微工第1章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)-文庫(kù)吧資料
2025-05-07 01:49本頁(yè)面
【正文】 *通氣與攪拌 *泡沫 *染菌的控制 *種子罐級(jí)數(shù) 影響因素 種齡 種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。 培養(yǎng)基：保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，有利于菌體的生長(zhǎng) 減少傳代次數(shù) 孢子培養(yǎng)時(shí)注意濕度，子斜面使用一般不超過 1個(gè)月 生產(chǎn)車間階段 ： 種子培養(yǎng)在種子罐里面進(jìn)行，一般在工廠歸發(fā)酵車間管理，因此形象地稱這些培養(yǎng)過程為生產(chǎn)車間階段。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 中國(guó) ， 1970年 7月 ， 中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)（ CCCMS） ， 中國(guó)科學(xué)院負(fù)責(zé) ， 下設(shè)六個(gè)菌種保藏管理中心 。 7. NIH (National Institutes of Health), Bethesda, Maryland, 國(guó)立衛(wèi)生研究所 ， 美國(guó) ， 馬里蘭洲 ， 貝塞斯達(dá) 。 5. KCC (Kaken Chemical Company Ltd, Tokyo, Japan 科研化學(xué)有限公司 ， 日本東京 。 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 3. IAM (Institute of Applied Microbiology), University of Tokyo, Japan 日本東京大學(xué)應(yīng)用微生物研究所 ， 日本東京 。氯化鈷溶液檢測(cè)真空度 *低溫避光保藏 ： 4℃ 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 凍干保藏 特點(diǎn)： *凍干狀態(tài)下一般可保藏 510年不喪失活力 *凍干后的菌株可常溫保存 ， 便于運(yùn)輸 *必須使用冷凍保護(hù)劑 ， 常用脫脂乳 、 蔗糖等 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 菌種保藏機(jī)構(gòu) 國(guó)外 ： 1. ATCC American Type Culture Collection. Rockville． Maryland. 美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種收藏所 ， 美國(guó) ， 馬里蘭洲 ， 羅克維爾市 。 此法是微生物菌種長(zhǎng)期保藏的非常有效的方法之一 。一些細(xì)菌和真菌菌種可保藏 5年而活力不受影響。 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 在超低溫冷藏柜 （ 70~80 ℃ ） 中保藏菌種的一般方法是： 1． 離心收獲對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期至后期的微生物細(xì)胞 2． 用新鮮培養(yǎng)基重新懸浮所收獲的細(xì)胞； 3． 加入等體積的 20％ 甘油或 10％ 二甲亞砜； 4． 混勻后分裝入冷凍指管或安瓿中 ， 于 7080℃ 超低溫冰箱中保藏 。 2022/5/24 第一章 菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng) ?? 方法 溫度 保護(hù)劑 保藏時(shí)間 適用菌種 定期移植低溫保藏法 4℃ 低溫 無 數(shù)月，短期 各種微生物細(xì)胞 液氮超低溫保藏法 196~150℃ 甘油或 DMSO 長(zhǎng)期 適用范圍最廣，微生物、動(dòng)物細(xì)胞 甘油低溫保藏法 80~70℃ （ 18℃ ） 甘油 1年以上 特別適用于基因工程菌 沙土保藏法 室溫或低溫 數(shù)年 芽孢桿菌、放線菌、曲霉菌等 麩皮保藏法 20℃ 長(zhǎng)期 放線菌、霉菌等 蒸餾水保藏法 4~10℃ 較長(zhǎng)時(shí)間 酵母、真菌 冷凍干燥保藏法 干燥后， 4℃ 左右 低溫避光處 脫脂乳、蔗糖 數(shù)年 各種微生物細(xì)胞 **最有效，適用范圍最廣，多數(shù)國(guó)家級(jí)菌種保藏單位常用 *原則： 慢凍快溶 *原理：利用微生物在 130℃ 以下新陳代謝趨于停止而有效地保藏微生物。 休眠環(huán)境：微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝受抑，不易突變的環(huán)境，一般要求低溫、缺氧、缺營(yíng)養(yǎng)、
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