實驗八不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳-文庫吧資料
2025-05-21 22:04本頁面
【正文】 立，他們發(fā)現(xiàn)在樣品介質(zhì)和丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強還原劑后，蛋白質(zhì)亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分子量的大小（可以忽略電荷因素），其原理在于： ： 由于 SDS（十二烷基硫酸鈉）產(chǎn)生的十二烷基硫酸根帶負電，使各種蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物都帶上相同密度的負電荷，它的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原的電荷量， 因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間原有的電荷差別； ： SDS能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵，使分子去折疊，破壞蛋白分子的二、三級結(jié)構(gòu)。 ， 分為： （ 1） 圓盤電泳 （ 2） 板狀電泳 兩者電泳原理完全相同 。 聚丙烯酰胺凝膠電泳的分類 1. 根據(jù)其有無濃縮效應(yīng) ， 分為： （ 1） 連續(xù)系統(tǒng) —— 連續(xù)系統(tǒng)電泳體系中緩沖液 pH值及凝膠濃度相同 ， 帶電顆粒在電場作用下 ， 主要靠電荷和分子篩效應(yīng) （ 2） 不連續(xù)系統(tǒng) —— 不連續(xù)系統(tǒng)中由于緩沖液離子成分 ， pH， 凝膠濃度及電位梯度的不連續(xù)性 ， 帶電顆粒在電場中泳動不僅有電荷效應(yīng) ，分子篩效應(yīng) ， 還具有濃縮效應(yīng) ， 因而其分離條帶清晰度及分辨率均較前者佳 。 聚丙烯酰胺凝膠的特性 (1)在一定濃度時，凝膠透明，有彈性，機械性能好； (2)化學性能穩(wěn)定，與被分離物不起化學反應(yīng)，在很多溶劑中不溶； (3)對 pH和溫度變化較穩(wěn)定； (4)幾乎無吸附和電滲作用，只要 Acr純度高，操作條件一致，則樣品分離重復(fù)性好； (5)樣品不易擴散，且用量少，其靈敏度可達 106g (6)凝膠孔徑可調(diào)節(jié)，根據(jù)被分離物的分子量選擇合適的濃度，通過改變單體及交聯(lián)劑的濃度調(diào)節(jié)凝膠的孔徑； (7)分辨率高，尤其在不連續(xù)凝膠電泳中，集濃縮、分子篩和電荷效應(yīng)為一體。 (1)在化學聚合過程中，以 過硫酸銨（ AP） 為催化劑，以 四甲基乙二
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