【正文】 法測(cè)定經(jīng)培養(yǎng)5d后，各份稀釋水樣和溶解水樣中的剩余溶解氧四、數(shù)據(jù)處理n 根據(jù)公式計(jì)算BOD5，并以表格形式表示測(cè)定數(shù)據(jù)和結(jié)果。培養(yǎng) 將各稀釋比的水樣，稀釋水（或接種稀釋水）空白各取一瓶放入20+1℃的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)5d，培養(yǎng)過(guò)程中需每天添加封口水溶解氧的測(cè)定n 參見(jiàn)實(shí)驗(yàn) “水中溶解氧的測(cè)定”。n 用同樣方法配置另兩份稀釋比水樣。n 確定稀釋倍數(shù)[見(jiàn)注意事項(xiàng)2]水樣的稀釋n 根據(jù)確定的稀釋倍數(shù)，用虹吸法把一定量的污水引入1000mL量筒中，再沿壁慢慢加入所需稀釋水（接種稀釋水），用特制攪拌棒在水面以下慢慢攪勻（不應(yīng)產(chǎn)生氣泡），然后沿瓶壁慢慢傾入兩個(gè)預(yù)先編號(hào)、體積相同的(250mL)的碘量瓶中，直到充滿后溢出少許為止。n 用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值接近7。三、實(shí)驗(yàn)步驟水樣的采集、存儲(chǔ)和預(yù)處理n 采集水樣于適當(dāng)大小的玻璃瓶中（根據(jù)水質(zhì)情況而定），用玻璃塞塞緊，且不留氣泡。n 其他溶液。～，接種稀釋水配制后應(yīng)立即使用。n 接種稀釋水。在20L玻璃瓶?jī)?nèi)加入18L水，控制水溫在20℃左右，用抽氣或無(wú)油壓縮機(jī)通入清潔空氣2~8h，使水中溶解氧飽和或接近飽和（20℃時(shí)溶解氧大于8mg/L）。n 鹽酸溶液。n 葡萄糖谷氨酸溶液。7H2O）（NH4Cl），溶于約500mL水中，稀釋至1000mL并混合均勻。n 磷酸鹽溶液。（MgSO46H2O），溶于水中，稀釋至1000mL。n 三氯化鐵溶液。n 氯化鈣溶液。n 250~300mL碘量瓶，帶有磨口玻璃塞并具有供水封用的鐘形口。n 1000～2000mL量筒。二、儀器與試劑恒溫培養(yǎng)箱[（20+1）℃]。n 水中有機(jī)污染物的含量越高，水中溶解氧消耗愈多，BOD5值也愈高，水質(zhì)愈差。n 法測(cè)定BOD5是將水樣經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋后，使其中含有足夠的溶解氧供微生物5d生化需氧的要求，將此水樣分成兩份。n 有微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。為此，實(shí)驗(yàn)用的稀釋水要充分曝氣以達(dá)到氧的飽和或接近飽和。對(duì)易降解的有機(jī)物，如碳水化合物、脂肪酸、油脂等，一般微生物均能將其降解，如硝基或硫酸取代芳烴等，則必須進(jìn)行生物菌種馴化。一般來(lái)說(shuō)，在第5天消耗的氧量大約是總需氧量的70%，為便于測(cè)定，目前國(guó)內(nèi)外普遍采用20℃培養(yǎng)5d所需溶解氧含量作為指標(biāo)，單位以的mg/L表示，簡(jiǎn)稱BOD5。五日生化需氧量的測(cè)定——BOD5 一、原理n 生化需氧量是指在好氧條件下，微生物分解存在水中的有機(jī)物質(zhì)的生物化學(xué)過(guò)程中所需的溶解氧量。注：對(duì)于總磷較大的水樣（如精煉廠、榨油廠污水和中和水）需將水樣稀釋50倍后再進(jìn)行檢測(cè)；排放水采樣量為10mL。然后按步驟()進(jìn)行處理，以蒸餾水為參比液，空白試液調(diào)節(jié)零點(diǎn)，測(cè)定吸光度后，和對(duì)應(yīng)的磷的含量繪制工作曲線。 分光光度測(cè)量 室溫下放置30分鐘后，使用光程為10mm比色皿，在700nm波長(zhǎng)下，以蒸餾水為參比液，空白試液調(diào)節(jié)零點(diǎn)，測(cè)定吸光度后，從工作曲線（）上查得磷的含量。 測(cè)定 消解 吸取5mL混勻水樣于50mL具塞比色管中，加入 5mL過(guò)硫酸鉀溶液（），用蒸餾水稀釋至25mL，將比色管置于沸水浴中加熱30分鐘，取出冷卻至室溫。吸取5mL磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于500mL容量瓶中，以蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。溶解磷酸二氫鉀（使用前在105℃下干燥2h），移入250mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。溶于蒸餾水中，用水稀釋至500mL，貯于棕色試劑瓶中（冷藏可穩(wěn)定幾周，如不變色可長(zhǎng)時(shí)間使用）。 抗壞血酸溶液：100g/L。稱取13g鉬酸銨。 將25g過(guò)硫酸鉀溶于水并稀釋至500mL。3 儀器及用具 具塞(磨口)比色管：50mL 加熱板 刻度吸管： 5mL，2mL，1mL 紫外分光光度計(jì) 燒杯：1000mL4 試劑 本標(biāo)準(zhǔn)所列試劑除磷酸二氫鉀為工作基準(zhǔn)試劑外，其余均為分析純，水為蒸餾水。2 原理 在中性條件下用過(guò)硫酸鉀使試樣消解，將所含磷全部轉(zhuǎn)化為正磷酸鹽?？偭装ㄈ芙獾摹㈩w粒的、有機(jī)的和無(wú)機(jī)磷。 As = As220 —2As275 ………………（2） Ab = Ab220 —2Ab275 ………………（3） Ar = As —Ab ………………（4）式中：As220——標(biāo)準(zhǔn)溶液在220nm波長(zhǎng)的吸光度； As275——標(biāo)準(zhǔn)溶液在275nm波長(zhǎng)的吸光度； Ab220——零濃度（空白）溶液在220nm波長(zhǎng)的吸光度； Ab27——零濃度（空白）溶液在275nm波長(zhǎng)的吸光度；結(jié)果的表示8．1計(jì)算方法 按式（1）計(jì)算得試樣校正吸光度Ar，在校準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的總氮μg數(shù)，總氮含量CN（mg/L）按下式計(jì)算： m CN = ……（5） V式中：m——試樣測(cè)出含氮量，μg； V——測(cè)定用試樣體積，ml。 b、。7．3校準(zhǔn)7．3．1校準(zhǔn)系列的制備： a、用分度吸管向一組（10支）比色管（）中，分別加入硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（）、。7．2空白試驗(yàn) 空白試驗(yàn)除以10ml（）代替試料外，采用與測(cè)定完全相同的試劑、用量和分析步聚進(jìn)行平行操作。e、移取部分溶液至10mm，石英比色皿中，在紫外分光光度計(jì)上，以無(wú)氨水作參比，分別在波長(zhǎng)為220與275nm處測(cè)定吸光度，并用式（1）計(jì)算出校正吸光度A。c、冷卻，開(kāi)閥放氣，移去外蓋，取出比色管并冷至室溫。或?qū)⒈壬苤糜诩矣脡毫﹀佒?，加熱至頂壓閥吹氣時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)。a、加入5ml堿性過(guò)硫酸鉀溶液（），塞緊磨口塞用布及繩等方法扎緊瓶塞，以防彈出。1）稀釋至10ml）置于比色管中。 如果試樣中不含懸浮物按（）步聚測(cè)定，試樣中含懸浮物則按（）步聚測(cè)定。 水樣放置時(shí)間較長(zhǎng)時(shí)，（ρ=），酸化到PH小于2，并盡快測(cè)定。 所用玻璃器皿可以用鹽酸（1+9）或硫酸（1+35）浸泡，清洗后再用水（）沖洗數(shù)次。3醫(yī)用手提式蒸氣滅菌器或家用壓力鍋（~），鍋內(nèi)溫度相當(dāng)于120~124℃。儀器和設(shè)備5．1常用實(shí)驗(yàn)室儀器和下列儀器。使用時(shí)配制。4．6．1硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液，CN=100mg/L：硝酸鉀（KNO3）在105~110℃烘箱中干燥3h，在干燥器中冷卻后，溶于水（）中，移至1000mL容量瓶中，用水（）稀釋至標(biāo)線在0~10℃暗處保存，或加入1~2mL三氯甲烷保存，可穩(wěn)定6個(gè)月。4．5鹽酸溶液，1+9。3氫氧化鈉溶液，200g/L：將（）溶液稀釋10倍而得。棄去前50ml餾出液，然后將約800ml餾出液收集在帶有磨口玻璃塞的玻璃瓶中。按下述方法之一制備：4．1．1離子交換法： 將1000ml蒸餾水通過(guò)一個(gè)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂（氫型）柱，流出液收集在帶有磨口玻璃塞的玻璃瓶中。試劑和材料 除非()另有說(shuō)明外，分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)I(yè)標(biāo)準(zhǔn)的分析純?cè)噭?。并且在此過(guò)程中有機(jī)物同時(shí)被氧化分解。原理 在60℃以上水溶液中，過(guò)硫酸鉀可分解產(chǎn)生硫酸氫鉀和原子態(tài)氧，硫酸氫鉀在溶液中離解而產(chǎn)生氫離子，故在氫氧化鈉的堿性介質(zhì)中可促使分解過(guò)程趨于完全。2．定義2．1可濾性總氮：指水中可溶性及含可濾性固體（）的含氮量。 測(cè)定中干擾物主要是碘離子與溴離子。 ，測(cè)定上限為4 mg/L。1．2適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于地面水、地下水的測(cè)定。所用玻璃器皿應(yīng)避免實(shí)驗(yàn)室空氣中氨的沾污。靜置后生成的沉淀應(yīng)除去。 V——水樣體積（mL）。 4．空白試驗(yàn)：以無(wú)氨水代替水樣，作全程序空白測(cè)定。放置10min后，在波長(zhǎng)420nm處，用光程10mm比色皿，以水為參比，測(cè)定吸光度，由測(cè)得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（mg）對(duì)校正吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2．標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：吸取 0 、加水至標(biāo)線，混勻。 7．銨標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：，用水稀釋至標(biāo)線。4H2O)溶于100mL水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100mL。用水稀釋至100mL，貯于聚乙烯瓶中，密塞保存。 4．納氏試劑：稱取16g氫氧化鈉，溶于50mL水中，充分冷卻至室溫。