基因工程技術(shù)-文庫吧資料
2025-01-12 09:59本頁面
【正文】 “切割”。 三、 “分子運(yùn)輸車” ——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體： ? 如果把兩種來源不同的 DNA用同一種限制酶來切割，會(huì)怎樣呢？ 會(huì)產(chǎn)生 相同的黏性末端 ，然后讓兩者的黏性末端 黏合 起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。 ③說明有標(biāo)記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別的是 ── “氨芐青霉素抗性基因” ④ 說明沒有危害 ── 此質(zhì)粒來自大腸桿菌。 ——質(zhì)粒： ? 大腸桿菌的質(zhì)粒： ①說明質(zhì)粒能復(fù)制并能帶著插入的目的基因一起復(fù)制的是 ──“復(fù)制原點(diǎn) ”。 最常用的質(zhì)粒 是 大腸桿菌的質(zhì)粒 ，其中常含有 抗藥基因 ，如抗四環(huán)素、氨芐青霉素等的標(biāo)記基因。） 4）對受體細(xì)胞 無害、易分離 。 3）具有某些 遺傳標(biāo)記基因 ，便于進(jìn)行 篩選 。 P7練習(xí) 三、 “分子運(yùn)輸車” ——基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體： ？ ？ ， 你如何去察覺 ？ ？不能分離會(huì)怎樣？ 思考： ? 作為載體必須具備哪些條件？ 想一想 1）能夠在宿主細(xì)胞中 復(fù)制 并穩(wěn)定地 保存 。 尋根問底 兩種末端所用的連接酶是否相同？ 黏性末端： 平末端： 區(qū)分： E因此 DNA連接酶不需要模板 。 DNA聚合酶 DNA復(fù)制的時(shí)候用什么酶可以連接 DNA？ 回憶 DNA連接酶 與 DNA聚合酶 的比較 DNA連接酶和 DNA聚合酶都是 形成磷酸二酯鍵 相同點(diǎn)： 不同點(diǎn)： （ 1） DNA聚合酶只能將 單個(gè)核苷酸 加到已有的核酸片段 ， 形成磷酸二酯鍵；而 DNA連接酶是在 兩個(gè) DNA片段之間 形成磷酸二酯鍵 。 二、 “分子縫合針” —— DNA連接酶 種類： 作用部位： 兩類 E 限制酶 什么叫黏性末端？ 限制酶 ? 什么叫黏性末端？ ? 什么叫黏性末端？ 被限制酶切開的 DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè) 伸出的核苷酸 ，他們之間正好 互補(bǔ)配對 ，這樣的切口叫 黏性末端 。 4000種。 主要是從 原核生物中分離純化出來 的一種酶。 基因工程的概念 基因工程的別名 操作環(huán)境 操作對象
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