實驗1-大腸桿菌的培養(yǎng)與分離(文件)
【正文】 … 滅菌的方法： 灼燒滅菌 干熱滅菌： 160170 ℃ 下加熱 12h。 （ 1） 培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 （ 2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管 （ 3） 實驗操作者的雙手 答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。 注意事項 : 從斜面上用接種環(huán)取菌 。 （ 四 ）大腸桿菌的劃線分離 注意事項 : 只蘸一次菌液 ,但要在培養(yǎng)基不同位置 連續(xù)劃線多次 . 首尾不能相接 ,培養(yǎng)皿 倒置培養(yǎng) 12~24h 劃線分離法 都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了 避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物； 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了 殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種 ，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。 分離后 ,一個菌體便會形成一個菌落 ,這是 消除污染雜菌的通用方法 ,也是用于 篩選高表達量菌株 的最簡便方法之一 涂布分離法 :是指將培養(yǎng)的菌液稀釋一定的倍數(shù) ,然后取一定量稀釋液加在固體培養(yǎng)基上 ,用玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上 . 劃線分離法和涂布分離法哪個更好呢？ 劃線分離： 方法簡單，但單菌落較難分開。（ 2）注意滅菌操作原則，滅菌徹底，降低環(huán)境污染概率。 （ 2） 顯微鏡觀察其形態(tài)、大小 、看是否有菌絲、孢子、芽孢。如果培養(yǎng)皿中已形成菌落，則會導(dǎo)致菌隨水?dāng)U散，很難再分成單菌落，達不到分離目的。 如不想浪費此培養(yǎng)基，可再加入 . 自養(yǎng)型微生物 含碳有機物 （ 3）若除去成分②，加入（ CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。 （ 7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分 。 （ 5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進行的是 。 【 課堂練習(xí) 】 例 1．關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是（ ）
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