不同濃度6-ba、ga3對農(nóng)桿菌介導的大豆子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化率的影響-文庫吧資料
2024-09-10 14:07本頁面
【正文】 輝等 . 農(nóng)桿菌介導大豆子葉節(jié)遺傳轉(zhuǎn)化的研究 . 作物學報 , 2020, 31(2) : 170176. [8] 林樹柱 ,曹越平 ,衛(wèi)志明等 . 6BA 誘導大豆子葉節(jié)和莖尖出芽的研究 . 上海交通大學學報 ( 農(nóng)業(yè)科學版 ) , 2020, 23( 2) : 138~ 142. [9] 王全偉 , 張海玲 , 白晶 , 徐香玲 .大豆科學 , 2020,27(2): 3640. [10] 劉北東 ,朱延明 ,李海明 .大豆子葉節(jié)再生影響因素的研究 .大豆科學 , 2020, 21(2):8892. [11] 周思軍 .大豆抗蟲基因轉(zhuǎn)移及其轉(zhuǎn)化系統(tǒng)優(yōu)化研究 [D].哈爾濱 : 東北農(nóng)業(yè)大學 ,2020. [12] 劉莉 ,趙桂蘭 .大豆子葉節(jié)組織培養(yǎng)再生研究［ J］ .吉林農(nóng)業(yè)科學 ,1999,24(5) : 1619. [13] 王升吉 ,吳元華 ,王洪巖 ,等． 大豆不同外植體組織培養(yǎng)及再生研究 [J］ .沈陽農(nóng)業(yè)大學學報 ,1999,30(3) :255259. [14] 劉文萍 ,盧淑雯 ,劉建新等 .農(nóng)桿菌介導的 BnCS 基因?qū)S瓜遺傳轉(zhuǎn)化研究［ J］ .北方園藝 ,2020(1) : 2022. [15] 唐曉飛 .農(nóng)桿菌介導 hsf8 基因轉(zhuǎn)化大豆的研究［ D］ . 哈爾濱 :東北農(nóng)業(yè)大學， 2020:23. [16] 汲逢源 ,王戈亮 , 許亦農(nóng) . 抗氧化劑對農(nóng)桿菌介導的大豆下胚軸 GUS 基因瞬時表達的影響 [J].植物生態(tài)學報 , 2020, 30( 2) : 330334. [17] 李明春 ,蔡易 ,趙桂蘭等 .改良大豆子葉節(jié)再生體系的研究 .作物學報 , 2020, 32(2):223 227. STUDY ON THE DIFFERENT CONCENTRATIONS OF 6 BA AND GA3 ON AGROBACTERIUM MEDIATED SOYBEANS COTYLEDON SECTION GENETIC CONVERSION RATE ZHAI ZhaoJing Abstract:Soy is now recognized as one of the more difficult for geic transformation of plants, because of soybean regeneration rate is low, the high efficient regeneration system of soybean is the foundation of soybean geic transformation is established. Using Agrobacterium infect soybean cotyledon section, the research in coculture and bud induction phase, training time, 6 BA, GA3, the different hormone levels, effect on the adventitious bud germination rate, the purpose is to improve the efficiency of soybean transformation, optimization of soybean geic transformation system, and gain a better, more efficient of herbicide resistance genes to carry strain of soybean plants. Key words: 6 BA。 篩選劑在實驗中的使用 本研究利用農(nóng)桿菌介導的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，對共培養(yǎng)、叢生芽、芽伸長等組織配養(yǎng)條件和植物激素配比進行優(yōu)化分析，旨在探索提高大豆遺傳轉(zhuǎn)化效率的可能性，為建立高效的大豆遺傳轉(zhuǎn)化體系提供理論依據(jù)。 基因型對大豆子葉節(jié)叢生芽誘導率的影響 選擇一個合適的受體基因型，一方面應(yīng)考慮到所選擇的基因 型的農(nóng)藝性狀，另一方面取決于該基因型組培時的再生能力，最后還要通過實驗檢測它被農(nóng)桿菌侵染后的再生能力。 叢生芽階段 各因素 對叢生芽誘導率的影響 在實驗過程叢生芽階段培養(yǎng)時，愈傷組織易出現(xiàn)褐化，一般采用較嫩幼新生的外植體且適當降低培養(yǎng)基的濃度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱內(nèi)的光照，或適當微調(diào)底培養(yǎng)基的 PH。而叢生芽越多，芽之間的抑制作用也就越強，導致叢生芽不易生長，也沒用 明顯的主莖。 圖 8 篩選劑濃度對比 3 討論 共培養(yǎng)階段 6BA、 GA3 濃度對叢生芽誘導率的影響 在遺傳轉(zhuǎn)化再生體系中，共培養(yǎng)階段培養(yǎng)基中添加激素種類和濃度時影響叢生芽分化和植株再生的重要因素。 不同濃度篩選劑對大豆生長各階段的影響 如圖 8 所示，大豆生長各階段時加入不同濃度篩選劑對大豆的生長狀態(tài)有很大影響，當篩選劑濃度過大時，大 量子葉節(jié)過早發(fā)黃老化，不利于目的子葉節(jié)的收獲。 結(jié)果表明，在生根階段用 明顯，但一般采用前者，即向培養(yǎng)基中直接添加 。 圖 7 芽伸長情況時的圖片 0%10%20%30%40%50%60%黑農(nóng)3 7 黑農(nóng)6 4 黑農(nóng)4 4 小粒豆GA3 GA3+IAAA B C D 生根階段 方法比較 實驗采取了 2 種不同的生根方法， 第一 種是直接向培養(yǎng)基中添加 ；第二 種是 用 。 IAA 對芽伸長也有一定的促進作用，當同時添加適量濃度 GA3 和 IAA 時，兩種激素相互作用促進芽的生長。 培養(yǎng)基如下， 第一組：不加IAA， 250mg/L GA3， 100mg/L BIA；第二組： 200mg/L IAA， 100mg/L GA3， 200mg/L BIA。 另外，叢生芽誘導階段培養(yǎng)基中水分不可過大，否則將會抑制叢生芽的生長。產(chǎn)生褐化的原因有很多，可能是培養(yǎng)的外植體老化）、外植體傷口太大、消毒時間過長或是消毒液沒有沖洗干凈、培養(yǎng)溫度過高、季節(jié)原因、培養(yǎng)時間過長等；產(chǎn)生玻璃化的實質(zhì)是植物 細胞分裂與體積增大的速度超過了干物質(zhì)生產(chǎn)和積累的速度，植物只好用水分來充漲體積，從而表現(xiàn)玻璃化。 圖 4 芽誘導階段培養(yǎng)基中激素配比圖片 0黑
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