蛋白質(zhì)工程制藥1-文庫(kù)吧資料
2024-11-04 05:29本頁(yè)面
【正文】 藐巴傾圃懈刷恍昧猜芽蛋白質(zhì)工程(gōngch233。n)其性質(zhì)的目的。)與構(gòu)建,上述兩種蛋白質(zhì)改造方法，通常是從一個(gè)順序、結(jié)構(gòu)和功能的蛋白質(zhì)出發(fā)，根據(jù)一定的目標(biāo)和設(shè)計(jì)方案，使用多肽合成或者基因工程的方法，改變(gǎibi224。,三、全新蛋白質(zhì)的設(shè)計(jì)(sh232。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。 結(jié)構(gòu)域是蛋白質(zhì)分子中一種根本的結(jié)構(gòu)單位，結(jié)構(gòu)域拼接是通過(guò)基因操作把位于兩種不同蛋白質(zhì)上的幾個(gè)結(jié)構(gòu)域連接在一起，形成融合蛋白，它兼有原來(lái)兩種蛋白的性質(zhì)。ng)，在二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)之間還有一個(gè)結(jié)構(gòu)層次，即結(jié)構(gòu)域。,二、蛋白質(zhì)分子(fēnzǐ)的高級(jí)改造〔結(jié)構(gòu)域的拼接〕,研究證明(zh232。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。ng)制藥1,第二十三頁(yè)，共四十三頁(yè)。,鍬熱眺粕域蘸孫生是大語(yǔ)霜扣賠瓜頸禱肆考巢柏餅喳飛新嗚以艱市豹框菲蛋白質(zhì)工程(gōngch233。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。zhǔ)，那么可能獲得在目的位點(diǎn)有各種氨基酸的突變株，有利于研究不同氨基酸對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的影響。系在合成寡核苷酸到某目的改變的氨基酸時(shí)，反響系統(tǒng)中同時(shí)參加4種dNTP，以期出現(xiàn)每一種密碼。,盒式突變是定點(diǎn)突變的一種方式。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。)，在一個(gè)位點(diǎn)上產(chǎn)生20種不同氨基酸的突變體，從而可以對(duì)蛋白質(zhì)分子中某些氨基酸進(jìn)行“飽和性〞分析。n)技術(shù),1985年Wells提出的一種基因修飾(xiūsh236。ng)制藥1,第二十頁(yè)，共四十三頁(yè)。,蔫登到坡踐醫(yī)香溉闊殷烷鉀著唆糊席擂卯央謊釁瑚刷做毀撕準(zhǔn)舒烈戀蛇沉蛋白質(zhì)工程(gōngch233。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。nɡ ɡǎn jūn)中穩(wěn)定存在，而絕大多數(shù)的環(huán)狀分子都含有突變基因。nɡ ɡǎn jūn)中穩(wěn)定存在，只有環(huán)狀DNA才能在大腸桿菌(d224。假設(shè)同一管子中的兩條DNA鏈結(jié)合，會(huì)形成線性DNA分子，它不能在大腸桿菌(d224。 ch225。由于兩個(gè)反響中引物的位置不同，所以PCR擴(kuò)增后，產(chǎn)物有不同的末端。ng)制藥1,第十八頁(yè)，共四十三頁(yè)。,溜的仿獵蕭揣梁擎敗懦扮擠樁簾佑苞八哦勞縮之鴿廬命示吹拙俞鵬郡院使蛋白質(zhì)工程(gōngch233。別離出突變型基因后，在適宜的表達(dá)系統(tǒng)中合成突變型蛋白質(zhì)。n)技術(shù),特點(diǎn)：利用PCR技術(shù)定點(diǎn)誘變，可使突變體大量擴(kuò)增，提高誘變率 以研究基因?yàn)槟０?，用人工合成的寡核苷酸〔含有一個(gè)或幾個(gè)非互補(bǔ)(h249。,〔2〕 寡核苷酸介導(dǎo)的PCR誘變(y242。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。ng)制藥1,第十六頁(yè)，共四十三頁(yè)。,訟鑰奧漿淺宣槍斌綠烏辱慣惑秒氫錫汛冊(cè)柳蜀糜近蒼羊浩恕速各構(gòu)杯矣捏蛋白質(zhì)工程(gōngch233。經(jīng)轉(zhuǎn)染大腸桿菌，雙鏈分子在胞內(nèi)分別復(fù)制，因此就得到兩種類型的噬菌斑，含錯(cuò)配堿基的就為突變型。u bi224。)岸瑰迭攔巳抨價(jià)丑曳坤辮仿亨疙述遏納到話檬割蛋白質(zhì)工程制藥1蛋白質(zhì)工程制藥1,第十五頁(yè)，共四十三頁(yè)。,碑叛于累趁蘊(yùn)唇灼濁練字(li224。ng)的位點(diǎn)用寡聚核苷酸誘導(dǎo)或置入合成的寡聚核苷酸產(chǎn)生定位突變基因，最后將突變基因?qū)脒m宜的表達(dá)系統(tǒng)(如大腸桿菌等)即可產(chǎn)生突變體蛋白質(zhì)。ng)制藥1,第十四頁(yè)，共四十三頁(yè)。,哇蘸庇猿惰或軀橢骸巋的社迸芳廁坍濺超掇裕邊豪污跨翌詩(shī)椽新撞罐沮聰?shù)鞍踪|(zhì)工程(gōngch233。i)、順序發(fā)生改變，合成出具有預(yù)期氨基酸序列的修飾蛋白質(zhì)。,基因定位突變 根據(jù)三聯(lián)體密碼，編碼DNA〔目的基因〕確實(shí)定位點(diǎn)，改變其組成核苷酸的順序或種類(zhǒngl232。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。 目前，主要采用的基因突變方法： 基因(jīyīn)定位突變 盒式突變。ng)制藥1,第十二頁(yè)，共四十三頁(yè)。ng)改造，按改造的規(guī)模和程度可以分為： 初級(jí)改造：個(gè)別氨基酸的改變和一整段氨基酸序列的刪除、置換或插入 高級(jí)改造：蛋白質(zhì)分子的剪裁，如結(jié)構(gòu)域的拼接 從頭設(shè)計(jì)合成新型蛋白質(zhì),吾彝污定弓邵嗓臼奶拈匹金投孿慚騙普越眾獰理鍋礫其迎畸京憶勁鴕奪頒蛋白質(zhì)工程(gōngch233。,第二節(jié)、蛋白質(zhì)的分子(fēnzǐ)改造,在基因水平上對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行(j236。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。 進(jìn)行缺失(quē shī)突變時(shí)，應(yīng)防止直接利用天然存在的限制性酶切位點(diǎn)進(jìn)行刪除。,如果對(duì)目的蛋白的三維結(jié)構(gòu)一無(wú)所知，那么可以在目的序列中隨機(jī)插入六聚體接頭以鑒定功能性結(jié)構(gòu)域。ng)制藥1蛋白質(zhì)工程(gōngch233。)非同源蛋白組成嵌
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