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免疫標(biāo)準(zhǔn)操作程序sop-文庫吧資料

2025-07-21 22:10本頁面
  

【正文】 不同區(qū)帶轉(zhuǎn)印至NC膜,被測血清中某種ENA抗體與NC膜條上某種ENA抗原反應(yīng),在加上酶標(biāo)第二抗體。也可以使用血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測。[該SOP變動(dòng)程序]本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:專業(yè)主管、科主任。7. 用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì),請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程操作。5. 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。3. 洗板時(shí)所用的洗水紙請(qǐng)勿反復(fù)。[注意事項(xiàng)]1. 試劑使用前應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加,注意均勻用力。2. 閾值的計(jì)算:1) 2)閾值=[臨床意義]實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室戊型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(IgM)WHDEYYJYKMY012共2頁 第2頁20050101HEV屬杯狀病毒科,所致戊型肝炎的臨床癥狀和流行病學(xué)都與甲肝相似,其急性肝炎的死亡率高(1%~2%)。13. 判斷:終止后應(yīng)在10分鐘內(nèi)完成判讀,用空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀在450nm波長 處測定吸光值。11. 溫育(三):37℃顯色10分鐘。9. 洗板(二):方法同洗板(一)。7. 加酶標(biāo)二抗:各孔中加入酶標(biāo)二抗100ul。5. 溫育(一):充分混勻,37℃溫育20分鐘。3. 加標(biāo)本和留空白:將每份待檢標(biāo)本10ul分別加入已有樣品稀釋液的各孔中,留下一孔不加標(biāo)本做空白對(duì)照,標(biāo)好位置。[操作步驟]1. 配洗液:將洗滌液(20倍)與蒸餾水按1:19的比例稀釋,充分搖勻后備用。[測定原理]采用戊型肝炎病毒(HEV)特異性抗原成分作為包被抗原,采用ELISA法檢測戊型肝炎病毒抗體。也可以使用血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測。[該SOP變動(dòng)程序]本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:專業(yè)主管、科主任。7. 用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì),請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程操作。5. 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。3. 洗板時(shí)所用的洗水紙請(qǐng)勿反復(fù)。[注意事項(xiàng)]1. 試劑使用前應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加,注意均勻用力。2. 閾值的計(jì)算:1) 2)閾值=[臨床意義]實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室戊型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(IgG)WHDEYYJYKMY011共2頁 第2頁20050101HEV屬杯狀病毒科,所致戊型肝炎的臨床癥狀和流行病學(xué)都與甲肝相似,其急性肝炎的死亡率高(1%~2%)。13. 判斷:終止后應(yīng)在10分鐘內(nèi)完成判讀,用空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀在450nm波長 處測定吸光值。11. 溫育(三):37℃顯色10分鐘。9. 洗板(二):方法同洗板(一)。7. 加酶標(biāo)二抗:各孔中加入酶標(biāo)二抗100ul。5. 溫育(一):充分混勻,37℃溫育20分鐘。3. 加標(biāo)本和留空白:將每份待檢標(biāo)本10ul分別加入已有樣品稀釋液的各孔中,留下一孔不加標(biāo)本做空白對(duì)照,標(biāo)好位置。[操作步驟]1. 配洗液:將洗滌液(20倍)與蒸餾水按1:19的比例稀釋,充分搖勻后備用。[測定原理]采用戊型肝炎病毒(HEV)特異性抗原成分作為包被抗原,采用ELISA法檢測戊型肝炎病毒抗體。也可以使用血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測。[該SOP變動(dòng)程序]本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:專業(yè)主管、科主任。7. 用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì),請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程操作。5. 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。3. 洗板時(shí)所用的洗水紙請(qǐng)勿反復(fù)。[注意事項(xiàng)]1. 試劑使用前應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加,注意均勻用力。HDV感染的血清學(xué)檢測測定抗HDV—IgM。2. 閾值的計(jì)算:1) 2)閾值=[臨床意義]實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室丁型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(IgM)WHDEYYJYKMY010共2頁 第2頁20050101HDV是一種有缺陷的病毒,表面被HBV包膜蛋白包裹。13. 判斷:終止后應(yīng)在10分鐘內(nèi)完成判讀,用空白對(duì)照調(diào)零,用酶標(biāo)儀在450nm波長處測定吸光值。11. 溫育(三):37℃顯色10分鐘。9. 洗板(二):方法同洗板(一)。7. 加酶標(biāo)二抗:各孔中加入酶標(biāo)二抗100ul。5. 溫育(一):充分混勻,37℃溫育20分鐘。3. 加標(biāo)本和留空白:將每份待檢標(biāo)本10ul分別加入已有樣品稀釋液的各孔中,留下一孔不加標(biāo)本做空白對(duì)照,標(biāo)好位置。[操作步驟]1. 配洗液:將洗滌液(20倍)與蒸餾水按1:19的比例稀釋,充分搖勻后備用。[測定原理]采用丁型肝炎病毒特異性抗原成分作為包被抗原,采用ELISA法檢測丁型肝炎病毒抗體。也可以使用血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測。[該SOP變動(dòng)程序]本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:專業(yè)主管、科主任。7. 用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì),請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程操作。5. 結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。3. 洗板時(shí)所用的洗水紙請(qǐng)勿反復(fù)。[注意事項(xiàng)]1. 試劑使用前應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加,注意均勻用力。HDV的致病性依賴于HBV,可與HBV重疊感染或共同感染,HDV感染與暴發(fā)型肝炎重癥肝炎及肝硬變密切相關(guān)。[結(jié)果判斷]1. 對(duì)空白對(duì)照調(diào)零后,方可認(rèn)為試劑盒有效并且用戶操作無誤。12. 終止:顯色完畢后立即于每孔加50ul終止液,混勻。10. 加顯色劑:每孔加入顯色劑A50ul,全部加完后,再次每孔加入顯色劑B50ul,混勻。8. 溫育(二):37℃溫育20分鐘。6. 洗板(一):洗板機(jī)洗板:洗板次數(shù)為5次,每次洗液在孔中滯留時(shí)間為15~30秒,洗液應(yīng)注滿反應(yīng)孔,確保每次吸凈無殘留,全部洗完后在毛巾或洗水紙上用力拍干。4. 加對(duì)照:在預(yù)先空下的4孔分別加入陰性對(duì)照兩孔,陽性對(duì)照兩孔每孔100ul,標(biāo)好位置,陰、陽對(duì)照應(yīng)在所有待測標(biāo)本加完后再加,以保證閾值計(jì)算的準(zhǔn)確性。2. 加樣品稀釋液:用加樣器在微孔反應(yīng)條孔中加入樣品稀釋液每孔100ul,空下四孔準(zhǔn)備加對(duì)照。樣品加入已有樣品稀釋液的包被抗原反應(yīng)孔,在隨后的溫育過程中,若樣品中含特異性抗體,則該抗體與包被抗原形成抗原—抗體復(fù)合物被吸附到固相上,再加上酶標(biāo)記的第二抗體,最終形成抗原—抗體—酶標(biāo)二抗復(fù)合物,洗滌除去未結(jié)合的游離酶,加入顯色劑后顯色,反之若樣品中不含特異性抗體,則加入顯色劑后不顯色。標(biāo)本宜新鮮,無污染,避免溶血,避免反復(fù)凍融,不可用NaN3防腐。[標(biāo)本的采取和保存]隨機(jī)靜脈血2ml,分離血清備用。標(biāo)準(zhǔn)操作程序項(xiàng) 目丁型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(IgG)方 法ELISA方法編寫人馮嵐日期2005/01/01審核人曹進(jìn)平日期2005/01/01批準(zhǔn)人陳健康日期2005/01/01文件分發(fā)部門和/或個(gè)人免疫室,醫(yī)務(wù)科本規(guī)程自2005年01月01日起實(shí)施,每2年復(fù)審一次文件編號(hào)WHDEYYJYKMY009文件版本號(hào)第1版醫(yī)務(wù)科保管者院長辦公室保管者院檔案室保管者檢驗(yàn)科主任實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室丁型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(IgG)WHDEYYJYKMY009共2頁 第1頁20050101[目的]保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。6. 封片不能重復(fù)使用。4. 不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。2. 從冷藏環(huán)境中取出的試劑盒應(yīng)置室溫平衡30分鐘再進(jìn)行測試,余者應(yīng)及時(shí)封存,置冰箱內(nèi)儲(chǔ)藏備用。急性期多為IgM型,慢性期多為IgG型,兩者均為非保護(hù)性抗體,是具有傳染性的標(biāo)志。6. 測試標(biāo)本的計(jì)算值等于或大于臨界值則為HCV抗體陽性。3. 。[結(jié)果判斷]1. ,實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效。5. 每孔加顯色劑A、B各50ul,輕輕震蕩后,37℃避光靜置10分鐘。3. 每孔加酶結(jié)合物100ul,(空白對(duì)照除外),置37℃溫育20分鐘。充分混勻后,置37℃溫育30分鐘。[操作步驟]1. 每次試驗(yàn)設(shè)陰性、陽性對(duì)照各兩孔,分別加入陰、陽性對(duì)照血清100ul,再設(shè)一孔空白對(duì)照,加入樣品稀釋液100ul。標(biāo)本宜新鮮,無污染,避免溶血,避免反復(fù)凍融,不可用NaN3防腐。[標(biāo)本的采取和保存]隨機(jī)靜脈血2ml,分離血清備用。標(biāo)準(zhǔn)操作程序項(xiàng) 目丙型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序方 法ELISA方法編寫人馮嵐日期2005/01/01審核人曹進(jìn)平日期2005/01/01批準(zhǔn)人陳健康日期2005/01/01文件分發(fā)部門和/或個(gè)人免疫室,醫(yī)務(wù)科本規(guī)程自2005年01月01日起實(shí)施,每2年復(fù)審一次文件編號(hào)WHDEYYJYKMY008文件版本號(hào)第1版醫(yī)務(wù)科保管者院長辦公室保管者院檔案室保管者檢驗(yàn)科主任實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室丙型肝炎病毒抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序WHDEYYJYKMY008共2頁 第1頁20050101[目的]保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。4. 不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。2. 保存在2~8度,在有效期內(nèi)使用??膳cHBv—DNA取得幾乎同樣的敏感性。其敏感性好于HBeAg,可彌補(bǔ)由于HBeAg變異等造成的HBeAg陰性的臨床“誤導(dǎo)”。待測樣本大于臨界值即為陽性,待測樣本小于臨界值即為陰性。6. 用酶標(biāo)儀波長450nm讀數(shù),先用空白孔調(diào)零,然后讀取各測定孔OD值。4. 每孔加入TMB顯色劑A50微升,在加入TMB顯色劑B50微升,37℃中顯色10~15分鐘。然后,依次在反應(yīng)孔內(nèi)加入待測樣品50微升,除空白孔外,每孔再加酶結(jié)合物50微升,置微型震蕩器混勻5秒后,蓋好封片放37℃孵育60分鐘。[操作步驟]1. 將包被條固定于支架并編上序號(hào)。[測定原理]用乙肝病毒Pre S1蛋白抗體和抗HBS分別用作酶標(biāo)記抗體和包被抗體。也可以使用血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測。[該SOP變動(dòng)程序]本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字:專業(yè)主管、科主任。7用本試劑盒應(yīng)視為有傳染性物質(zhì),請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室檢查規(guī)程操作。5結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。3洗板時(shí)所用的洗水紙請(qǐng)勿反復(fù)。[注意事項(xiàng)]實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室乙肝核心抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序WHDEYYJYKMY006共2頁 第2頁200501011試劑使用前應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加,注意均勻用力。幾乎所有個(gè)體在感染HBV后都能產(chǎn)生抗HBc,故它是乙肝流行病學(xué)調(diào)查的良好指標(biāo)。[臨床意義]抗HBc是HBeAg的相應(yīng)抗體,也是HBV感染后血清中最早出現(xiàn)的HBV的標(biāo)志性抗體。7. 測定:用酶標(biāo)儀讀數(shù),可選擇波長450nm(以空白孔校零)或雙波長450/630nm,讀取各孔OD值。5. 加顯色劑:先加顯色劑A,;再加顯色劑B,;充分混勻,放置37℃避光孵育15分鐘。4. 洗板:a) 手工洗板:棄去反應(yīng)板條孔內(nèi)液體拍干;用洗滌液注滿每孔,靜置5~10秒,棄去孔內(nèi)洗滌液拍干,如此反復(fù)5次,拍干。1)1:30稀釋血清(血漿)檢測結(jié)果代表臨床意義,待檢標(biāo)本可用稀釋后的洗滌液加以稀釋2)原倍血清(血漿)檢測結(jié)果代表流行病學(xué)意義。[操作步驟]1. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:從冷藏環(huán)境中取出試劑盒,在室溫下平衡30分鐘,同時(shí)將濃縮洗滌液作1:20稀釋。標(biāo)本宜新鮮,無污染,避免溶血,避免反復(fù)凍融,不可用NaN3防腐。[標(biāo)本的采取和保存]隨機(jī)靜脈血2ml,分離血清備用。標(biāo)準(zhǔn)操作程序項(xiàng) 目乙肝核心抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序方 法ELISA方法編寫人馮嵐日期2005/01/01審核人曹進(jìn)平日期2005/01/01批準(zhǔn)人陳健康日期2005/01/01文件分發(fā)部門和/或個(gè)人免疫室,醫(yī)務(wù)科本規(guī)程自2005年01月01日起實(shí)施,每2年復(fù)審一次文件編號(hào)WHDEYYJYKMY006文件版本號(hào)第1版醫(yī)務(wù)科保管者院長辦公室保管者院檔案室保管者檢驗(yàn)科主任實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪市第二民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室乙肝核心抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序WHDEYYJYKMY006共2頁 第1頁20050101[目的]保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。6封片不能重復(fù)使用。實(shí)驗(yàn)室名稱項(xiàng)目編號(hào)制定日期蕪湖市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科免疫室乙肝E抗體檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作程序WHDEYYJYKMY005共2頁 第2頁200501014不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿通用。2從冷藏環(huán)境中取出的試劑盒應(yīng)置室溫平衡30分鐘再進(jìn)行測試,余者應(yīng)及時(shí)封存,置冰箱內(nèi)儲(chǔ)藏備用。但并不意味著HBV DNA停止復(fù)制,
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