細胞工程-第十二章、試管動物與克隆動物-文庫吧資料
2025-01-23 11:13本頁面
【正文】 試驗，成功地獲得了一個可以攝食的 豹蛙 幼體。 代母的選擇與胚泡移入子宮 。 供體核的移入及原核的取出 。 二、克隆程序 核供體動物的選擇與細胞核 的獲得。 一、概念 ? 是指遺傳上完全相同的分子、細胞或來自同一祖先的生物個體的 無性繁殖群體 。 Brackett等在復雜的血清添加培養(yǎng)液 (TCM－ 199十血清 )中加入體細胞共培養(yǎng)獲得 40 ％的牛囊胚發(fā)育率 ５、試管 胚胎的移植 ? 參照胚胎工程 三、試管動物的研究意義 1. 可以用來研究受精機理， 2. 治療人類男性和動物的生殖不育， 3. 可以利用體外受精卵的發(fā)育狀況或染色體核型檢測用來檢測形態(tài)不正常精子其染色體是否正常， 4. 可以產(chǎn)生大量的動物個體， 5. 還可以簡化煩雜的凍精技術，或許只保存核物質，就可以達到受精的目的，這對保護珍貴的動物資源，將起到重要的作用。 Yadav等研究發(fā)現(xiàn)，同源或異源輸卵管細胞共同培養(yǎng)都能顯著提高水牛早期胚胎的卵裂和發(fā)育。此方法優(yōu)點是胚胎質量高，能耐受冷凍保存。 ? 目前體外培養(yǎng)的哺乳動物早期胚胎（受精卵）主要障礙是發(fā)育阻滯。 ? 另外，可以用微細玻璃針或金屬微刀片，在透明帶上切開或挑開或撕開一個口，再經(jīng)適當濃度精子受精。 ? 先用胰麋蛋白酶軟化透明帶，然后用纖細的針在透明帶上扎針孔，本法適用于精子運動乏力或少精癥不育患者的治療。當透明帶上溶出小孔后，即可撤走注射針。 單精子卵胞漿內(nèi)顯微注射 其它一些方法 ? 如果在透明帶上人為鉆孔后，可以為精子入卵提供機會，或者是易于精子入卵。使用的精子應該是獲能和發(fā)生頂體反應的。此方法可以使任何類型的精子如精子頭形不正常、死精子或嚴重缺陷的精子等，可省去獲能和頂體反應。 卵母細胞質內(nèi)注射 ? 卵母細胞質內(nèi)注射，是將整個精子或精子頭部直接注射到卵母細胞質內(nèi)。 ? 1976年， Uehara和 Yanagimachi將倉鼠或人的精子在顯微操作儀下，通過顯微工具，注射到倉鼠卵母細胞的細胞質中，使精子核在卵胞質中染色體解螺旋形成了原核。然后移入發(fā)育培養(yǎng)液（ TCM－199＋ 10％ FCS）繼續(xù)培養(yǎng)。 過程 獲得獲能的精子和成熟的卵母細胞后，應在塑料平皿底部，用已經(jīng)處理獲能的精子浮游液 5μl精子浮游液，注入小滴中，將成熟培養(yǎng)后的卵母細胞，或自體內(nèi)手術沖出的卵母細胞，以 BO液沖洗，用微吸管吸 10個卵母細胞與少量 BO液注入精子浮游液小滴中。隨著研究深入，試管老鼠、試管豬、試管牛等相繼產(chǎn)生。 ３、體外受精 ? 1951年 Chang和 Austin發(fā)現(xiàn)了精子的獲能現(xiàn)象，為體外受精的實現(xiàn)打開了通路。 ? 如果要觀察細節(jié)，需要染色、切片后觀察。 ? 進行體外受精的卵母細胞，一般以卵丘卵母細胞復合體外面完整地包有 3－ 4層卵丘細胞，卵母細胞胞質無斑塊者為佳。 ? 多數(shù)實驗動物的卵母細胞胞 質呈透明狀 ，但由于胞質中 富含大量脂滴和空泡 ，所以在鏡下呈 暗色 。 卵母細胞一般檢測 ? 得到卵母細胞后，可根據(jù)卵泡發(fā)育的不同時期，在顯微鏡下檢查 核和胞質發(fā)育的狀況 ，如核的形態(tài)、位置和所處的時期。 （ 3）對于屠宰場中的大中型動物，可以用 注射器插入卵泡中抽取 ，或在手術后暴露卵巢，以注射器自卵泡中取卵。 （２）對于稍大一些
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