第十六章細胞因子與細胞粘附因子的測定-文庫吧資料
2024-08-14 13:26本頁面
【正文】 SA方法ELISA法是應用最為廣泛的非均相酶標免疫分析技術，一步或多步的抗原抗體反應和一步酶促反應構成 ELISA的基本步驟，可作定性或定量分析?；瘜W增活性 (chemokinesis)： 細胞因子增強細胞的隨機運動能力的特性 ,可采用瓊脂糖小滴化學動力學試驗檢測。趨化性 (chemotaxis)： 誘導細胞向由 趨化因子低濃度出向 趨化因子高濃度處作定向移動的特性 ,可采用瓊脂糖和微孔小室趨化試驗。 標本稀釋度log4兩孔平均CPE細胞病變抑制程度細胞病變抑制積累細胞病變積累細胞病變抑制率3 0 4 16 0 16/16(100%)4 0 4 12 0 12/12(100%)5 0 4 8 0 8/8(100%)6 4 4/(73%)7 4 (27%)8 0 0 0 8 0/8(0%)細胞病變抑制法結果判斷舉例 * *結果： CPEI50稀釋度介于 4647之間，距離比例為 (7350)/(7327) =，效價為 ；同法計算 IFN標準品的 CPEI50稀釋度，將 IFN效價換算成國際單位， IFN國際單位 =樣品 CPEL50的稀釋度 /標準品CPEI50稀釋度 標準品的單位。根據(jù)病變程度找出 CPEI50的標本稀釋范圍，并以此計算出距離比例和確定 IFN效價。細胞毒活性測定法常用于 TNF等的測定252。182。182。 TNF活性測定靶細胞：小鼠成纖維細胞株 L92 LM、 注意：182。 TNFα 和 TNFβ 與同一受體結合，故兩者生物學活性相似216。細胞病變效應 (CPE)、216。MDBK 多種族的 IFNα和 IFNγ本法常用于 IFN等的測定 ， IFN可誘導細胞產(chǎn)生抑制病毒RNA和 DNA合成的酶，保護細胞不受病毒感染，產(chǎn)生細胞病變效應（ CPE）。Ratec 大鼠干擾素252。Wish 、 Hep2/c 人干擾素252。應用系列稀釋的細胞因子標準品，制作其活性與劑量關系的標準曲線，以此作為待測品活性的定量測定的基礎。也可通過結晶紫、萘酚藍黑、 MTT、 NBB等著染活細胞，再用脫色液脫出染料后酶標儀比色測定吸光值。試驗時，與細胞增殖或抑制方法一樣，以已知活性的細胞因子標準品為對照。結果 客觀易于自 動化；適 用于大標本量 的測定 方法的特異性受依賴細胞株影響；放射性污染(1) 放射性核素摻入法常 見 細 胞 因 子 3HTdR摻 入 檢 測 法 所 需 細 胞 及 參 考 試 驗 條 件細 胞 株 所需濃度 （細胞數(shù) /ml） 3HTdR前培養(yǎng)時間 3HTdR后培養(yǎng)時間 檢測細胞因子 210 5 48 1820 IL1L929 210 5 56 16 IL1CTLL2 105 24 46 IL2FDCP1,32DCL27 510 4 24 48 IL3 105 24 46 IL4CH12 510 3 48 6 IL5
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