神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及應(yīng)用-文庫吧資料
2024-08-04 06:09本頁面
【正文】 取兩側(cè)大腦皮質(zhì)放入接種培養(yǎng)液中 ， 用 DHank’s沖洗二遍 。該實(shí)驗(yàn)室共列出了三種神經(jīng)元限定性培養(yǎng)添加物的配方，代號分別為 N N N3。 Bottenstein實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過長期研究發(fā)現(xiàn)如下添加劑比較好 人轉(zhuǎn)鐵蛋白、牛胰島素、硒酸鈉、孕酮、腐胺加入到 F12與 DMEM 1:1混液中，可以代替血清添加物，用來培養(yǎng)大鼠 CNS的成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞。 選擇添加劑的基本過程 ? 限定連續(xù)細(xì)胞系的體外生長條件 。 大多數(shù)神經(jīng)元在基礎(chǔ)培養(yǎng)液中即使能夠存活也為期不長 ， 更難以分裂 。 神經(jīng)元的分離細(xì)胞培養(yǎng)方法 1956年 ， Nakai首創(chuàng)了神經(jīng)組織的分離培養(yǎng)方法 材料來源：胚胎動物神經(jīng)組織 ? 神經(jīng)元增殖發(fā)生于胚胎期 ? 形態(tài)學(xué)分化和化學(xué)分化程度低 ， 體外存活強(qiáng) ，成熟后則相反 ， 且神經(jīng)元會受到大的普遍損傷 。 ? 九十余年來 ， 這項(xiàng)技術(shù)已從組織塊 （ 或植塊 ） 培養(yǎng)（ explant culture） 發(fā) 展 到 分 離 細(xì) 胞 培 養(yǎng)(dissociated cell culture)， 并逐漸與多種現(xiàn)代技術(shù)結(jié)合起來 ， 在神經(jīng)科學(xué)各領(lǐng)域發(fā)揮了重大作用 。神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及應(yīng)用 田東萍 汕大醫(yī)學(xué)院病理教研室 神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)的歷史 ? 神經(jīng)組織的體外培養(yǎng)方法是由 Harrison， 于 1907年首創(chuàng)的 。 ? 由于該方法具有簡化細(xì)胞生化環(huán)境 、 明確生長條件 、便于施加實(shí)驗(yàn)因素及容易獲得活體直接觀測結(jié)果等優(yōu)點(diǎn) ， 因而已成為研究神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的有效手段 。 ? 組織塊培養(yǎng) →分離細(xì)胞培養(yǎng) →甚至單一型細(xì)胞培養(yǎng) 神經(jīng)組織的植塊培養(yǎng)法 ? 懸滴培養(yǎng)方法 ? 單蓋玻方法 ? 雙蓋玻方法 1925 ? 改良雙蓋玻方法 ? 培養(yǎng)物：
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