實(shí)驗(yàn)八不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳-文庫吧
2025-04-23 22:04 本頁面
【正文】 （時(shí)間 5min） 染色（時(shí)間 2min） 漂洗脫色至背景透亮 安裝、加樣、電泳 二、電泳基本原理及相關(guān)知識 電泳的概念 帶電粒子 （膠體顆粒、離子等）在 電場 的作用下在特定的 介質(zhì) 中向與其電荷性質(zhì)相反的電極方向定向泳動的現(xiàn)象。 廣泛應(yīng)用于生物大分子的分離和鑒定 . 電泳的基本原理 利用物質(zhì)的兩個(gè)差異來分離物質(zhì) (1)電荷性質(zhì) (2)電荷數(shù)量 (1)分子大小 (2)分子形狀 電泳分離蛋白質(zhì)的原理 1. 蛋白質(zhì)兩性解離與等電點(diǎn) 若向蛋白質(zhì)溶液中加入適量的酸或堿，使羧基和氨基的解離度相同，此時(shí)溶液的 pH 值稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)（ PI）。 2. 溶液 pH與蛋白質(zhì)等電點(diǎn)決定 蛋白質(zhì)電荷性質(zhì)與數(shù)量 3. 不同 蛋白質(zhì)分子大小和分子形狀的差異 實(shí)驗(yàn)室中常用到的電泳方法 （以介質(zhì)分類） 1. 紙電泳： 是最早使用的一種電泳技術(shù)，濾紙為支持物 2. 醋酸纖維膜電泳： 醋酸纖維膜為其支持物 3. 凝膠電泳 （ 1） 瓊脂糖凝膠電泳 （ 2） 聚丙烯酰胺凝膠電泳 三、聚丙烯酰胺凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳原理 聚丙烯酰胺凝膠電泳 (polyacrylamide gel electrophoresis，簡稱 PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的一種常用電泳技術(shù)。 聚丙烯酰胺凝膠由 單體丙烯酰胺 和 甲基雙丙烯酰胺 聚合而形成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，聚合過程由自由基催化完成。 催化聚合的常用方法有兩種：化學(xué)聚合法和光聚合法。 (1)在化學(xué)聚合過程中，
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