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構象性蛋白質芯片的制造原理-文庫吧資料

2024-08-07 10:30本頁面
  

【正文】 片,也就是構象性蛋白質芯片。然后將二糖包被在吸附蛋白表面,因為糖是多羥基物質,可與蛋白質形成氫鍵,造成一個糖殼,保護蛋白質不在制片過程中變性,使模板分子的結構信息完整保留下來,這樣才可能最終以印跡穴的形式體現出來。首先是選擇蛋白吸附的固相基質云母,因為云母表面非常之平,達原子級光滑,這樣才能保證最后做成的印跡模表面準確地反映模板分子的空間拓撲結構,避免自身表面的起伏噪聲對構象依賴的蛋白質識別的影響;且由于其表面天然的親水性和電負性,有利于保持蛋白構象。應該說這種芯片原理與99年一篇Nature文章提到的模板印記技術特異識別蛋白質的思想相關8。構象性蛋白質芯片: 但是還應該有另一種途徑來制造蛋白質芯片,而且更適合于模具的制備和終端產品的大規(guī)模生產,特別是更易與計算機技術偶聯起來,最終在蛋白質組學研究上代替或淘汰現有的二維凝焦電泳偶聯生物質譜的通用方法5。Carl . Borrebaeck所在的瑞典Lund大學免疫技術系正從事著這方面的工作,期望從這里找到突破7。 另外,抗原抗體反應是目前所知生物識別最特異的類型,基于抗體的免疫測定(最簡單如ELISA)已經使用了許多年,作為一種很有效的診斷工具,在全世界一片Array的狂潮中,人們自然會想到將抗體排成陣列。發(fā)現在一大片G蛋白點的中央,單獨的一個FRB的點可以被區(qū)別出來。這些都是用小部分的膜進行實驗的。這幾位先鋒科學家利用這些簡單的手段制成了每平方厘米有1600個點的蛋白質微陣列。每個位點中蛋白質都會以多種多樣的取向定位于膜上,保證于靶分子結合的有效性。他們在點樣溶液中加入40%甘油以防止蛋白變性??上驳氖墙衲?月8日Gavin MacBeath and Stuart Schreiber在Science上首先報道了利用蛋白質微陣列研究蛋白質相互作用及與小分子作用的研究6?,F在DNA芯片的研究正如火如荼,利用此高通量手段,研究者可以方便地研究眾多的基因在mRNA水平上在某種特定情況下的轉錄變化。應用大規(guī)模排陣和分子雜交的思想成功地制造出DNA芯片,應用類似的思想也可以制造蛋白質芯片(protein chip),聯合DNA芯片可以完整地檢測特定組織細胞基因的表達情況。蛋白質芯片: 真正研究基因表達譜必然要在兩個層次上進行,mRNA 和功能性蛋白質,分別對應于中心法則的兩個階段。這樣將具體的分子信息與細胞的生理特征改變聯系起來,極有可能以前所未有的速度揭示生命活動過程的精細機制,并成批地進行功能克隆新基因或將孤兒基因與確定的生物學功能聯系起來;另一方面為臨床診斷、預后評價提供全新的標準和模式,為新藥設計提示準確的靶分子而且提供快速廉價的分析手段。有關DNA芯片的文章一經出現就在描述此方面的應用上展示了誘人的魅力5。多種高技術的融合最終使DNA芯片走
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