【正文】 路顯著不同。 3．柱不用時將兩端封閉，置于盒中。老柱也要定期老化，以除去樣品中的難揮發(fā)物在柱頭的積累。 （四）柱子的維護(hù)與貯存 1．載氣純度要高 如用高純氮氣（ %），載氣純度不高柱壽命下降，如 Carbowax 易氧化。 （三）柱長 一般有 12m， 25m， 50m 三種，所需柱長取決于樣品的復(fù)雜性。如 . m 的柱。 1．為了增加載樣量 18 可選擇內(nèi)徑較大，液膜較厚的柱，如 . m 的柱，但增加載樣量是在犧牲柱效的條件下獲得的。大多數(shù)工作可在 SE30 及 OV101 柱上完成。 （三）其它 毛細(xì)管柱 多孔層開管柱 PLOT（ Porous Layer Open Tubular） 載體涂布開管柱 SCOT（ Support Coated Open Tubular） 壁處理開管柱 WTOT（ Wall Treated Open Tubular） (此部分不作要求，有興趣可自學(xué)，無太多實用性 ) 三．色譜柱的選擇 FSOT 柱的選擇應(yīng)考慮固定相，柱內(nèi)徑，固定相膜厚度及柱長等。比未交聯(lián)的固定相可加熱至更高的溫度或冷卻至更低的溫度。洗滌溶劑：戊烷、甲醇。 （ 2）得到不可提?。?nonextractable）的涂層，在不分流進(jìn)樣時，固定相涂層不會被樣品溶劑溶解或剝落。 典型的橫向交聯(lián)反應(yīng)為： C HSiC H3O OC H2C H3SiC H3O OC H2SiC H3O OC H2O RSiO OC H2C H3R OH2R O固定相的橫向交聯(lián)是通過游離 基起始劑而完成的。橫向交聯(lián)是指通過反應(yīng)處理，使固定相分子相互鍵合，形成更大、更穩(wěn)定的大分子薄膜。 柱子涂布好固定液后，置柱室，通氮氣（流量要小，不宜過大），并按一定的溫度程序老化 8~12 小時。 2．靜態(tài)法 將事先配制好的低濃度固定液（ ~2%， W/V）充滿整個毛細(xì)管柱，柱子的一端經(jīng)嚴(yán)格排除氣泡后用封口膠封住，開口的一端連接到真空系統(tǒng)。 1．動態(tài)法 將要涂布的固定 液配制在合適的低沸點溶劑中（如 SE30 可用二氯甲烷），溶液濃度隨固定液粘度而異，一般為 10~60%（ W/V），將配好的溶液壓入柱子，使其在柱中形成液塞，液塞長度約為柱長的 20%，在氮氣壓力下嚴(yán)格控制液塞的移動速度，當(dāng)液塞離開柱子以后繼續(xù)通氮氣以吹干溶劑，使毛細(xì)管壁上留下一層固定液的液膜。固定液膜厚 m~ m。可實驗室制備，也可從市場購買。 S i O S i O S i O S iH2O S i O S i O H +SiHO O Si 雖 然合成熔融二氧化硅含金屬氧化物很低（〈 1ppm〉，但是由于表面的硅醇基仍然存在，而呈現(xiàn)殘留活性，因此需用硅烷化等方法去活性。涂布保護(hù)層的目的是防潮及防止擦傷管壁。以合成二氧化硅為原料，爐溫為 2022℃，將 熔融二氧化硅毛細(xì)管從爐內(nèi)拉出，然后涂上外保護(hù)層。以下將從用觀點出發(fā)，對這種柱進(jìn)行討論。 FSOT 化學(xué)惰性，強度好，有彈性，可繞成圈狀，而其本來狀態(tài)是直的，故便于安裝、使用。 玻璃表面具有一定的活性，包括金屬氧化物及質(zhì)子供體和受體作用。那時毛細(xì)管柱的柱壁材料為玻璃。 4． 氣化室溫度一般與檢測器溫度相同，若待測物不穩(wěn)定，則氣化室溫度應(yīng)設(shè)低一點。以防固定液流失。以防柱中 流出物在檢測器上凝結(jié)，污染檢測器。 MSD 檢測器時：氦氣。 硅烷化玻璃棉 水泵抽氣 14 ECD 檢測器時：高純氮、氦氣。 四．填充柱操作條件的選擇 （一）載氣 GC 中的載氣有氮氣、氦氣、氬氣、氫氣。填口作為入口。 使用前清洗 玻璃柱：洗液浸泡→水洗至中性→烘干。 內(nèi)徑 2mm~6mm，長 1~6m， U 形或螺旋形。 目前多用硅烷化白色擔(dān)體，如 102 白色硅烷化擔(dān)體 Chromosorb G 硅烷化擔(dān)體 Chromosorb W 硅烷化擔(dān)體 混合柱 混裝柱 （一根色譜柱） 聯(lián)合柱（二根色譜柱串聯(lián)） tR＇ X = WA ＇ WA tR＇ A + WB ＇ WB tR＇ B 12 2．擔(dān)體的表面處理 酸洗： 6mol/L HCl，除去擔(dān)體表面的鐵等金屬氧化物 ↓ 水洗：使成中性 ↓ 烘干 ↓ 硅烷化 硅烷化法： 方法一：試劑為 1~2% 二甲基二氯硅烷的甲苯溶液 Si O SiO H O HSiC H 3Cl ClC H 3Si O SiOSi OC H 3 C H 3+ 或 Si O SiO HSiC H 3Cl ClC H 3Si O SiOSiC H 3ClC H 3 C H 3 O H+Si O SiOSiC H 3OC H 3 C H 3 方法二：六甲基二硅胺的石油醚溶液 Si O SiO H O HSiC H 3C H 3C H 3N H SiC H 3C H 3C H 3SiOSiC H 3C H 3 C H 3O SiOSiC H 3C H 3 C H 3+ 三 . 色譜柱的制備 (一 ) 固定液的涂布 稱取擔(dān)體適量置圓底燒瓶中，再按比例稱取固定液適量，用有機溶劑洗入圓底燒瓶中，加有機溶劑使擔(dān)體淹沒，將圓底燒瓶置水浴中加熱回溜 5~6 小時，再置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，緩緩減壓濃縮至干 ，置 60~100℃ 烘箱中靜態(tài)老化 12~24 小時，以除去殘余溶劑。 白色擔(dān)體：硅藻土 +助熔劑（ Na2SO4）煅 燒而成，其中氧化鐵變成無色的鐵硅酸鈉配合物。 1．分類 紅色擔(dān)體：天然硅藻土燒結(jié)而成，含氧化鐵而成紅色，結(jié)構(gòu)緊密，機械強度好，表面有氫鍵及酸堿活性作用點。 （一）要求 顆粒均勻，比表面積大，機械強度好，熱穩(wěn)定性好，化學(xué)惰性等。從上圖可以看出在 70%A+30%B，以及 25%A+75%B 時均能使 1， 2， 3 三個組分得到最佳分離，他們?nèi)叩某龇屙樞蚍謩e為 1→ 3→ 2 和 1→ 2→ 3。其具體操作如下： 設(shè)有 1， 2， 3 三個樣品組分，在固定液 A 上 1， 2 分不開，在固定液 B 上 1， 3 分不開。實踐證明，混合固定液的保留值具有加和性。 （ 3）若樣品中的待測 組分容易形成氫鍵，則采用氫鍵型固定液（如 PEG20M）較為有利。無論采用非極性或極性固定液，一般沸點小的先出峰（對同系物而言）。選擇固定液時一般可遵循的原則是： （ 1）“相似相容” 分離極性大的組分，則選用極性大的固定液。 4．固定液的選擇 10 固定液的選擇在很大程度上是經(jīng)驗過程。另外，由于誘導(dǎo)效應(yīng)（酯基的），存在著α活潑氫原子，所以有親電性，對烯烴、芳烴、雜 環(huán)化合物有較大的作用力。適合于分離醇類、醛類、脂肪酸類、酚類、生物堿、酯類等化合物。它們能與羥基化合物、堿性含氮化合物、酮類等形成氫鍵。 ⑤ 聚乙二醇： XE60 +++ 275℃ 丙酮 OOV225 +++ 275℃ 氯仿 QF1 +++ 200℃ 丙酮 9 H O C H 2 C H 2 O n H PEG20M ++++ 250℃ 氯仿 PEG 6000 ++++ 200℃ 氯仿 PEG400 ++++ 125℃ 氯仿 這類固定液含有醚基及羥基，是氫鍵型固定液。而對芳烴和醇類則否。適用于分離糖類、醇類、酚類、甾體化合物、脂肪酸等。氰基中氮原子未用電子對，能與醇類、酸類等形成氫鍵。此類固定液適合于分離甾體化合物、生物堿、醇類、糖類等化合物。按苯基含量的不同，有低苯基（含苯基 25%），中苯基（含苯基 50%）及高苯基硅酮之分。對于烴