專題三土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)-文庫吧資料
2025-05-13 18:17本頁面
【正文】 用的稀釋范圍相同嗎 ？ 原因： 土壤中各類微生物的數(shù)量 （ 單位：株 /kg）是不同的 。 將稀釋相同倍數(shù)的菌液，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯 多于 選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為對照，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了 選擇 作用。 每個稀釋度下需要 3個選擇培養(yǎng)基， 1個牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。 [二 ]制備培養(yǎng)基 由于初次實驗，對于稀釋的范圍沒有把握，因此選擇了一個較為寬泛的范圍： 稀釋倍數(shù)為 103～ 107。 先鏟去表層土 3 cm左右 ， 再取樣 ， 將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中 。 結(jié)果預(yù)測： 如果結(jié)果與 A同學(xué)一致，則證明 A無誤；如果結(jié)果不同，則證明 A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。 原因： ⑴ 土樣不同 ⑵ 培養(yǎng)基污染或操作失誤 (或者是混入了其他的含氮物質(zhì) ) 小結(jié)：通過這個事例可以看出，實驗結(jié)果要有說服力，對照的設(shè)置是必不可少的。 實例：在做分解尿素的細(xì)菌的篩選與統(tǒng)計菌落數(shù)目的實驗時， A同學(xué)從對應(yīng)的 106倍稀釋的培養(yǎng)基中篩選出大約 150個菌落，但是其他同學(xué)在同樣的稀釋度下只選擇出大約 50個菌落。 判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用： 完全培養(yǎng)基（營養(yǎng)成分齊全）接種后培養(yǎng) 觀察菌落數(shù)目。 計算公式： 每克樣品中的菌株數(shù) =（ C247。 ④ 在計數(shù)時，每隔 24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。 ②為使結(jié)果接近真實值可將 同一稀釋度加到三個或三個以上的平板中 ，經(jīng)涂布，培養(yǎng)計算出菌落平均數(shù)。 旁欄思考題 ，如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)？ 統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計 3個平板，計算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式進行計算。 在設(shè)計實驗時 ， 一定要涂布至少 3個平板 ， 作為重復(fù)組 ， 才能增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性 。 V) M 其中， C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)， V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積 (ml)， M代表稀釋倍數(shù)。 ⑵常用方法：稀釋涂布平板法。 怎樣證明此培養(yǎng)基具有選擇性呢？ 以尿素為 唯一氮源 的培養(yǎng)基 牛肉膏 蛋白胨 培養(yǎng)基 是 分離 尿素 細(xì)菌 判斷該 培養(yǎng)基 有無選 擇性 實驗組 對照組 培養(yǎng)基類型 是否 接種 目的 結(jié)果 只生長尿素細(xì)菌 生長多種微生物 是 顯微鏡直接計數(shù)： 利用 血球計數(shù)板 (血細(xì)胞計數(shù)板 ） ，在顯微鏡下計算一定容積里樣品中微
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