20xx年醫(yī)學(xué)專題—生化反應(yīng)器-第五章-動植物細(xì)胞培養(yǎng)動力學(xué)(參考版)
2024-11-15 13:21本頁面
【正文】 5．2．2．2 動物細(xì)胞培養(yǎng)方法,第四十八頁，共四十八頁。5．2．2．1 植物細(xì)胞的培養(yǎng)操作(cāozu242。5．2．2 動植物細(xì)胞的培養(yǎng)操作(cāozu242。5．2．1．1 碳源與生長模型。ir243。,第四十七頁，共四十八頁。 2．植物細(xì)胞培養(yǎng)的基本技術(shù)包括哪幾方面內(nèi)容? 3．影響植物次生代謝產(chǎn)物積累的因素有哪些? 4．試比較植物細(xì)胞培養(yǎng)中采用(cǎiy242。,第四十六頁，共四十八頁。itǐ)培養(yǎng)系統(tǒng)。,從操作方式看，貼壁依賴性細(xì)胞的培養(yǎng)可采用分批、半連續(xù)和連續(xù)等多種方 法，其原理與植物細(xì)胞培養(yǎng)的類同。相反，冷卻迅速的瓊脂凝膠不能支持細(xì)胞在其表面附著生長。例如，瓊脂糖是一種天然材質(zhì)，如果注意控制熔融后的冷卻速率，使凝膠緩慢生成，則瓊脂糖鏈形成纖維狀結(jié)構(gòu)。動物細(xì)胞能否在載體表面附著生長以達(dá)到擴(kuò)展成一單層的目的，取決于細(xì)胞的特性、載體的理化性質(zhì)及培養(yǎng)(p233。iyǎng)有時(shí)又稱為單層培養(yǎng)(p233。,第四十四頁，共四十八頁。lǜ)膜將細(xì)胞加以固定。,第四十三頁，共四十八頁。,采用這種方法后，從產(chǎn)物開始分泌時(shí)起，便可用快速純化方法不斷地從流出培養(yǎng)基中收集目的產(chǎn)物。iyǎng)基的同時(shí)，連續(xù)等量排出用過的培養(yǎng)基，但不排出懸浮的細(xì)胞。iyǎng)法。iyǎng)多采用分批式操作方法，其原理與植物細(xì)胞的類同。iyǎng)基容易形成過多泡沫，這都增加了反應(yīng)器操作的難度。iyǎng)的動物細(xì)胞是一類能無限繁殖的細(xì)胞，這樣的細(xì)胞又稱為確立細(xì)胞株。,第四十一頁，共四十八頁。)細(xì)胞(包括雜交瘤細(xì)胞)和某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞屬于這一類型，其可采用類似微生物培養(yǎng)的方法進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。ngw249。,第四十頁，共四十八頁。)植物細(xì)胞生長速率慢，維持長時(shí)間的無菌狀態(tài)是需要解決的基本技術(shù)問題。,一般連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)率高于分批培養(yǎng)的，但由于(y243。,第三十八頁，共四十八頁。,(3)連續(xù)培養(yǎng) 由于連續(xù)培養(yǎng)可以保證細(xì)胞生長環(huán)境長時(shí)間的穩(wěn)定，因此，在研究細(xì)胞的生理或代謝等方面時(shí)，連續(xù)培養(yǎng)是一種重要的培養(yǎng)方法。有如下關(guān)系：,第三十五頁，共四十八頁。D39。(等于取出量)，則比值F39。,第三十四頁，共四十八頁。藤田開 發(fā)的二步培養(yǎng)法是分批培養(yǎng)法的一種變形，同時(shí)使用兩個(gè)反應(yīng)器，第一個(gè)反應(yīng)器主要是為大量培養(yǎng)細(xì)胞，第二個(gè)反應(yīng)器是為增加目的產(chǎn)物的含量。,目前，無論在實(shí)驗(yàn)室還是在工廠中，大至20t罐，廣泛采用(cǎiy242。,第三十二頁，共四十八頁。omǔ)比生 長速率的l／10。,表5—2表示某些植物細(xì)胞分批培養(yǎng)中對數(shù)生長期的u與微生物的比較。分批培養(yǎng)中，植物細(xì)胞的生長曲線一般呈s形，可明顯觀察出誘導(dǎo)期、對數(shù)生長期、減速期、靜止期和衰亡期(死亡期)，但是與細(xì)菌和酵母菌的培養(yǎng)相比(xiānɡ bǐ)，即使是生長速率快的煙草細(xì)胞，分批培養(yǎng)時(shí)間(一個(gè)周期)也要6d以上，這也就是前面所說的植物細(xì)胞培養(yǎng)的先天不足——生長緩慢。,(1)分批培養(yǎng) 植物細(xì)胞的分批培養(yǎng)與微生物的分批培養(yǎng)類同。下面以懸浮培養(yǎng)法(分批、反復(fù)分批和連續(xù)培養(yǎng))為例進(jìn)行介紹。d236。,5．2．2 動植物細(xì)胞(x236。從已有的實(shí)例看，又多屬于定性探討。,綜上所述，動植物細(xì)胞生長動力學(xué)的研究，在很大程度上是借鑒了微生物反應(yīng) 動力學(xué)理論(lǐl249。)生長期，細(xì)胞的RNA含量顯著增大。吉田等在進(jìn)行人參細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)，在對數(shù)(du236。,5．2．1．3 胞內(nèi)物質(zhì)與
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