【正文】 加，DH 顯著增加（P） ，當(dāng) pH=9 時達到最高值 177。中性蛋白酶的單因素結(jié)果如圖 （b）所示，隨著 pH 值的逐漸增加，DH 顯著增加（P） ，在 pH 為 7 時達到最大值 177。（2）酶解 pH 值對 DH 的影響pH 值對 DH 的影響如圖 所示，堿性蛋白酶的單因素結(jié)果如圖 （a ） ，DH 隨著pH 值的升高先增加后再減少，變化顯著（P） ，pH 值為 9 時 DH 達到最高值 177。木瓜蛋白酶的單因素結(jié)果如圖 （c）所示，同樣，相比于堿性蛋白酶，其酶解物的 DH 較低，隨著溫度升高，DH 顯著增加（P） ，在60 ℃時，DH 達到最高值 177。中性蛋白酶的單因素實驗結(jié)果如圖 （b）所示，比較于堿性蛋白酶，其酶解物的 DH較低，當(dāng)酶解溫度由 25 ℃升至 30 ℃時,DH 顯著升高（P） ，最高值達到 177。第 3 章 高活性玉米抗氧化肽（CAPS1 ）的優(yōu)選9如圖 （a）所示，溫度對其 DH 影響顯著（P） ，隨著溫度升高，DH 逐漸上升，在 60 ℃時達到最高值 177。（1）酶解溫度對 DH 的影響酶解溫度對 DH 的影響如圖 所示，在可控酶解條件下，堿性蛋白酶的酶解效果理想，DH 能夠達到 40 %以上。 .）表示，顯著性水平為 P。 數(shù)據(jù)分析方法利用 SPSS 軟件對實驗數(shù)據(jù)進行方差分析和顯著性檢驗，結(jié)果用平均數(shù)177。第 3 章 高活性玉米抗氧化肽（CAPS1 ）的優(yōu)選7表 響應(yīng)面實驗因素水平表Table Factors and levels of RSM編碼水平因素 編碼1 0 1酶解溫度（℃） X1 50 55 60酶解 pH 值 X2 8 9 10[E]/[S]（% ） X3 8 9 10 電子束輻照技術(shù)對玉米蛋白粉水解度的影響以玉米蛋白粉為原料，分別經(jīng) 0 kGy 、 kGy、 kGy、 kGy、 kGy、 kGy 和 kGy 8 個輻照劑量進行電子束輻照處理，依次在適宜蛋白酶的最佳酶解條件下進行可控酶解處理，以 DH 作為衡量指標，檢測不同輻照劑量對玉米蛋白粉水解度的影響。建立二次回歸模型，用不失擬的回歸方程確定最優(yōu)工藝參數(shù)，決定最優(yōu)響應(yīng)因子水平 [56]。因此，依次考察了酶解溫度（T） 、酶解 pH 值、酶與底物濃第 3 章 高活性玉米抗氧化肽（CAPS1 ）的優(yōu)選6度比（[E]/[S]）對玉米蛋白粉 DH 的影響，單因素實驗設(shè)計方案如表 所示：表 單因素實驗設(shè)計表Table Design of Onefactoratatime experiment水平酶種類 因素1 2 3 4 5 6酶解溫度（℃） 40 45 50 55 60 65酶解 pH 值 6 7 8 9 10 11堿性蛋白酶[E]/[S]（%） 2 4 6 8 10 12酶解溫度（℃） 25 30 35 40 45 50酶解 pH 值 5 6 7 [E]/[S]（%） 2 4 6 8 10 12酶解溫度（℃） 40 45 50 55 60 65酶解 pH 值 4 5 6 7 8 9木瓜蛋白酶[E]/[S]（%） 2 4 6 8 10 12 蛋白酶可控酶解技術(shù)的響應(yīng)面實驗設(shè)計利用響應(yīng)面軟件 DesignExpert 中的 BBD 實驗設(shè)計進行優(yōu)化分析。 蛋白酶可控酶解技術(shù)的單因素實驗設(shè)計為了篩選玉米蛋白酶解技術(shù)的最優(yōu)蛋白酶，選用堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶分別酶解玉米蛋白粉。測定方法采用 pHstat 法 [50,51]，pHstat 法較甲醛滴定法操作簡單方便，實驗結(jié)果準確性高 [52]。 儀器與設(shè)備ESJ604 電子天平：沈陽龍騰電子有限公司；電熱鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；DK8D 恒溫水浴槽：上海精宏實驗設(shè)備有限公司；Starter300 便攜式 pH 計：上海奧豪斯儀器有限公司；JJ1 型精密增力電動攪拌器：金壇榮華儀器制造有限公司；單道移液器（200 μL，1000 μL ）：北京東林昌盛生物科技有限公司；CR20B2 型離心機：日本日立工機公司；MH2 型微量振蕩器：江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司；RT6000 酶標儀：美國雷杜公司；第 3 章 高活性玉米抗氧化肽（CAPS1 ）的優(yōu)選510Mev/15KW 輻照電子直線加速器：長春易孚輻照加速器有限公司；JSM6700F 場發(fā)射掃描電子顯微鏡： JEOL 日本電子公司。第 3 章 高活性玉米抗氧化肽（CAPS1 ）的優(yōu)選4第 2 章 高效水解玉米蛋白粉的關(guān)鍵技術(shù)研究在高效水解玉米蛋白粉的關(guān)鍵技術(shù)研究中，以水解度（DH）為衡量指標，將借助單因素實驗和響應(yīng)面實驗設(shè)計等研究方法，對比分析堿性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶 3 種蛋白酶對玉米蛋白粉酶解過程中的 DH 的影響情況，獲得高水解度玉米蛋白酶解物的最佳工藝參數(shù)；在此基礎(chǔ)上，本文將首次開展電子束輻照技術(shù)對玉米蛋白粉酶解效果的研究，重點分析不同輻照劑量（ kGy）處理玉米蛋白粉后對其水解度的影響，擬設(shè)計一條水解度為 40 %以上的玉米蛋白粉酶解技術(shù)的工藝路線，為后期玉米蛋白粉的綜合利用開發(fā)功能肽提供技術(shù)支撐。有研究證實，玉米抗氧化肽的活性測定方法較為普遍，多數(shù)以自由基清除率為考察指標 [19]。何慧等研究報道，玉米大豆復(fù)配蛋白可以制備獲得降血壓肽，而且中性蛋白酶是酶解蛋白的最適宜酶 [18]。隨著相關(guān)研究的逐步深入，高 F 值低聚肽的生產(chǎn)與應(yīng)用為玉米蛋白粉的精深加工開辟了新方向。（5）制備玉米蛋白肽近期研究發(fā)現(xiàn)，玉米蛋白粉可用以制備高 F 值低聚肽、降血壓肽和抗氧化肽等蛋白肽。段純明等研究了通過擠壓膨化技術(shù)處理玉米蛋白粉可以提高玉米黃色素的提取率 [14]。（4）制備玉米黃色素玉米蛋白粉經(jīng)水解、萃取、蒸發(fā)濃縮等操作能夠制備玉米黃色素。近年來有研究報道，玉米醇溶蛋白的制備方法已經(jīng)由過去的異丙醇提取法發(fā)展為乙醇提取法。（3）制備玉米醇溶蛋白研究發(fā)現(xiàn)，玉米醇溶蛋白具有獨特的溶解性、成模性和生物活性，可用于防潮、抗氧化、保鮮、防靜電等。研究人員發(fā)現(xiàn)，谷氨酰胺一般聚集于玉米醇溶蛋白，而玉米蛋白主要由醇溶蛋白構(gòu)成，所以可由玉米蛋白粉制得谷氨酰胺肽。用玉米蛋白粉飼喂牛，可以使在瘤胃中不易被消化的蛋白質(zhì)能在小腸中被更好地吸收 [10]。玉米蛋白粉飼料可替代豆餅和菜粕，通常作為家禽配合飼料的主要組分。目前的研究第 1 章 緒論 2熱點在于，控制酶解技術(shù)可獲得具備多種生理功能的玉米源活性肽。玉米蛋白粉水解后可分解得到谷氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和丙氨酸等 [9]，其中亮氨酸和谷氨酸的含量較多，賴氨酸和色氨酸含量較低，其他幾種必需氨基酸含量也較低。 玉米蛋白粉的營養(yǎng)價值玉米蛋白粉中的蛋白質(zhì)主要為醇溶蛋白和谷物蛋白，另有少量的球蛋白和白蛋白 [7]。玉米蛋白粉中淀粉分為抗性淀粉和慢消化淀粉兩種，抗性淀粉在小腸中不能被酶解，但在人的腸胃道結(jié)腸中可以與揮發(fā)性脂肪酸發(fā)生發(fā)酵反應(yīng)；慢消化淀粉在小腸中黏滯性增大，被消化吸收速度較慢。玉米蛋白粉中的蛋白在機體內(nèi)呈現(xiàn)兩種不同狀態(tài)，即可溶性蛋白質(zhì)和不可溶性蛋白質(zhì) [6]。一直以來，如何提高玉米蛋白粉的利用率和附加值成為了食品工業(yè)的研究熱點，這對于玉米產(chǎn)業(yè)的綜合開發(fā)利用有著重要意義。玉米蛋白粉是玉米籽粒經(jīng)濕磨法工藝生產(chǎn)玉米淀粉所產(chǎn)生的副產(chǎn)物，產(chǎn)量占總產(chǎn)品的 30 %左右 [1,2]。玉米蛋白資源高效利用開發(fā)抗氧化肽的關(guān)鍵技術(shù)研究畢業(yè)論文目 錄第 1 章 緒論 ..........................................................................................................1 玉米蛋白粉的綜合利用現(xiàn)狀分析 ..............................................................1 玉米蛋白粉的組成 ..............................................................................1 玉米蛋白粉的營養(yǎng)價值 ......................................................................1 玉米蛋白粉的應(yīng)用現(xiàn)狀 ......................................................................2 食源性抗氧化肽的研究進展 ......................................................................3 大豆源抗氧化肽 ..................................................................................3 水產(chǎn)源抗氧化肽 ..................................................................................3 蛋源抗氧化肽 ......................................................................................3 玉米源抗氧化肽 ..................................................................................4 影響抗氧化肽活性的高新技術(shù)的研究現(xiàn)狀 ..............................................4 超聲波技術(shù) ..........................................................................................4 微膠囊技術(shù) ..........................................................................................4 高壓脈沖電場技術(shù) ..............................................................................5 輻照技術(shù)在功能食品領(lǐng)域中的研究現(xiàn)狀 ..................................................5 本文主要研究內(nèi)容 ......................................................................................6 研究內(nèi)容 ..............................................................................................6 研究路線 ..............................................................................................6第 2 章 高效水解玉米蛋白粉的關(guān)鍵技術(shù)研究 ..................................................8 材料與設(shè)備 ..................................................................................................8 材料與試劑 ..........................................................................................8 儀器與設(shè)備 ..........................................................................................8 實驗方法 ......................................................................................................9 玉米蛋白粉的酶解方法 ......................................................................9 水解度測定方法 ..................................................................................9 蛋白酶可控酶解技術(shù)的單因素實驗設(shè)計 ........................................10 蛋白酶可控酶解技術(shù)的響應(yīng)面實驗設(shè)計 ........................................10 電子束輻照技術(shù)對玉米蛋白粉水解度的影響 ................................11 場發(fā)射電子掃描實驗 ........................................................................11 數(shù)據(jù)分析方法 ........................................