qpcr實(shí)驗(yàn)操作流程-文庫(kù)吧資料
2024-09-19 11:29本頁(yè)面
【正文】 MLV (promega) 181。l總體積181。2. microRNA：使用莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄法，原理如下圖：1） 在去RNase的PCR管中配置以下溶液.total RNAX個(gè)miR逆轉(zhuǎn)錄引物 H2O *X 181。l總體積181。l181。l181。隨后立即冰上致冷， 以防止RNA復(fù)性；3) 在該P(yáng)CR管中加入下列試劑（Promega）oligo（dT）Random primer 10mM dNTP RNase inhibitor 5 x buffer MMLV 181。l總體積12181。五、逆轉(zhuǎn)錄1. mRNA：1) 在RNase free的PCR管中配置下列溶液.Total RNA H2O 181。四、總RNA純度和完整性檢測(cè) 1） 純度檢測(cè)：取1μl RNA樣品50倍稀釋，在核酸蛋白檢測(cè)儀上測(cè)定OD值，OD260/，說明制備的RNA較純，無蛋白質(zhì)污染。2) 加入等體積的氯仿，上下顛倒混勻，靜置分層后14,000rpm，離心15min，取上清。l總體積100181。l181。l181。三、去基因組 使用RNasefree的DNase ?（Promega），按以下體系配置反應(yīng)液，37℃消化30min，65℃滅活10min。二、 總R
法律信息相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1