【正文】 固定的成敗，有的人認為，固定液的量與組織的比應是 20： 1，這個要求對于小組織來說是完全可以達到的，但對于大標本來說，則是一件非常困難的事情。固定時間過長，可降低抗原的活性。對于固定很長時間的陳列性標本制片后切片染色不鮮艷，顯得非常陳舊。時間太短 ，就不能很多的固定組織，因為不管組織大小，固定液浸入組織之中，都需要有一定的時間，時間太短，就會影響組織固定的效果，對以后一系列關系的處理都有影響，切片質量難以保證，固定時間太長，也不好。在我們的日常工作科研中，對于組織的固定，應有針對性的選擇，方能獲得滿意的效果。但是，值得指出的是并非所有的固定液都不是十全十美的，例如，酒精、甲醛、醋酸固定液，對組織固定很好，組織中各物質的染色也十分清晰，但對固定脫水盒為銅質的組織時，效果就不好，原因是醋酸跟酮可發(fā)生反應，產(chǎn)生醋酸銅，沉淀于組織中，可造成對抗原的損害，對于免疫組織化學的顯示，經(jīng)實驗證明：可呈弱陽性乃至陰性。因為如果使用福爾馬林固定液、石蠟切片顯示酸堿磷酸酶就顯示不好，狂犬病病毒的包函體就會消失掉，又如醋酸，它對膠原纖維等有膨脹的作用。例如：丙酮，它對組織有明顯的皺縮，硬化作用，平常它是決不會被用來作固定液的，用它不但太浪費，造價太高，而且也使切片較為困難，但是，對于某些酶的研究，狂犬病腦組織的固定，某些細胞的培養(yǎng)等。他認為有三種試劑即甲醛、戊 16 二醛和丙稀醛接近于達到上述要求。固定劑的種類繁多，成份復雜，對組織的作用不盡 相同，英國著名的組織化學專家 Pearse 指出：對于每個既定的組織化學方法來說，選擇最合適的方法是極為重要：在組織化學研究準備階段不論采用什么固定劑，都必須盡可能確切地知道它們對于各種組織成分的反應基團的效用。有的固定液對于組織有膨脹作用。因此，對于較大的組織，必須先進行處理，切成制片材料再行固定，這是最佳的處理方法，如遇到胃腸的器官，則應將其剪開，放平后，再行固定，若非特急病例，最好在固定后才取材，因這類組織、粘膜和肌層容易分開，沒固定時，難以取得最佳制片材料，對于產(chǎn)酶類的器官如肝、腎、脾等，更要處理好，否則更容易出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。凡是需要固定的組織，都不應該太大太厚，這是因為所有的固定液穿透力不夠強，浸透度不夠快的緣故。對于其它達不到些要求是越快越好。組織一經(jīng)離體，就能及時地固定，這是最好的。組織經(jīng)過及時的固定，最終可見到切片有鮮艷的染色，而些時如果有一批 未經(jīng)及時固定的組織，將看到最終的結果是，核染色不清楚，灰淡色，由此可得結論，固定可以增強染色的作用。遇到有教學價值的罕見的典型的標本，就必須及時固定，認真給予對待。對于有教學任務的醫(yī)院病理科，除搞好疾病的診斷外，還有收集有價值的大體標本，有些大體標本，是很難得到的。對于此類標本，應進行徹底的固定后，再行取材，如結核球，固定時間應在 35 天。 對某些具有 傳染性的標本，能防止疾病的擴散。 使組織硬化，便于切塊。細胞的固有物質，即細胞核、內(nèi)質網(wǎng)、線粒體、高爾基器、溶酶體、過氧體，細胞骨架，組織液，抗原、糖元等。因為組織離體后，供應這此組織的血液隨之消失，細胞缺氧，細胞內(nèi)溶酶體膜的結構受到破壞，破壞后釋放出溶酶體酶，日常生活中常碰到的肉變質，就是細菌污染加組織自溶的結果。固定液可以固定任何蛋白質，凡有生命的東西，都 由蛋白質組成，蛋白質被固定，生命就停止，細菌也就失去了活力。 15 （ 二 ） 固定的目 的 能防止細菌的腐蝕和組織的自溶。 （一）、固定的作用 組織經(jīng)一系列的處理 后，就必須進行固定，當然有的組織是先固定，再進行處理，然后再固定。組織只有經(jīng)過固定，才能完成隨后的一系列的制作，直至切片的最后完成。 動物標本全部臟器的每個臟器取一塊，對于部分臟器的根據(jù)需要取材。一般厚度不超過 3mm. 2， 將所有的內(nèi)臟，經(jīng)逐一處理后，全部固定起來，待其完全固定后，再行取材。路途遙遠者，可將檢材放入無菌甘油瓶內(nèi)，在 低溫下送檢 [4]。 4， 臟器細菌培養(yǎng)：臟器表面灼燒滅菌，切取不小于 2*2* 的組織塊，裝無菌容器內(nèi)送檢。 采取腦脊液培養(yǎng)時，于尸檢前用無菌手術，在第二及第三腰椎間隙作穿刺，取腦脊液 23ml,置于無菌試管內(nèi)送檢。 [采取細菌培養(yǎng)的方法 ] 1， 心血培養(yǎng)標本： （ 1） 用無菌鑷子提起右心耳，在下腔靜脈入口處的上方進行燒灼消毒，（用一有柄銅片在酒精燈上燒紅，燒灼器官表面，面積約 2*2cm） . 14 （ 2） 用無菌吸管或注射器從消毒部位插入，順下腔靜脈入口推進，取血液23ml （ 3） 在無菌操作下，將吸取之血液立即注入無菌的肉湯培養(yǎng)基，或有玻璃珠的培養(yǎng)瓶內(nèi)，立即洗凈吸管或注射器，以免凝固，若在右心取不到血液，可從下腔靜脈吸取。也可人前面鋸開椎體，取出脊髓。剪斷硬脊膜外脊神經(jīng)根。必要時鑿開中耳或將中耳取出。 D 如為腦膜炎，及腦室擴張等病例，可經(jīng)額極及 枕極的聯(lián)線稍高處作水平切面檢查。 B在灰結節(jié)部將大腦作冠狀切開，檢查各基底神經(jīng)核，外囊，島葉，下視丘，側腦室，第三腦室，然后向前向后每隔 作多個切面檢查。鋸時注意鋸到抵抗力減少時即停止，然后用鑿鑿開，注意勿損及硬腦及腦組織。 （五）腦與脊髓的取出： 1， 從兩耳后經(jīng)頭頂部作一切口，將刀插入切口，切開頭皮，向前后剝離，劃好鋸線。然后連輸尿管一起取出腎臟。檢查肝的大小，重量，硬度，色澤，注意檢查肝靜脈及腔靜脈，切面外翻否，小葉結構清楚否及有無其它病變。 ④ 小心分離腎上腺周圍組織， 取出腎上腺，分離右側腎上腺時，將肝向上方推，注意分離與皮膚上腺相連的肝組織，腎上腺取出后，作多人橫切面，檢察皮質與髓質的特征，有無出血等。沿胃大彎剪開胃，檢查粘膜病變，將胃及十二指腸從后壁分離，與胰臟一并取出，在檢查胰臟前，注意觀察脾靜脈有何變化。先量其長度，在腸系 13 膜附著處沿縱軸剪開腸腔，檢查粘膜有無病變，腔內(nèi)有無寄生蟲等，必要時可保持腸與腸系膜的關系，并將其一并取出。 ② 小腸與大腸的取出前， 應檢查腸系膜 淋巴結及血管，找出空腸的起端，切斷，自腸系膜附著處將腸割下，直至直腸處將其切 斷取出，腸的斷端應鉗緊或結扎，以免糞便污染腹腔。檢查其大小，重量，硬度，表面色澤。 （ 4） 腹腔及盆腔器官的取出： 一般先將脾臟摘出，繼之取出小腸、腎上腺、肝、膽囊、胃、十二指腸、胰，最后取出腎及盆腔器官。 B，將舌拉下，自硬腭后緣割離軟腭，注意應將兩側扁桃體完全取下。切開檢查肺切面的改變，有無病灶、氣腫、萎陷等，肺門淋巴結腫大否，切面情況。 如兩層胸膜間有粘連，需細心分離，勿損及肺，如粘連牢固，可連同胸膜壁層一并剝離，取出肺臟。 心臟剖開后，檢查心肌厚度、硬度、色澤、心內(nèi)膜光滑度，瓣膜周圍有無增厚，及贅生物，有無狹 窄或關閉不全，檢查冠狀動脈開口情況。第三步，從心尖部沿心室中隔，避開肺動脈剖開肺動脈剖開主動脈，檢查二尖瓣與主動脈瓣。 B：左心剖開法：第一步，用刀或剪將左心房從左、右靜脈入口之間作直線剖開，以手指檢查二尖瓣是否狹窄。第二步，從此線中點沿心臟右緣剖至心尖部，檢查三尖瓣，并用手指檢查動脈有無血栓或狹窄。檢查心臟增大否，外膜光滑度，有無滲出物等，心臟按血流方向剖開，測量各瓣膜的周徑及左右心室的厚度。檢查各器官前，應稱其重量，量大 小。 （ 5） 疑有空氣體栓塞時，將心包剪開一小口，用鑷子拉緊切口兩側心包膜，心包腔內(nèi)注滿水，然后，在水上剪開右心房及肺動脈，觀察有無氣泡逸出，或者先結扎進出心臟的大血管，取出心臟，淹沒于水下剪開右心，觀察有無氣泡逸出。鋸開胸骨，看骨髓造血情況。 （ 2） 在肋骨軟骨聯(lián)接線內(nèi)側約 處，將第二肋骨到肋弓的軟骨切斷，緊沿胸骨后壁將橫及縱隔割離，注意勿損及心包及大血管，然后檢查胸腔有無積液，其 12 量及性質，必要時涂片檢查與細菌培養(yǎng)。 （三） [胸腔檢查 ] （ 1） 必要時在胸腔未切開前檢查有無氣胸。 （ 2） 腹腔檢查：檢查腹腔內(nèi)有無積 液和積氣，腹膜情況，各器官的位置。切開腹膜時，先切一小孔，插入兩指，再從兩指之間剪開，以免劃破內(nèi)臟。 四，一般尸體解剖的主要步驟與要求 （一） [體表檢查 ]稱體重，量體長，觀察發(fā)育、營養(yǎng)狀況，檢查體表有無黃疸，發(fā)疳，出血點，疤痕，創(chuàng)口等，及其部位，大??；眼、耳、鼻、口腔等有無潰瘍、分泌物或液體流出，外生殖器有病變，淺表淋巴結腫大否；有無尸冷、僵、腐敗現(xiàn)象。 15， 尸檢完畢后，各種器械、尸檢臺、手套、隔離衣等，應及時清洗消毒。留做檢查的標本應徹底固定，然后檢查。 13， 烈性傳染病尸檢時尸檢者、助手及參加人員（非尸檢工作人員不得參觀），都應穿隔離衣，尸 檢污水須經(jīng)消毒后才能排出。 12， 尸檢時如發(fā)現(xiàn)法定傳染病，應在確診后及時報告衛(wèi)勤領導機關，必要時報告當?shù)匦l(wèi)生防疫機構。 11， 尸檢時應盡少破壞尸體的外形，檢查完畢后，應吸去體腔內(nèi)的血水，凡不需保留的器官，均應放回體腔內(nèi)，并應以木屑或其它吸水物質填塞，逢合切口。剖開的一般原則： a，顯露器官的最大面積，一般從長軸剖開； b，將器官內(nèi)導管一齊切開，顯露其分布及關系。剖開臟器時，應一刀切開。尸檢時切口最好不經(jīng)手術切口，對創(chuàng)口內(nèi)外，手術部縫合及周圍情況應仔細觀察，必要時攝影記錄，若一時在原位不能弄清須解決的有關問題，則連同周圍組織一并切下，以便仔細剖析。注意檢查臍帶，必要時做細菌培養(yǎng)。 7， 新生兒剖檢時，應注意肺臟曾否呼吸，發(fā)現(xiàn)心、血管畸形時，應將心與肺一并取出，仔 11 細檢查心與肺循環(huán)的關系。須采取電鏡標本者，按有關操作進行。病毒性腦炎或疑有病毒性腦炎的病例，需采取腦組織上作病毒分離者，須在死后 3 小時內(nèi)進行剖檢，首先剖 檢腦部。 4， 一般尸檢的程序可按體表，體腔（腹腔，胸腔）、心包腔，各內(nèi)臟器官（胸腔器官、頸部器官、腹部器官、盆腔器官）及神經(jīng)系統(tǒng)的順序，進行檢查，根據(jù)需要，可更動剖栓程序。操作時應注意 保持清潔，手套、刀剪、器械及尸體表面有血染時，應隨退即洗凈，切勿將污水濺起或灑于地上。鋸骨時應增戴紗手套。 三、尸體解剖的一般常規(guī) 1， 參加尸檢的一切人員，都應態(tài)度嚴肅，保持尸體清潔，頭部及外陰部須用紗布遮蓋，參觀者必須嚴守尸檢室規(guī)則，未經(jīng)許可，不得隨意取用尸檢器材及標本，在未得出正確結論前，對尸檢所見不得隨意外傳。 5， 必須提供詳細的病歷材料。 3， 醫(yī)療糾紛病例，必須有醫(yī)療單位和家屬要求的尸體解剖委托書，委托書需簽名或加蓋公章。 二、尸體解剖須知 1， 一般尸體解剖的病例由醫(yī)生填寫正規(guī)的尸體解剖申請單，并由家屬簽名同意解剖。 （ 5）疑因或確因烈性傳染病死亡的病例，尸檢方不具備相應尸檢設施條件者。 （ 3）委托尸檢方與受理尸檢方就涉及尸檢的某些重要問題未能達到協(xié)議者。 （ 1）委托尸檢手續(xù)不完備者（包括未按規(guī)則交納尸檢費用者）。 （ 7）尸檢病理學診斷報告書發(fā)送給委托尸檢方。 （ 5）同意對尸檢過程進行必要的攝影、錄像，并確認是否同意教學示教。 （ 3）主持尸檢人員負責遺傳尸檢后的體表切口縫合，不參與 尸檢后遺體的其它安置事項。 （ 1）同意有關受理尸檢機構對死者進行尸檢。 （ 3）逐項認真填寫的尸檢申請書（包括死者的臨床資料要點和其他需要說明的情況）。 （ 1）死者的死亡證明。 申請或委托尸檢方，包括①有關醫(yī)院；②衛(wèi)生行政部門；③司法機關；④死者的親屬或代理人；⑤被受理尸檢方認可的其他申請或委托方。 受理尸檢部門應是具備獨立尸檢能力的①醫(yī)院病理科；②醫(yī)學院校的病理學教研室；經(jīng)醫(yī)政部門注冊的病理學診斷中心。 2其它標本：依上述原則檢查及取材，如標本有特殊情況，則依其特點處理。 2軟組織腫瘤標本：部位、大小、形狀、色澤、表面有無包膜，完整否，硬度，切面有無出血、壞死、囊性變等，與周圍組織的關系，切面暴露最大面，必要時多作幾個平行切面。要求保 存眼球隊的完整性，如結膜、視神經(jīng)、黃斑及晶狀體等，都應完整無缺，切時刀刃銳利，以免人為地損壞眼球結構。 2瘺管或竇道組織：應作多數(shù)橫斷面檢查，適當取材。 2胎盤：形狀，大小，重量，母體面絨毛有無缺損、出血、鈣化、變性壞死，及其范圍大小，羊膜和血管情況，臍帶長度，直徑，有無扭轉打結、血管栓塞等。 取材：囊性瘤取囊壁較厚處，實質，突起處，囊與輸卵管相連處及輸卵管。 2卵巢腫瘤：形狀大小，較大者應稱其重量，表面色澤，光滑度，與輸卵管的關系，有無粘連，囊性者自膨大部遠端剪開，查囊與輸卵管腔是否相通，單房或多房，內(nèi)壁光滑度，有無質或乳頭狀生長區(qū)，乳頭脆性，囊內(nèi)容物性質。 9 2刮宮或陰道排出物標志：疑有妊娠者，須仔細尋找有無胎盤絨毛，眼觀不能判斷時，須取組織塊，尤應注意檢查血凝塊。 甲狀腺腺瘤與腺癌：腫瘤部位， 大小， 包膜完整否，切面質地，有無出血，壞死，鈣化，囊性變及其內(nèi)容物，有無乳頭或絨毛狀改變，腫瘤以外組織有無灰白色小節(jié)。取材：腫瘤及與組織交界處，骨破壞處，軟組織浸潤處。有皮膚軟組織者將與腫瘤無關部剔除，然后鋸開，有條件者，可與鋸開前攝 X 線片以作比較。取材：整個短軸切面，互相粘連者包括粘連部位。 取材：帶有包膜的脾組織，脾中心組織，脾門附近包括較大的血管，如有副脾，淋巴結各一塊，脾破裂應包括裂呂充物。 ① 淤血性脾腫大或脾功能亢進，注意靜脈內(nèi)有無血栓，靜脈壁 有無變化，有無梗死，切面上有無含鐵小結節(jié)。取材：囊腫壁及其旁肺組織，如為包蟲病，則應在包蟲囊的