第十一章動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)教學內(nèi)容-文庫吧資料
2024-11-01 13:59本頁面
【正文】 表面抗原、 T抑制因子、促細胞生長素、白細胞介素等 空氣與 CO2出口 空氣與 CO2入口 中空纖維管生物反應(yīng)器已進入工業(yè)生產(chǎn) ， 主要用于 培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)單克隆抗體 。 如果控制系統(tǒng)不受污染 ， 能長期運轉(zhuǎn) 。 在氣升式生物反應(yīng)器中 ， 溶氧的控制 可以通過自動調(diào)節(jié)進入空氣的速率來實現(xiàn)；PH值 可通過在進氣中加入二氧化碳或加入氫氧化鈉來控制 。 與攪拌式生長反應(yīng)器相比 ， 氣升式生物反應(yīng)器產(chǎn)生的湍流溫和而均勻 ， 剪切力相當小 ， 反應(yīng)器內(nèi)沒有機械運動部件 ， 因而細胞損傷率比較低；同時由于采用直接噴射空氣供氧 ， 氧傳遞速率高；液體循環(huán)量大 ， 能使細胞和營養(yǎng)成分均勻地分布于培養(yǎng)基中 。 氣體混合物從底部的噴射管進入反應(yīng)器的中央導流管使得中央導流管側(cè)的液體密度低于外部區(qū)域從而形成循環(huán) 。 根據(jù) 生物反應(yīng)器的不同用途 ， 有 懸浮培養(yǎng)用 、 貼壁培養(yǎng)用 、 包埋培養(yǎng)用生物反應(yīng)器 等 ， 其 種類大致上有 塑料增殖器 、 填充床增殖器 、 多層板增殖器 、螺旋增殖器 、 管式螺旋增殖器 、 陶質(zhì)矩形通道蜂窩狀增殖器 、 流化床反應(yīng)器 、 中空纖維 及其他膜式反應(yīng)器 、 槳式攪拌反應(yīng)器 、 棒式攪拌反應(yīng)器 、 船舶推進槳反應(yīng)器 、 傾斜槳葉攪拌反應(yīng)器 、 般帆形攪拌反應(yīng)器 、 往復(fù)振動錐孔篩板攪拌反應(yīng)器 、 籠式通氣攪拌反應(yīng)器 、 雙層籠式通氣攪拌反應(yīng)器 、 空氣提升式反應(yīng)器 等 。 常用的 細胞固定化的方法主要有 吸附 、 共價貼附 、 離子 /共價交聯(lián) 、 包埋 和微囊化 等 。 固定化培養(yǎng) 固定化培養(yǎng)是既適用于貼壁依賴性細胞 ， 又適用于非貼壁依賴性細胞的包埋培養(yǎng)方式 ， 具有 細胞生長密度高 、 抗剪切力 和 抗污染能力強 等 優(yōu)點 。 在貼壁培養(yǎng)依賴性細胞中，請比較 滾瓶培養(yǎng)系統(tǒng) 和 微載體培養(yǎng)系統(tǒng) ？ 問題 細胞貼壁一般分為 貼壁因子吸附于培養(yǎng)表面 、 細胞與表面接觸 、 細胞貼壁于培養(yǎng)表面 和 貼壁細胞在培養(yǎng)表面上擴展 等幾個步驟 。 在貼壁培養(yǎng)過程中，貼壁依賴性細胞需要附著 在帶適量正電荷或半固體的表面上 ，原來是圓形的細胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展開來，然后開始有絲分裂，并很快進入對數(shù)生長期。 懸浮培養(yǎng) P209 動物細胞培養(yǎng)有哪三種類型？ 提問 懸浮培養(yǎng)是用培養(yǎng)哪一類細胞的？ 問題 懸浮培養(yǎng)有何優(yōu)缺點？ 貼壁培養(yǎng) 貼壁指必須貼附在 固體介質(zhì)表面 上生長的細胞培養(yǎng)培養(yǎng) ， 主要用于 非淋巴組織和許多單倍體等貼壁依賴性細胞的 培養(yǎng) 。 表 114，表 115是微生物細胞與動物細胞性質(zhì)和培養(yǎng)方法的比較。表 112為常用的培養(yǎng)基的成分和配方。 合成培養(yǎng)基中一般都有哪些營養(yǎng)成分？ 問題 常用的合成培養(yǎng)基 目前合成培養(yǎng)基的種類已有數(shù)十種，大多數(shù)培養(yǎng)基都是為適應(yīng)某種組織細胞的生長而在某種合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良而來的。 目前所有的細胞培養(yǎng)都已采用經(jīng)標準化生產(chǎn) 、 組成和含量都相對固定的各種合成培養(yǎng)基 ， 并已有配制好的干粉型商品 。 合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學物質(zhì)對細胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件的模擬，經(jīng)過反復(fù)實驗篩選、強化和重新組合后形成的培養(yǎng)基。 水解乳蛋白 水解乳蛋白是常用的一種天然培養(yǎng)基，是由乳白蛋白經(jīng)水解而制得，氨基酸的含量較高。 一般使用的是禽類血漿 。 優(yōu)質(zhì)的血清外觀應(yīng)為透明 、 無溶血 、 淡黃色 、 無沉淀物 。 最廣泛使用的血清是什么動物血清？它有何營養(yǎng)成分？ 血漿 組織浸出液 血清 組織細胞培養(yǎng)中最常用的天然培養(yǎng)基是血清 ， 這是因為血清中含有包括大分子的蛋白質(zhì)和核酸等豐富的營養(yǎng)物質(zhì) ， 對促進細胞生長繁殖 、 粘附及中和某些物質(zhì)的毒性起著一定的作用 。高速離心，分三層：上層為血漿40%多。 天然培養(yǎng)基的種類有很多 ， 包括生物性液體 （ 如血清 ） 、 組織浸出液 （ 如胚胎浸出液 ） 、 凝固劑 （ 如血漿 ） 等 。用于動物細胞的培養(yǎng)基可以分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩 大類。 這些營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源 、 氮源 、 氨基酸 、 無機鹽 、 微量元素 、 生長因子等 。 而對于同一種細胞 ， 增長期和維持期的最適 PH也不盡相同 ， 對于大多數(shù)細胞來說 ， 偏堿性環(huán)境比酸性環(huán)境更有利于細胞的生長 。 動物細胞合適的 PH值一般在 ，低于 ， 嚴重時可導致細胞退變或死亡 。 總的來說 ， 動物細胞對低溫的耐受力比對高溫的耐受力強 ， 如溫度升至 45℃ 時 ， 1h內(nèi)人和哺乳動物細胞將被殺死；相反 ， 降低細胞置于2535℃ 時 ， 細胞仍能生長 ， 但速度減慢 ， 并維持長時間不死 ， 甚至于放在 4℃ ， 數(shù)小時后再置于 37℃ 培養(yǎng) ， 細胞仍能繼續(xù)生長 。為了使動物細胞的培養(yǎng)處于最佳狀態(tài)，了解環(huán)境因素對其影響無疑是很重要的，影響動物細胞生長、繁殖的環(huán)境因素很多，主要有溫度、
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