【正文】 小于或等于人的可能攝入量的 100 倍，或最小觀察到有害作用劑量組其受試物在飼料中的比例小于或等于 10％，且劑量又小于或等于人的可能攝入量的 100 倍，原則上應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。 傳統(tǒng)致畸試驗 以 LD50 或 30 天喂養(yǎng)實驗的最大未觀察到有害作用劑量設(shè)計的 受試物各劑量組，如果在任何一個劑量組觀察到受試物的致畸作用，則應(yīng)放棄該于保健食品如果觀察到有胚胎毒性作用，則應(yīng)進(jìn)行進(jìn)一步的繁殖試驗。 “好好學(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 : 若最小觀察到有害作用劑量小于人的可能攝入量的 100 倍，或觀察到毒性反應(yīng)的最小劑量組其受試物在飼料中的比例小于或等于 10％，且劑量又小于人的可能攝入量的100 倍，原則上應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。 30 天喂養(yǎng)試驗 對只要求進(jìn)行第一、二階段毒理學(xué)試驗的受試物，若 30 天喂養(yǎng)試驗的最大 未觀察到有害作用劑量大于或等于 人的可能攝入量的 100 倍，綜合其它各項試驗結(jié)果可初步做出安全性評價。 遺傳毒性試驗 如三項試驗（ Ames 試驗或 V79/HGPRT 基因突變試驗，骨髓 細(xì)胞微核試驗或哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗，及 或 中的任一項）中，體外或體內(nèi)有一項或以上試驗陽性，一般應(yīng)放棄該受試物用于保健食品。 如動物未出現(xiàn)死亡的劑量大于或等于 10g/kgBW（涵蓋人體推薦量的 100 倍），則可進(jìn)入下一階段毒理學(xué)試驗。 各項毒理學(xué)試驗結(jié)果的判定 急性毒性試驗 如 LD50 小于人的可能攝入量的 100 倍，則放棄該受試物用于保健食品。 代謝試驗 了解受試物在體內(nèi)的吸收、分布和排泄速度以及蓄積性，尋找可能的靶器官；為選擇慢性毒性試驗的合適動物種（ species）、系（ strain）提供依據(jù)；了解代謝產(chǎn)物的形成情況。 致畸試驗 了解受試物是否具有致畸作用。 遺傳毒性試驗 “好好學(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 : 對受試物的遺傳毒性以及是否具有潛在致癌作用進(jìn)行篩選。 針對不同食用人群和（或）不同功能的保健食品，必要時應(yīng)針對性增加敏感指標(biāo)及敏感試驗。如服用量大于原料的常規(guī)用量時，需增加 30 天喂養(yǎng)試驗，必要時進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗和第三階段毒性 試驗。如服用量大于常規(guī)時，需急毒性試驗、三項致突變試驗和 30 天喂養(yǎng)試驗，必要時進(jìn)行傳統(tǒng)致畸試驗。 以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)為原料生產(chǎn)的保健品，分以下情況確定試驗內(nèi)容： 以傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)且食用方式與傳統(tǒng)食用方式相同的保健食品，一般不要求進(jìn)行毒性實驗。 在國外多個國家廣泛食用的原料，在提供安全性評價資料的基礎(chǔ)上，進(jìn)行第一、二階段毒性試驗，根 據(jù)試驗結(jié)果決定是否進(jìn)行下一階段毒性試驗。 凡以已知的化學(xué)物質(zhì)為原料，國際組織已對其進(jìn)行過系統(tǒng)的毒理學(xué)安全性評價，同時申請單位又有資料證明我國產(chǎn)品的質(zhì)量規(guī)格與外一致，則可將該化學(xué)物先進(jìn)行第一、二階段毒性試驗。 “好好學(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 : 僅在國外少數(shù)國家或國內(nèi)局部地區(qū)有食用歷史的原料或成分，則上應(yīng)對該或成分進(jìn)行第一、二、三階段的毒性試驗，必要時進(jìn)行第四階段毒性試驗。用該原料生產(chǎn)的保健食品原則上須進(jìn)行第一、二階段的毒性試驗，必要時下階段的毒性試驗。 第三階段：亞慢性毒性試驗 90 天喂養(yǎng)試驗、繁殖試驗、代謝試驗 第四階段：慢性毒性試驗（包括致癌試驗） 5 不同保健食品選擇毒性試驗的原則要求 以普通食品和衛(wèi)生部規(guī)定的藥食同源物質(zhì)以及允許用作保健品的外動植物或動植物提取物、微生物、化學(xué)合成等為原料產(chǎn)的保健食品，應(yīng)對該和用原料生產(chǎn)的保健食品分別進(jìn)行安全性 評價。 30 天喂養(yǎng)試驗。 小鼠精子畸形分析或睪丸染色體畸變分析。 骨髓細(xì)胞微核試驗或哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗。從 Ames 試驗或 V79/HGPRT 基因突變試驗、骨髓細(xì)胞微核試驗或哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗、 或 試驗中分別各選一項。 4 保健食品安全性毒理學(xué)評價試驗的四個階段和內(nèi)容 毒理試驗的四個階段和內(nèi)容 第一階段：急性毒性試驗 經(jīng)口急性毒性： LD50 ，聯(lián)合急性毒性，一次最大耐受量試驗。 益生菌等微生物類保健食品處理：益生菌類或 其它微生物類等保健食品在進(jìn)行 Ames試驗或體外細(xì)胞試驗時，應(yīng)將微生物滅活后進(jìn)行。在調(diào)整受試物的乙醇濃度時，原則上應(yīng)使用該保健食品的酒基。不需要濃縮的受試物乙醇濃度 15％時，應(yīng)將各劑量組的乙醇濃度調(diào)整至 15％。乙醇濃度低于 15％ (v/v)的受試物，濃縮后的乙醇應(yīng)恢復(fù)至受試物定型產(chǎn)品原來的濃度?？墒褂脺囟?60℃～ 70℃ 減壓或常壓蒸發(fā)濃縮、冷凍干燥等方法。 膨脹系數(shù)較高的受試物處理：應(yīng)考慮受試物的膨脹系數(shù)對給予劑量影響，依此來選擇合適的受試物給予方法（灌胃或摻入飼料）。 袋泡茶類受試物的處理：可用該受試物的水提取進(jìn)行驗，方法應(yīng)與產(chǎn)品推薦飲用的方法相同。一般可選用蒸餾水、食植物油、淀粉、明膠、羧甲基纖維素等。應(yīng)選擇適合于受試物的溶劑、乳化劑或助懸劑。 3. 對受試物處理的要求： 對受試物進(jìn)行不同的試驗 時應(yīng)針對試驗的特點和受試物的理化性質(zhì)進(jìn)行相應(yīng)的樣品處理。 提供原料來源、生產(chǎn)工藝、推薦人體攝入量、使用說明書等有關(guān)資料。 2 對受試物的要求 以單一已知 化學(xué)成分為原料的受試物，應(yīng)提供受試物（必要時包括其雜質(zhì)）的物理、化學(xué)性質(zhì)（包括化學(xué)結(jié)構(gòu)、純度穩(wěn)定性等）?！昂煤脤W(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 :Toxicological Assessment Standard for Health Food “好好學(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 : 目 錄 第一部分 評價程序 一、主 題內(nèi)容與適用范圍 .... ... ....................................2 二、對 受試物的要求 .................................................2 三、 對受試物處理的要求 ............................................2 四、 保健食品安全性毒理學(xué)評價試驗的四個階段和內(nèi)容 ...................3 五、 不同保健食品選擇毒性試驗的原則要求 .............................3 六、保健食品安全性毒理學(xué)評價試驗的目的和結(jié)果判定 ...................4 七、 保健食品毒理學(xué)安全性評價時應(yīng)考慮的問題 .........................7 第二部分 評價方法 一、急性毒性試驗 ..................................................11 二、鼠傷寒沙門氏菌 /哺乳動物微粒體酶試驗 ...........................24 三、骨髓微核試驗 ..................................................34 四、哺乳動物骨髓細(xì)胞染色體畸變試驗 ................................37 五、小鼠精子畸變試驗 ..............................................40 六、小鼠睪丸染色體畸變試驗 ........................................42 七、顯性致死試驗 ..................................................45 八、非程序性 DNA 合成試驗 ..........................................47 九、果蠅伴性隱性致死試驗 ..........................................53 十、體外哺乳類細(xì)胞（ V79/HGPRT）基因突變試驗 .......................55 十一、 TK 基因突變試驗 .............................................58 十二、 30 天和 90 天喂養(yǎng)試驗 ........................................61 十三、致畸試驗 ....................................................63 十四、繁殖試驗 ................................... ................68 十五、代謝試驗 ................................ ...................73 十六、慢性毒性和致癌試驗 ..........................................76 十七、日容許攝入量（ ADI）的制定 .............. ....................80 十八、致突變物，致畸物和致癌物的處理方法 ..........................82 “好好學(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 : 第一部分 Part 1 評價程序 Assessment Procedures“好好學(xué)習(xí)天天向上” 打造中國最大的學(xué)習(xí)資源平臺！ 免費培訓(xùn) : 免費下載 : 1 主題內(nèi)容與適用范圍 本程序規(guī)定了保健食品安全性毒理學(xué)評價的統(tǒng)一規(guī)程。 本程序適用于保健食品的安全性評價。含有多種原料的配方產(chǎn)品，應(yīng)提供受試物的配方，必要時應(yīng)提供受試物各組成成分，特別是功效成分或代表性成的物理、化學(xué)性質(zhì)（包括化學(xué)名稱、結(jié)構(gòu)純度穩(wěn)定性溶解等）及檢測報告有關(guān)資料。 受試物應(yīng)是符合既定配方和生產(chǎn)工藝的規(guī)格化品，其組成分、比例及純度應(yīng)與實際產(chǎn)品相同。 介質(zhì)的選擇：介質(zhì)是幫助受試物進(jìn)入試驗系統(tǒng)或動體內(nèi)的重要媒介。所選溶劑、乳化劑或助懸劑本身應(yīng)不產(chǎn)生毒性作用，與受試物各成分之間不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，且保持其穩(wěn)定性。 人體推薦量較大的受試物的處理：如受試物推薦量較大，在按其設(shè)計驗劑量時，往往會超過動物的最大灌胃劑量或超過摻入飼料中規(guī)定限（ 10％重量），