實(shí)驗(yàn)1-大腸桿菌的培養(yǎng)與分離-文庫(kù)吧資料
2024-08-28 22:00本頁(yè)面
【正文】 涂布分離法哪個(gè)更好呢？ 劃線分離： 方法簡(jiǎn)單，但單菌落較難分開。 ，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？ 答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。 （ 四 ）大腸桿菌的劃線分離 注意事項(xiàng) : 只蘸一次菌液 ,但要在培養(yǎng)基不同位置 連續(xù)劃線多次 . 首尾不能相接 ,培養(yǎng)皿 倒置培養(yǎng) 12~24h 劃線分離法 都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了 避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物； 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了 殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種 ，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。 . 菌種擴(kuò)增 ?搖床震蕩培養(yǎng) 12h（于 LB液體培養(yǎng)基中） 本圖來自十一學(xué)校 （ 四 ）大腸桿菌的劃線分離 分離方法 :劃線分離法和涂布分離法 劃線分離法 無菌操作臺(tái)上用接種環(huán)取菌后在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線 . 不能使用脫脂棉，否則容易吸水，造成污染。 注意事項(xiàng) : 從斜面上用接種環(huán)取菌 。 實(shí)驗(yàn)用具 ? LB固體培養(yǎng)基 ? 大腸桿菌菌液（ LB液體培養(yǎng)基） ? 培養(yǎng)皿 ? 接種環(huán) ? 酒精棉 ? 酒精燈 ? 鑷子、火柴、記號(hào)筆 配制培養(yǎng)基 包器材 滅菌 菌種擴(kuò)增 倒平板 接種、劃線 培養(yǎng) 觀察記錄 實(shí)驗(yàn)流程 二、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)操作 （一）培養(yǎng)基的配置與滅菌 取 2個(gè) 250ml的三角瓶中分別裝入 50mlLB液體培養(yǎng)基和 50mlLB固體培養(yǎng)基（剛配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮紙包裝后高壓鍋滅菌 15min。 （ 1） 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 （ 2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管 （ 3） 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。 高壓蒸氣滅菌：100kPa、 121 ℃ 下維持 1530min. 外來微生
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