神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及應(yīng)用-wenkub.com
2025-07-19 06:09 本頁(yè)面
【正文】 2. 特殊培養(yǎng)階段：培養(yǎng)的 9到 12天之間，有較多神經(jīng)元死亡，以后存活下的細(xì)胞突起長(zhǎng)而多，互相形成網(wǎng)絡(luò)，電鏡下可見突觸。 2. 激光共聚焦掃描顯微鏡（ laser confocal scanning microscope, LCSM) ： 研究細(xì)胞內(nèi)成分變化，離子改變等，三維重建 3. 膜片鉗技術(shù)，細(xì)胞表面通道和離子流動(dòng)，電變化。 ? 370C 5%CO2培養(yǎng) 2天后換生長(zhǎng)培養(yǎng)液 大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)方法 神經(jīng)元體外生長(zhǎng)特征 接種密度與體外存活率 ? 當(dāng) 96孔 每孔 20223000個(gè) 或 700010000個(gè)/cm2幾乎無神經(jīng)元存活 ? 當(dāng) 800012022個(gè) /96孔 或 4萬個(gè) /cm2 存活率最大 。 ? 剪碎 ， ,用 DHank’s充分洗去殘血 ? 加入 510倍量 %胰蛋白酶 ， 移入離心管中放到水370C浴箱中消化 2025分鐘 。刪去其中任何一種添加物都可導(dǎo)致成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞生長(zhǎng)狀況銳減。 因此可根據(jù)神經(jīng)元的特性 ， 給基礎(chǔ)培養(yǎng)中再添加某些特殊物質(zhì) 。 ? 組織塊培養(yǎng) →分離細(xì)胞培養(yǎng) →甚至單一型細(xì)胞培養(yǎng) 神經(jīng)組織的植塊培養(yǎng)法 ? 懸滴培養(yǎng)方法 ? 單蓋玻方法 ? 雙蓋玻方法 1925 ? 改良雙蓋玻方法 ? 培養(yǎng)物： CNS灰質(zhì) 、 白質(zhì) 、 外周神經(jīng)節(jié)或神經(jīng)小段 ↓ ↓ 突起 非神經(jīng)元外伸 優(yōu)點(diǎn) ? 所需培養(yǎng)液量少 ， 可反應(yīng)組織代謝中 微量生化改變 ? 保留了植塊內(nèi)組織特征 不足 ? 培養(yǎng)空間小 ， O2 CO2供少
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