醫(yī)學(xué)]中國(guó)藥科大學(xué)新藥篩選中心細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)材料-文庫(kù)吧資料
2025-01-10 07:56本頁(yè)面
【正文】 后，有的鹽可能無(wú)法重新溶解，從而導(dǎo)致培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分和滲透壓改變，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，容易細(xì)胞破裂而死亡； b. 培養(yǎng)基開(kāi)瓶后盡快用完，不宜長(zhǎng)時(shí)間保存，因?yàn)闀r(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo) 致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和 pH值的改變； 培養(yǎng)基 PH值偏高？ pH后使用負(fù)壓過(guò)濾； 請(qǐng)使用正壓 b. 液體培養(yǎng)基啟封后長(zhǎng)時(shí)間無(wú)法用完； 請(qǐng)盡量快用，或用之前用小體積容器分裝（不能在液面上留有太多空氣）； c. 如結(jié)果已經(jīng)造成； 客戶接種前請(qǐng)將裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶在 CO2溫箱孵育（甚至過(guò)夜），直到 pH恢復(fù)正常； HCl 調(diào)節(jié)，增加污染風(fēng)險(xiǎn)和高滲透壓結(jié)果； 碳酸氫鈉的作用及含量？ 1. 與 CO2一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基 PH值穩(wěn)定； 2. 不同的培養(yǎng)基要求添加 NaHCO3的量不一樣，如 DMEM要求添加 ，為了保持PH值穩(wěn)定，必須用高濃度的 CO2平衡，一般不低于 8%，而 1640等要求添加 NaHCO3 ，還有些培養(yǎng)基要求添加更少，那么這些培養(yǎng)基就要求較低的濃度平衡，一般是 5%； HEPES的作用及含量？ Buffer system是碳酸氫鈉，它可提供營(yíng)養(yǎng)，但卻在生理 PH值條件下會(huì)降低緩沖能力。用于培養(yǎng)大鼠，兔子和雞胚細(xì)胞，還用于中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞以及肺細(xì)胞的培養(yǎng) 普通培養(yǎng)基 ? 5大常用培養(yǎng)基 ?RPMI 1640 ?Dulbecco’ s Modified Eagles Medium (DMEM) ?Minimum Essential Medium (MEM) ?Iscove’ s Modified Dulbecco’ s Medium (IMDM) ?Medium 199 ?培養(yǎng)基提供形式 ?干粉 ?液體 培養(yǎng)基的選擇？ a. 查詢 ATCC或文獻(xiàn)，參照該細(xì)胞之前的培養(yǎng)方案 ，許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞培養(yǎng)； 干粉培養(yǎng)基的配制？ a. 建議當(dāng)開(kāi)封一個(gè)包裝后，請(qǐng)立即將其一次性全部配置； b. 我們不建議將干粉培養(yǎng)基或者鹽類物質(zhì)配置成為濃縮液，這樣可能會(huì)導(dǎo)致某些鹽類混合物難融而導(dǎo)致其它沉淀物的增多； 濾之前加入；如果添加劑是無(wú)菌的，則可以直接添加到無(wú)菌的培養(yǎng)基。最初用于雞胚肌細(xì)胞的培養(yǎng)，還用于各種細(xì)胞的維持和病毒生產(chǎn) ? Ham’ s F10 (Ham’ s Nutrient Mixture F10): 由 Ham發(fā)明，用于人類 2倍體細(xì)胞和倉(cāng)鼠細(xì)胞的培養(yǎng)。廣泛用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。最先用于培養(yǎng)小鼠的 L 細(xì)胞和人類 HeLa細(xì)胞，現(xiàn)在廣泛用于各種細(xì)胞
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