雜交棉與親本的基因差異表達(dá)_畢業(yè)論-文庫吧資料
2025-06-11 19:32本頁面
【正文】 igo(dT)18 Primer 為引物，合成 cDNA 第一鏈，然后通過 RNaseH 使雜合鏈中 RNA 形成單鏈切口，在 DNA Polymerse I 與 DNA ligase 的作 用下合成 cDNA 第二條鏈。用 500μ L 70%乙醇洗沉淀，離心，晾干。取上清加入 3M 的乙酸鈉、 2V 100%乙醇。 總 RNA 中 DNA 的消化 反應(yīng)體系如下： 試劑 體積 總 RNA 10100μ g RNA 酶抑制劑 1μ L（ 20U/μ L） 不含 RNA 酶的 DNA 酶 I 1μ L（ 10 U/μ L） 5 DNAseI Buffer 10μ L 加 H2ODEPC 至 總體積 50μ L 37℃溫育 2030 min，加 DEPC H2O450μ L，加入 500μ L 酚 /氯仿（ 3:1），漩渦混勻， 4℃靜置片刻， 12021rpm， 15min。 石河子大學(xué)本科畢業(yè)論文 魏凱 雜交棉與親本的基因差異表達(dá) 5 5 所用試劑和塑料耗材均需預(yù)先用 %DEPC 處理，然后高溫滅菌。 苗期干重測定 石河子大學(xué)本科畢業(yè)論文 魏凱 雜交棉與親本的基因差異表達(dá) 4 4 將棉花植株烘干后 （ 80℃ ）， 測定干重，并計(jì)算其雜種優(yōu)勢。 1． 材料與方法 材料： 雜交種：新陸早 43；父本： Ⅱ 2 品系；母本： 414 品系 方法 棉花的種植 將新陸早 43號及其親本的種子浸泡過夜，待發(fā)芽后，轉(zhuǎn)入盛有 Hoagland 營養(yǎng)液的塑料盒中培養(yǎng)。到 2021年，新陸早 43號已推過廣 70萬公頃。 至今為止，有關(guān)新疆高產(chǎn)雜交棉的基因差異表達(dá)的分析還很少， 新陸早 43號是石河子農(nóng)科中心棉花研究所選育，是早熟高產(chǎn)型陸地雜交棉新品種，在 2021年 3月通過審定，是新疆第一個(gè)通過審定的高產(chǎn)雜交棉 [13]。 以上的有關(guān)基因差異表達(dá)的研究就都是用的 DDTTPCR 技術(shù)，但是該技術(shù)有明顯的缺點(diǎn)是假陽性比較高，可重復(fù)性較差，且對高強(qiáng)度的 mRNA 具有很強(qiáng)的傾向性，擴(kuò)增差別條帶的分子長度比較短小，一般在 110450 之間僅代表 mRNA 的 3’端，多為非編碼區(qū)功能信息含量少。 雖然有以上的關(guān)于基因差異表達(dá)的研究，但是有關(guān)基因差異表達(dá)的內(nèi)在機(jī)制尚不清楚。趙云雷等（ 2021）研究了棉花雜交種與親本間 DNA 胞嘧啶甲基化及其基因差異表達(dá)分析，結(jié)果表明，在棉花發(fā)育的整個(gè)階段，雜交種與雙親相比，基因表達(dá)發(fā)生了明顯的改變，并且在高優(yōu)勢雜交組合中的差異表達(dá)基因的比例要高于低優(yōu)勢的雜交組合。 迄今為止，有關(guān)棉花雜種基因差異表達(dá)研究也有一定的進(jìn)展，其中，汪保華等（ 2021）用 DDTTPCR 技術(shù)對棉花雜交品種湘雜 2 號的強(qiáng)優(yōu)勢組合雜種育親本進(jìn)行了基因差異表達(dá)分析。但雜種優(yōu)勢表達(dá)是復(fù)雜的，多數(shù)有利性狀是由多基因控制，不同材料性狀差異較大，性狀表現(xiàn)與環(huán)境存在著互作關(guān)系等，僅靠有限的一些外觀性狀和一些生理生化指標(biāo)進(jìn)行預(yù)測雜種優(yōu)勢是很難全面的，這就是為什么有些研究結(jié)果不盡一致，甚至相矛盾的原因。 棉 花雜種優(yōu)勢是客觀存在的，半個(gè)多世紀(jì)以來，人們試圖從棉花配合力分析、生理生化變化及親本遺傳距離等方面揭示棉花雜種優(yōu)勢表達(dá)的內(nèi)在規(guī)律，預(yù)測棉花雜種優(yōu)勢。 自雜交棉種植以來，其種植面積逐年上升， 雜交棉的利用已經(jīng)成為進(jìn)一步提高棉花產(chǎn)量的重要途徑。隨著耕地不斷減少，糧棉爭地矛盾突出，對棉花高產(chǎn)研究是形勢所需。 Differential Expression gene 前 言 雜種 優(yōu)勢可以大幅度提高 農(nóng)作物的產(chǎn)量、品質(zhì)和抗逆性，具有巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。 關(guān)鍵詞 新陸早 43 號； 雜種優(yōu)勢； 基因差異表達(dá) Differential expression gene in hybrids cotton and parents Abstract: Heterosis refers to produce F1 hybrid fecundity traits of two different hybrids in growth, life force,adaptability and yield, quality and other characters than the parents phenomenon. Incubator cotton through laboratory, determination of North Xinjiang cotton high yield hybrid cotton Xinluzao 43 and its parents at seedling stage (three leaf stage) and the dry matter weight, found that performance Xinluzao 43 seedling heterosis, the dry matter weight was signif
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