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實(shí)驗(yàn)1-大腸桿菌的培養(yǎng)與分離(文件)

 

【正文】 … 滅菌的方法: 灼燒滅菌 干熱滅菌: 160170 ℃ 下加熱 12h。 ( 1) 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 ( 2) 玻棒、試管、燒瓶和吸管 ( 3) 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 答:無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。 注意事項(xiàng) : 從斜面上用接種環(huán)取菌 。 ( 四 )大腸桿菌的劃線(xiàn)分離 注意事項(xiàng) : 只蘸一次菌液 ,但要在培養(yǎng)基不同位置 連續(xù)劃線(xiàn)多次 . 首尾不能相接 ,培養(yǎng)皿 倒置培養(yǎng) 12~24h 劃線(xiàn)分離法 都要灼燒接種環(huán)?在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么? 答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了 避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物; 每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了 殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種 ,使下一次劃線(xiàn)時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端,從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加,使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。 分離后 ,一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)菌落 ,這是 消除污染雜菌的通用方法 ,也是用于 篩選高表達(dá)量菌株 的最簡(jiǎn)便方法之一 涂布分離法 :是指將培養(yǎng)的菌液稀釋一定的倍數(shù) ,然后取一定量稀釋液加在固體培養(yǎng)基上 ,用玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上 . 劃線(xiàn)分離法和涂布分離法哪個(gè)更好呢? 劃線(xiàn)分離: 方法簡(jiǎn)單,但單菌落較難分開(kāi)。( 2)注意滅菌操作原則,滅菌徹底,降低環(huán)境污染概率。 ( 2) 顯微鏡觀察其形態(tài)、大小 、看是否有菌絲、孢子、芽孢。如果培養(yǎng)皿中已形成菌落,則會(huì)導(dǎo)致菌隨水?dāng)U散,很難再分成單菌落,達(dá)不到分離目的。 如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基,可再加入 . 自養(yǎng)型微生物 含碳有機(jī)物 ( 3)若除去成分②,加入( CH2O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。 ( 7)若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分 。 ( 5)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是 。 【 課堂練習(xí) 】 例 1.關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是( )
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