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離子交換層析分離技術(shù)ppt(1)-文庫吧資料

2025-01-24 19:26本頁面
  

【正文】 強(qiáng) 、 弱離子交換劑的選擇 3. 不同離子型交換劑的選擇 4.不同基質(zhì)離子交換劑的選擇 必須考慮的因素 ① 要求 高度的不溶性和疏松的多孔結(jié)構(gòu)或巨大的表面積,較多的交換基團(tuán)和穩(wěn)定的物理化學(xué)性質(zhì) ② 影響 因素 對(duì)樣品生物活性和可溶性的影響 pH對(duì)交換基團(tuán)、分離物電荷及電性強(qiáng)弱的影響 分子大小及共存物質(zhì)的影響 1.陰、陽離子交換劑的選擇 ? 參照電泳結(jié)果 ? 測(cè)定 pI ? 確定穩(wěn)定 pH范圍 堿性分子在偏酸性環(huán)境中穩(wěn)定:細(xì)胞色素 c 酸性分子在偏堿性環(huán)境中穩(wěn)定:核酸、 HCG 離子交換劑的選擇圖 強(qiáng)、弱離子交換劑的選擇 不同離子型交換劑的選擇 選用何種類型離子交換劑 ? 取決于離子交換劑對(duì)諸反離子的結(jié)合力。計(jì)算公式如下: )離子交換介質(zhì)的質(zhì)量()(測(cè)得的)交換容量(gm m olOHgm m ol ][/ ??凝膠或纖維類弱堿型陰離子或弱酸性陽離子交換介質(zhì)換容量的測(cè)定方法 取一定量的離子交換介質(zhì),漂洗干凈,用 1mol/ L的 NaCl處理,去離子水洗至中性,緩沖液平衡,用已知蛋白的濃度樣品過柱吸附,直至柱內(nèi)的介質(zhì)吸附的量達(dá)到飽和。 計(jì)算公式如下: )離子交換介質(zhì)的質(zhì)量()(測(cè)得的)交換容量(gm m olHgm m ol ][/ ??強(qiáng)堿型陰離子交換介質(zhì) 交換容量的測(cè)定方法 取一定量的離子交換介質(zhì),去離子水溶脹,漂洗干凈,用 1mol/ L的 HCl處理,去離子水洗至中性,1mol/ L的 NaOH處理,去離子水洗至中性。 強(qiáng)酸型陽離子交換介質(zhì) 交換容量的測(cè)定法 取一定量的離子交換介質(zhì),去離子水溶脹,漂洗干凈用1mol/ L的 NaOH處理,去離子水洗至中性, 1mol/ L的 HCl處理,去離子水洗至中性。 (mg/ g或 mmol/ g、 mg/ ml或 mmol/ ml ) 交換容量的 測(cè)定 : 強(qiáng)酸型與強(qiáng)堿型測(cè)定其解離鹽的能力; 弱酸型與弱堿型測(cè)定其中和酸堿的能力。 OH + Cl=RN+( CH3) 2 H Cl + OH RN+( CH3) 2
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