熒光標(biāo)記蛋白的發(fā)展-文庫吧資料
2025-05-09 18:45本頁面
【正文】 ） 1，第二類熒光蛋白， FHP ① 特點(diǎn) 這些熒光蛋白在適當(dāng)?shù)拇碳は聲?huì)經(jīng)歷結(jié)構(gòu)的改變，從而打開熒光這個(gè)開關(guān)，或者熒光發(fā)射波長改變。 ( 3) 紫外激發(fā)對某些 GFP 有光漂白和光破壞作用 , 導(dǎo)致熒光信號快速喪失。 ④ 對細(xì)胞內(nèi) GFP 的 檢測非常簡單 , 用顯微鏡、熒光計(jì)、熒光激活細(xì)胞分選儀等就可實(shí)現(xiàn) 4， GFP目前存在的 不足 ( 1) 檢測靈敏度還有待提高 , 而且其熒光信號強(qiáng)度方面的非線性性質(zhì)使得定量非常困難。 ③ GFP 還能克服穿透、毒素、光漂白等不利因素 [1]。其熒光機(jī)制是自身含有的 , 綠色熒光的發(fā)射僅需分子氧的存在 , 而 無需其他外源輔因子 ② GFP 的表達(dá) 無種屬特異性 。這種酶 /底物的相互作用是生物發(fā)光的普遍模式。這種保護(hù)對于發(fā)射熒光是必需的。最終，經(jīng)過大約一個(gè)小時(shí)的反應(yīng)，周圍環(huán)境中的的氧氣攻擊酪氨酸的一個(gè)化學(xué)鍵，形成一個(gè)新的雙鍵并合成熒光發(fā)色團(tuán)。受到 Ca2+或紫外線激活時(shí) , 水母中的發(fā)光蛋白 Aequorin 被激活 , 產(chǎn)生藍(lán)光 , GFP 能夠吸收藍(lán)光 ( 395nm 處有最大光吸收 ) , 發(fā)射綠色 ( 或黃綠色 ) 熒光 Saturday, May 28, 2022 2， GFP發(fā)光原理 GFP控制光的部位是其自身的一部分，僅由氨基酸構(gòu)建而成，該部位含有一段三個(gè)氨基酸組成的特殊序列：絲氨酸－酪氨酸－甘氨酸（有時(shí)絲氨酸會(huì)被相似的蘇氨酸取代）。這種水母體內(nèi)含有一種生物發(fā)光蛋白質(zhì) —— aequo
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