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儀器分析第四章高效液相色譜分析法-文庫吧資料

2025-05-21 10:53本頁面
  

【正文】 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 原理 : 將一種 ( 或多種 ) 與溶質(zhì)離子電荷相反的離子( 對離子或反離子 ) 加到流動(dòng)相 ( 固定相 ) 中使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水性離子對化合物 , 使其能夠在兩相之間進(jìn)行分配 。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 四、離子對色譜 離子對色譜 : 用正向或反向色譜柱分離離子和中性化合物混合物的方法 。 作用大 , 保留時(shí)間長 。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 陽離子交換: R— SO3H + M+ = R— SO3 M + H+ 陰離子交換: R— NR4OH + X = R— NR4 X + OH 一般形式: R— A + B = R— B + A ? ? ? ?? ? ? ?BcARcAcBRcKAB??? 試樣組分與交換基團(tuán)間的作用力的大小決定色譜的保留行為 。 陽離子 : - SO3H(強(qiáng) ) - CO2H(弱 ) 陰離子: - N+R3(強(qiáng) ) - NH2 (弱 ) 擔(dān)體 苯乙烯 二乙烯苯共聚物微球 鍵合基團(tuán) 鍵合 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 流動(dòng)相 : 陽離子交換樹脂固定相 , 采用酸性水溶液; 陰離子交換樹脂固定相 , 采用堿性水溶液 。 C O O HO HO HC O O HO HO HH O沒食子酸 3,4二羥基苯甲酸 固定相 : 非極性 。 特點(diǎn) 將各種不同基團(tuán)通過化學(xué)反應(yīng)鍵合到硅膠( 擔(dān)體 ) 表面的游離羥基上 。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 (二)、化學(xué)鍵合固定相色譜 固定相非常穩(wěn)定 , 在使用中不易流失 。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 固定相極性 流動(dòng)相極性 正相分配色譜 (正相柱) 組分極性越大,保留時(shí)間越長;使用極性化合物的分離。 與氣相色譜中氣 液色譜比較? 改變流動(dòng)相的組成來 改善分離效果。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 二、液 液分配與化學(xué)鍵合相色譜 (一)、液 液分配色譜 固定相與流動(dòng)相均為液體(互不相溶)。 K值越大,保留時(shí)間越長,分配系數(shù)大。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第二節(jié) 主要分離類型 M S S MX nS X nS? ? ?? ? ? ?? ?? ? ? ?? ?nsMnMsScXcScXcK ? 下標(biāo) M、 s分別代表流動(dòng)相和固定相 , n代表被吸附的溶劑分子數(shù); K代表吸附平衡常數(shù) 。 固定相 : 固體吸附劑 , 如硅膠 、 氧化鋁等 。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第一節(jié) 高效液相色譜儀 特點(diǎn): 高靈敏度; 高選擇性; 可用于梯度洗脫 。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第一節(jié) 高效液相色譜儀 (三)、熒光檢測器 — 專用型檢測器 基本原理: 在一定的條件下 , 熒光強(qiáng)度與流動(dòng)相中的組分的濃度成之比 。 生命科學(xué)中各類糖類化合物,沒有紫外吸收,一般要用示差折光檢測器。 生物與化學(xué)工程學(xué)院 儀器分析 第一節(jié) 高效液
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