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轉(zhuǎn)錄基本知識ppt課件-文庫吧資料

2025-05-10 13:17本頁面
  

【正文】 和解螺旋酶 原核轉(zhuǎn)錄和翻譯同時進行 mRNA 翻譯起始: SD 序列 :AUG上游的 712 和核苷酸, AGGAGG 與 16S RNA互補 UCCUCC 真核生物的轉(zhuǎn)錄過程 1. 轉(zhuǎn)錄起始的上游區(qū)段: UAS 真核生物的轉(zhuǎn)錄起始點上游 35~25bp區(qū) 也存在一段富含 TA的順序,被稱為 Hogness盒 或TATA盒 ,通常認為是啟動子的核心序列。 (三)轉(zhuǎn)錄終止: RNA 聚合酶停滯, RNA 解離 ?模板 DNA鏈在接近轉(zhuǎn)錄終止點處存在相連的富含 GC和 AT的區(qū)域,使 RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成寡聚 U及發(fā)夾形的二級結(jié)構(gòu),引起 RNA聚合酶變構(gòu)及移動停止,導(dǎo)致 RNA轉(zhuǎn)錄的終止。 1. ?亞基脫落, RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu),與模板結(jié)合松弛,沿著 DNA模板前移; 2. 在 核心酶 作用下, NTP不斷聚合, RNA鏈不斷延長。 ⑶ 在 RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物。 RNA聚合酶全酶在轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的結(jié)合 氫鍵 結(jié)合于大小溝 解鏈區(qū) 9+13 ⑵ DNA局部雙鏈解開。 足跡法確定啟動子序列 開始轉(zhuǎn)錄 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py 10 區(qū) 1 30 50 10 10 40 20 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 原核生物啟動子的保守序列 T T G A C A A A C T G T 35 區(qū) RNApol辨認位點 (recognition site) 5? 5? RNA聚合酶保護區(qū) 結(jié)構(gòu)基因 3? 3? 原核生物轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的一致性序列 大腸桿菌啟動子共有序列的功能 A G T C TTGACA AAT TTA AAT AACTGT AAT Pribnow 框 10 35 識別區(qū) 1619bp 59bp 起點 被 RNA聚合酶辨認的區(qū)段就是位于轉(zhuǎn)錄起始點35區(qū) 的 TTGACA序列 。 原理 :DNA和蛋白質(zhì)結(jié)合以后便不會被 DNAase分解,在測序時便出現(xiàn)空白區(qū) (即蛋白質(zhì)結(jié)合區(qū) ),從而了解與蛋白質(zhì)結(jié)合部位的核苷酸對數(shù)目。 啟動子序列通常由一些帶共性的保守序列構(gòu)成。 原核生物轉(zhuǎn)錄起始時,首先由 RNA聚合酶中的?因子 識別轉(zhuǎn)錄起始點,并促使核心酶結(jié)合形成全酶復(fù)合物。 1 起始: RNA聚合酶識別起始區(qū) 在原核生物中,若干功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因常常串聯(lián)在一起,由其上游的同一調(diào)控序列進行調(diào)控,這種基因的組織形式稱為 操縱子( operon)。 終止因子 三: RNA合成過程 起始 雙鏈 DNA局部解開 磷酸二酯鍵形成 終止階段 解鏈區(qū)到達基因終點 延長階段 5? 3? ? ? RNA 啟動子( promoter) 終止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 離開 轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題: 1. 必須準確地結(jié)合在轉(zhuǎn)錄模板的起始區(qū)域。 ?原核生物中的終止因子 ?蛋白是一種六聚體的蛋白質(zhì),亞基的分子量為 50kd。 真核生物 RNA聚合酶 Ⅱ 轉(zhuǎn)錄因子及其功能 協(xié)助 RNA聚合酶識別終止信號的輔助因子(蛋白質(zhì))則稱為終止因子 (termination factor)。 轉(zhuǎn)錄因子 在反式作用因子中,直接或間接參與轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體的形成的蛋白因子被稱為 轉(zhuǎn)錄因子( transcriptional factor, TF) 。 真核生物的 RNA聚合酶 在真核生物中,轉(zhuǎn)錄的起始過程較為復(fù)雜,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)數(shù)百種蛋白因子與 RNA轉(zhuǎn)錄合成有關(guān)。 體外獲得單鏈或者雙鏈 RNA的最好的工具! 簡單,高效。)被稱為 核心酶 , 與 RNA鏈的聚合 有關(guān)。?。 該酶在單鏈 DNA模板以及四種核糖核苷酸存在的條件下, 不需要引物 ,即可從 5‘→3’ 聚合形成RNA。 ?其他蛋白質(zhì)因子: 如轉(zhuǎn)錄因子、終止因子等。 ?模板: 單鏈 DNA。 特定起始點和特定終止點之間的 DNA鏈構(gòu)成一個轉(zhuǎn)錄單位 ,通常由轉(zhuǎn)錄區(qū)和有關(guān)的調(diào)節(jié)順序構(gòu)成?!?339?!?539。C 蛋白質(zhì) 翻譯 模板鏈、編碼鏈與轉(zhuǎn)錄及翻譯的關(guān)系 RNA轉(zhuǎn)錄合成時,以 DNA作為模板,在 RNA聚合酶的催化下,連續(xù)合成一段 RNA鏈,各條RNA鏈之間無需再進行連接。 Val Val GCAGUACAUGUC c g t g a t g t a c a g GCAGTACATGTC 與模板鏈互補的另一條 DNA鏈稱為 編碼鏈 (coding strand),也稱為 有意義鏈 。 對于不同的基因來說 , 其轉(zhuǎn)錄信息可以存在于兩條不同的 DNA鏈上 。 snRNA 參與 RNA 剪輯 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別 轉(zhuǎn)錄是基因表達的中心環(huán)節(jié) ? 轉(zhuǎn)錄是以 DNA為模板合成 RNA, 并且只是以單股 DNA 為模板,因此具有不對稱性; ? 用以轉(zhuǎn)錄的單鏈 DNA, 稱為模板鏈 , 與復(fù)制不同,轉(zhuǎn)錄是局部的 ,從啟動子開始到終止子結(jié)束 ,為一個轉(zhuǎn)錄單位 。 rRNA不單獨存在,它與蛋白質(zhì)結(jié)合為核蛋白體,分為大小亞基,存在于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與胞漿中。其主要功能部位有二個,一是氨基酸臂的 3’末端為 CCAOH,起特異結(jié)合氨基酸作用;二是有一個反密碼環(huán),環(huán)上有反密碼子,與 mRNA上的密碼子反向互補,于是由tRNA攜帶的氨基酸可被轉(zhuǎn)運到與密碼子對應(yīng)的部位,因此 tRNA具有攜帶轉(zhuǎn)運氨基酸的作用。 轉(zhuǎn)錄 RNA DNA 二,轉(zhuǎn)錄的分子事件 1,轉(zhuǎn)
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