細(xì)胞生物學(xué)系列常見問題及解決方法-文庫吧資料
2025-01-15 11:09本頁面
【正文】 的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性。在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)中選擇轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性低的比例進(jìn)行轉(zhuǎn)染。 c)、誘導(dǎo)時(shí)間過長：一般情況下誘導(dǎo)幾個(gè)小時(shí)就可以出現(xiàn)早期凋亡，因此通常不需要處理大于 48小時(shí)以上；誘導(dǎo)時(shí)間過長會(huì)使 營養(yǎng)物質(zhì)耗盡，導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)差，假陽性結(jié)果偏高。若活力低，建議重新復(fù)蘇細(xì)胞，通常剛復(fù)蘇的細(xì)胞至少要傳代 3次以后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 e)、若為貼壁細(xì)胞，藥物誘導(dǎo)后漂浮的細(xì)胞也要收集，這部分細(xì)胞往往是凋亡陽性的細(xì)胞，丟棄會(huì)造成陽性結(jié)果偏低。 c)、細(xì)胞用冷 PBS洗滌離心后，應(yīng)盡量去掉殘余液體：殘留 PBS中的磷酸根，會(huì)與游離的 Ca2+形成磷酸鈣沉淀。 二、 Vazyme的 Annexin V系列 1)、 Annexin VFITC染 色失敗或者陽性率偏低 a)、要確定實(shí)驗(yàn)中的誘導(dǎo)劑是否能產(chǎn)生凋亡：可通過設(shè)定確切凋亡誘導(dǎo)效果的陽性藥物對(duì)照來排除這一情況。 4)、熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀分析只剩下很少的細(xì)胞 a)、在操作過程中丟失大量細(xì)胞：提高起始的細(xì)胞量。 3)、組織切片從載玻片上脫落 a)、組織切片粘附之前的包被不充分。 b)、延長標(biāo)記時(shí)間至 2h，并適當(dāng)增加 TdT酶及 dUTP的含
試題試卷相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1