分子分型在醫(yī)院感染控制中的作用-文庫(kù)吧資料
2025-06-18 18:13本頁(yè)面
【正文】 ? 門診量： 260,000/年 23 分型確認(rèn)后及干預(yù)效果 P= LR Peterson et al, EID, 2022, 7: 306 24 指標(biāo) 1. the total number of nosoial infections per 1,000 patient days每千住院日醫(yī)院感染數(shù) 2. the number of patients with nosoial infections per 100 patient discharges 每 100出院病人醫(yī)院感染病人數(shù) (percentage of patients with nosoial infection) （ 醫(yī)院感染病人百分比） 25 感染控制工作小組成員： ? We formed a permanent, integrated infection control and prevention program that fully incorporates Hacek DM et al. Am J Clin Pathol 1999。34(5):1129～ 1135 18 ? ESHWAR Clin Microbiol,1996。并隨機(jī)地選擇不同的字母如 A、 B、 C、D等的字母順序分型。33(9):2233～ 2239 9 脈沖電泳 PFGE原理 10 原理： DNA 常規(guī)凝膠電泳 脈沖場(chǎng)凝膠電泳 11 時(shí)間消耗 ? 從分離菌株到出結(jié)果平均 天 ? 標(biāo)本準(zhǔn)備、細(xì)胞裂解－－第一天 ? 酶切－－第二天 ? 染色、拍照－－第三天 PFGE原理 染色、拍照 12 13 PFGE結(jié)果判讀 ? 目測(cè)法： ? 按美國(guó)疾病控制和預(yù)防中心 (CDC)Tenover等人推薦的方法判讀。 3 微生物室在醫(yī)院感染中的作用 ? accurately identifying nosoial pathogens ? detecting unexpected antimicrobialdrug resistance ? epidemiologic typing Pfaller MA et al. The clinical microbiology laboratory and infection control: emerging pathogens, antimicrobial resistance, and new technology. Clin Infect Dis 1997。分子分型在醫(yī)院感染控制中的作用 （ the Role of Molecular Typing in Nosoial Infection Control） 瑞金醫(yī)院臨床微生物科 瑞金醫(yī)院醫(yī)院感染辦公室 楊 莉 2 分子分型（分子流行病學(xué)研究） ? 從核酸分子水平上分析醫(yī)院感染的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律及機(jī)理，更加準(zhǔn)確有效地進(jìn)行醫(yī)院感染管理控制，已成為當(dāng)前國(guó)際醫(yī)院感染管理研究中的重要方向。 ? 從患者分離株到病區(qū)周圍環(huán)境株的比較分析； ? 從外源性感染到內(nèi)源性感染 ? 從某一醫(yī)院的醫(yī)院感染暴發(fā)到大范圍甚至世界范圍的感染菌株流行變遷； 基因多態(tài)性分析技術(shù)已成為醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)控制的 高水平研究領(lǐng)域。25:85870. ? 鑒定 ? 特殊耐藥菌的檢出 ? 流行病學(xué)分型 4 ? PFGE(脈沖場(chǎng)凝膠電泳 ) ? RAPD(隨機(jī)擴(kuò)增 DNA多態(tài)性 ) ? REA(限制性酶切 ) ? ribotyping (核糖體分型 ) ?分子分型 ?基因分型 ?分子流行病學(xué)研究 5 脈沖場(chǎng)凝膠電泳 (PFGE) 制備瓊脂糖栓塊 消 化 酶 切 脈沖電泳 結(jié)果解釋 6 消化、釋放出 DNA PFGE原理 7 Enzyme 酶切 PFGE原理 ?約 5～ 20個(gè)、長(zhǎng)度10～ 800kb的大片段DNA 8 ? Tenover Clin Microbiol,1995。 ? 圖譜完全相同的定為 一個(gè)型 ，彼此之間相差一個(gè)帶的定為同一型的 不同亞型 ，相差 2－ 3個(gè)帶的認(rèn)為 親緣關(guān)系密切 ，相差 4－ 6個(gè)帶的認(rèn)為 可能相關(guān) ，條帶相差 7個(gè)以上的認(rèn)為 無(wú)親緣關(guān)系 。 ? 聚類分析 ? 計(jì)算機(jī)輸入 SPSS， 做樹狀圖 14 PFGE同源性分析 D i c e ( O p t : 1 . 5 0 % ) ( T o l 1 . 5 % 1 . 5 % ) ( H 0 . 0 % S 0 . 0 % ) [ 0 . 0 % 1 0 0 . 0 % ]P F G E X b a I1008060P F G E X b a I P C R T e s t i n gTEMPCRSHVPCRCTXPCROXAPCR........E E X . 0 0 4 2E E X . 0 0 4 4E E X . 0 0 4 5E E X . 0 0 3 8E E X . 0 0 3 8E E X . 0 0 3 8E E X . 0 0 1 3E E X . 0 0 4 015 PFGE特點(diǎn)： ?DNA原位提取法，減少了斷裂 ?利用細(xì)菌全基因組信息 ?細(xì)菌分型金標(biāo)準(zhǔn) 16 RAPD（ 隨機(jī)擴(kuò)增 DNA多態(tài)性） ? 1990年 ? Williams：RAPD ? Welsh： APPCR ? 本質(zhì)上相同 ? 引物： ? “ 短 ” 、 “ 單一 ” 和“ 非特異性 ”
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