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自然科學(xué)]in-fusion克隆技術(shù)介紹-文庫吧資料

2025-01-24 20:04本頁面
  

【正文】 763)轉(zhuǎn)化并進(jìn)行藍(lán) /白斑篩選??寺〖夹g(shù)的應(yīng)用June 24, 202216 應(yīng)用多片段克隆 構(gòu)建載體模型插入突變位點(diǎn) 高通量克隆?June 24, 202217 應(yīng)用實(shí)例實(shí)例:多個(gè) DNA片段( 1 kb, 2 kb, 3 kb)同時(shí)克隆【 方法 】 使用 TaKaRa高品質(zhì) PCR酶分別擴(kuò)增 1 kb、 2 kb、 3 kb的目的 DNA片段 和 kb的載體,并將擴(kuò)增產(chǎn)物混合,使用 InFusion174。?不適合中型和大規(guī)??寺」こ?InFusion技術(shù)已經(jīng) 成功用于多項(xiàng)高通量克隆工程。?非定向克隆需要篩選目的片段插入方向 正確的克隆InFusion是 基因定向克隆技術(shù) ,因此無需進(jìn)行目的基因片段正確插入的克隆的篩選。?亞克隆繁瑣?多片段不能同時(shí)克隆InFusion能夠在 一次反應(yīng)中同時(shí)克隆多個(gè)片段,無需進(jìn)行亞克隆。 高效!簡便、快速、高效的克隆技術(shù)?不附加任何多余序列June 24, 202212 線性化載體任意載體克隆位點(diǎn)目的 DNA片段不需要的堿基序列引物設(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增與載體相同的15 個(gè)堿基 序列InFusion連接反應(yīng) 15 min 不附加任何多余序列的重組載體無縫克?。翰桓郊尤魏味嘤嘈蛄蠥BC?不受限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)的限制June 24, 202213 InFusion克隆不受限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)的限制 :? 在 cDNA序列中插入 內(nèi)含子 ,熒光蛋白基因? 在 cDNA序列添加 UTRs? 轉(zhuǎn)換純化標(biāo)簽例如 Myc 轉(zhuǎn)換為 His? 缺失 蛋白表達(dá)區(qū)域 …表達(dá)載體選擇插入位點(diǎn)PCR擴(kuò)增純化目的 DNA片段混合In
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