實(shí)驗(yàn)1-大腸桿菌的培養(yǎng)與分離(專業(yè)版)
【正文】 ,接種過(guò)細(xì)菌的器皿應(yīng)如何處理 ? 所有接觸過(guò)菌的器皿都要先高壓滅菌后再洗滌（特別是培養(yǎng)基）；使用后的廢棄物也要高壓滅菌后再拋棄 ,如何保證不被普通的大腸桿菌所污染 ? 轉(zhuǎn)基因用的質(zhì)粒不是細(xì)菌中原有的，而是經(jīng)過(guò)改造的，通常加入了抗性基因的 DNA序列，所以可用含有相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基對(duì)菌體進(jìn)行培養(yǎng)。 劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí) 殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 ☆ 菌落 液體培養(yǎng)基： 表面生長(zhǎng) 均勻混濁生長(zhǎng) 沉淀生長(zhǎng) ☆ 無(wú)菌技術(shù) 無(wú)菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。 固體培養(yǎng)基 和 液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基 。 . 菌種擴(kuò)增 ?搖床震蕩培養(yǎng) 12h（于 LB液體培養(yǎng)基中） 本圖來(lái)自十一學(xué)校 （ 四 ）大腸桿菌的劃線分離 分離方法 :劃線分離法和涂布分離法 劃線分離法 無(wú)菌操作臺(tái)上用接種環(huán)取菌后在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線 . 不能使用脫脂棉，否則容易吸水，造成污染。 （ 3）上述方法較難區(qū)別同類的不同物種，需借助化學(xué)和進(jìn)一步的形態(tài)觀察，如用 革蘭氏染色法 等。 如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基，可再加入 . 自養(yǎng)型微生物 含碳有機(jī)物 （ 3）若除去成分②，加入（ CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。 分離后 ,一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)菌落 ,這是 消除污染雜菌的通用方法 ,也是用于 篩選高表達(dá)量菌株 的最簡(jiǎn)便方法之一 涂布分離法 :是指將培養(yǎng)的菌液稀釋一定的倍數(shù) ,然后取一定量稀釋液加在固體培養(yǎng)基上 ,用玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上 . 劃線分離法和涂布分離法哪個(gè)更好呢？ 劃線分離： 方法簡(jiǎn)單，但單菌落較難分開。 是指殺滅或清除環(huán)境中一切微生物（包括 芽胞 、 孢子 ） 的方法 消毒的方法： 100℃ 煮沸 56min 巴氏消毒法： 7075 ℃ 下煮 30min或 80 ℃ 下煮 15min 用 75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒 氯氣消毒水源 紫外線消毒 …… 滅菌
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