酶與蛋白質(zhì)工程-第1章-蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)工程-文庫吧資料
2024-08-29 00:55本頁面
【正文】 極性） 由于纈氨酸上的非極性基團(tuán)與相鄰非極性基團(tuán)間在疏水力作用下相互靠攏，并引發(fā) 所在鏈扭曲為束狀 ，整個蛋白質(zhì)由球狀變?yōu)殓牭缎?，與氧結(jié)合功能喪失，導(dǎo)致病人窒息甚至死亡 ? 鐮刀狀貧血病 — 血液中大量出現(xiàn)鐮刀紅細(xì)胞，患者因此缺氧 窒息 正常細(xì)胞 鐮刀形細(xì)胞 ? 它是 最早認(rèn)識的一種分子病 。絲心蛋白具有抗張強度高，質(zhì)地柔軟的特性，但不能拉伸。呈平行的和反平行的比較伸展的構(gòu)象。主鏈內(nèi)部形成 H鍵，不涉及側(cè)鏈 R 典型的 α螺旋是 旋，一周螺旋 基酸，跨越 13個原子 卷發(fā) (燙發(fā) )的生物化學(xué)基礎(chǔ) ? 永久性卷發(fā) (燙發(fā) )是一項生物化學(xué)工程 (biochemical engineering),a角蛋白 在燙發(fā)劑、濕熱條件下頭發(fā)中的二硫鍵和氫鍵打破，伸展轉(zhuǎn)變?yōu)??構(gòu)象，在定型劑作用下冷卻干燥時，發(fā)芯 結(jié)構(gòu)重組并穩(wěn)定 ? 這是因為 a角蛋白的側(cè)鏈 R基一般都比較大，不適于處在 ?構(gòu)象狀態(tài)，此外 a角蛋白中的螺旋多肽鏈間有著很多的二硫鍵交聯(lián)，這些交聯(lián)鍵也是當(dāng)外力解除后使肽鏈恢復(fù)原狀 (a螺旋構(gòu)象 )的重要力量。每圈螺旋 。可在 8mol/L尿素或 6mol/L鹽酸胍 存在下，用過量的?巰基乙醇處理，使二硫鍵還原為巰基 拆分 N末端和 C末端氨基酸殘基的確定 — 為氨基酸序列排列建立兩個重要的參考點 N端分析方法： ① 二硝基氟苯法 (DNFB法 ) ② 丹磺酰氯法 (DNS法 ) 丹磺酰 氨基酸有很強的熒光性質(zhì) ③ 苯異硫氰酸 (酯 )法 (PITC法、 PTC法、 PTH法、 Edman降解法 ) 由于其連續(xù)反應(yīng)特性， 成為蛋白質(zhì)序列分析儀 的分析原理！ C末端分析方法 肼解法： 多肽與肼在無水條件下加熱， C端氨基酸即從肽鏈上解離出來，其余的氨基酸則變成肼化物。 (5) 重建完整多肽鏈的一級結(jié)構(gòu) 。 (3) 用兩種或幾種不同的斷裂方法將多肽鏈裂解成較 小的片段 。主要是因為肽鏈結(jié)構(gòu)的高度共振穩(wěn)定性 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) 一級結(jié)構(gòu) （ primary structure）：即蛋白質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，是指多肽鏈 上各種氨基酸殘基的種類和排列順序，也包括二硫鍵的數(shù)目 G l y I l e V a l G l u G l n C y s C y s A l a S e r V a l C y s S e r L e u T y r G l n L e u G l u A s n T y r C y s A s nP h e V a l A s n G l n H i s L e u C y s G l y S e r H i s L e u V a l G l u A l a L e u T y r L e u V a l C y s G l y G l u A r g G l y P h e P h e T y r T h r P r o L y s A l aS SSSSS5 1 0 1 5 2 15 1 0 1 5 2 0 2 5 3 0AB牛胰島素的一級結(jié)構(gòu)： 51個氨基酸， A（ 21肽）、 B（ 30肽）兩條肽鏈， A鏈內(nèi)一對 SS， A和 B鏈間 2對 SS 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 將肽段順序進(jìn)行疊聯(lián)以確定完整的順序 將肽段分離并測出順序 專一性裂解 末端氨基酸測定 拆開二硫鍵 純蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)順序測 定基本戰(zhàn)略 一級結(jié)構(gòu)測定的基本流程 : (1) 拆分蛋白質(zhì)分子的多肽鏈 。2) 氨基酸是兩性電解質(zhì)，其解離程度取決于所處溶液的酸堿度 ? 等電點 (isoelectric point, pI) ? 在某一 pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，成為兼性離子，呈電中性，在電場中既不向陽極也不向陰極移動。 pH=pI +OH pHpI +H+ +OH +H+ pHpI 帶電荷為零 帶電荷為正 帶電荷為負(fù) CHNH 3C O O R CHNH 2CO O RCH COO HRNH 3氨基酸的
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