抗體的制備與應(yīng)用ppt課件-文庫吧資料
2025-03-28 06:09本頁面
【正文】 體 ? 雙鏈抗體（ diabody） ? 微型抗體 (minibody) ? 三鏈抗體 (triabody) ? 新型抗體分子 ? 新效能抗體 ? 雙特異性抗體（ bispecific antibody,BsAb） ? 胞內(nèi)抗體（ intrabody） ? 免疫黏連素（ immunoadhesin） ? 催化抗體（ catalytic antibody） 一、基因工程全抗體 基因工程全抗體研發(fā)的演變歷程 鼠抗體 100% 鼠源 鼠 /人崁合抗體 (6675 % 人源 ) 人源化抗體 (9095 % 人源 ) 100% 人源 （一）嵌和抗體（ chimeric antibody) 概念 指由兩種不同種系來源的基因所編碼的抗體。 ? 人抗鼠抗體反應(yīng)（ Human anti－ mouse antibody reaciton, HAMAR）低 。 ? 基本原理：利用分子生物學(xué)技術(shù)分離純化抗體基因或基因片段，在最大限度保留其抗原結(jié)合活性，降低其異源性的原則指導(dǎo)下，按臨床或科研需要對(duì)抗體基因進(jìn)行拼接組裝，在轉(zhuǎn)化適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞表達(dá)，制備具有不同大小和不同功能的抗體。 ，準(zhǔn)確診斷傳染病。 ? 抗體為全 Ig，相對(duì)分子量過大，難以穿透實(shí)體腫瘤組織，達(dá)不到有效殺傷濃度。 ? 雜交瘤細(xì)胞能在體內(nèi)外無限繁殖、傳代，因此產(chǎn)量高，可連續(xù)生產(chǎn) ? 缺點(diǎn)： ? 制備 McAb成本昂貴，制備流程長(zhǎng)，操作煩瑣，技術(shù)要求較高。一種 McAb分子的所有區(qū)域完全相同，只針對(duì)一種抗原決定基，避免了交叉反應(yīng)。 DNA合成途徑 ? 內(nèi)源性途徑（主要途徑） 利用谷氨酰胺（ Gln）或單磷酸尿苷酸在二氫葉酸還原酶的催化下合成 DNA (氨基喋呤是二氫葉酸還原酶的抑制劑，因此能有效阻斷 DNA的合成 )。TK+ 。 備注： HGPRT:次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 TK:胸腺嘧啶激酶 －免疫脾細(xì)胞： 經(jīng)抗原免疫的 BALB/c小鼠的脾臟。TK；與提供淋巴細(xì)胞的動(dòng)物品系相同。每一個(gè)雜交瘤單克隆是用一個(gè) B細(xì)胞融合而產(chǎn)生的克隆，因此，由一個(gè)識(shí)別一種抗原表位的 B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的抗體，稱為單克隆抗體。 抗 A 抗 B A B Cross reaction Same epitope 第二節(jié) 單克隆抗體 的制備與應(yīng)用 (monoclonal antibody， McAb) ? 概念：通過小鼠雜交瘤細(xì)胞和單克隆抗體技術(shù)生產(chǎn)的抗體。 ? 應(yīng)用：主要用于免疫學(xué)檢測(cè)，被動(dòng)免疫治療和緊急預(yù)防。 ? 制備流程：免疫原（佐劑）免疫動(dòng)物，分離抗血清，鑒定，保存。 根據(jù)抗原決定基由 TCR還是 BCR識(shí)別分類 主要內(nèi)容 ? 概述 ? 多克隆抗體的制備與應(yīng)用 ? 單克隆抗體的制備與應(yīng)用 ? 基因工程抗體的制備與應(yīng)用 概述 ? 第一代抗體：多克隆抗體 (polyclonal antibody，PcAb) ? 第二代抗體：?jiǎn)慰寺】贵w (monoclonal antibody， McAb) ? 第三代抗體：基因工程抗體 (geic engineering antibody， GeAb) 第一節(jié) 多克隆抗體 的制備與應(yīng)用 （ polyclonal antibody， PcAb) ? 概念：采用含有多種抗原決定基 (B細(xì)胞表位 )的抗原免疫動(dòng)物，從而刺激多個(gè) B細(xì)胞克隆產(chǎn)生針對(duì)多種抗原表位的不同抗體。 ?T細(xì)胞決定基（ T細(xì)胞表位）： T細(xì)胞決定基主要位于抗原分子內(nèi)部，必須由 APC將抗原加工處理為小分子多肽并與 MHC分子結(jié)合，然后才能被 TCR所識(shí)別。也稱為表位 (epitope)。 C區(qū)的功能 ? 激活補(bǔ)體 Immune plex（ IC） ? 激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑 ? 與細(xì)胞表面 FcR結(jié)合 1）調(diào)理作用（ opsonization)； IgG 或 IgM的 Fc段與吞噬細(xì)胞表面 FcR結(jié)合 ?促吞噬； 2）抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用 （ Abdependent cellmediated cytotoxicity,ADCC) 3) 介導(dǎo) I型超敏反應(yīng) IgE的 Fc段與肥大細(xì)胞表面 FcR結(jié)合 ?受體橋聯(lián) ?細(xì)胞活化 ? 穿過胎盤和粘膜 IgG通過胎盤； sIgA穿過粘膜 抗原是啟動(dòng)機(jī)體免疫系統(tǒng)的先決條件 ? Antigens are substances capable of stimulating immune system,
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