yǎng)物生長和分化，應(yīng)向室內(nèi)噴灑水，以提高濕度；過高雜菌滋生，大量污染，應(yīng)及時地通風(fēng)除濕 。 ⑶弱光 ? 試管瓶內(nèi)光照一般比太陽光弱，幼苗生長也較弱，不能受太陽光直接照射。 2023年 2月 2日星期四 上午 4時 13分 33秒 04:13: 1比不了得就不比，得不到的就不要。 04:13:3304:13:3304:13Thursday, February 2, 2023 1知人者智，自知者明。 上午 4時 13分 33秒 上午 4時 13分 04:13: 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 04:13:3304:13:3304:132/2/2023 4:13:33 AM 1以我獨沈久，愧君相見頻。 ⑤ 適溫 生長，熱擊處理 ⑥ 使用透氣性