epo工程細(xì)胞培養(yǎng)方法和反應(yīng)器(參考版)
2025-01-28 10:48本頁(yè)面
【正文】 經(jīng)過(guò)多批培養(yǎng)和生長(zhǎng) HuEPO的結(jié)果表明 ,自行配制的 SFMp培養(yǎng)基在該反應(yīng)器能有效地維持細(xì)胞生長(zhǎng)和生產(chǎn) rHuEPO。觀察了反應(yīng)器的乳酸和氨的含量 ,其結(jié)果表明乳酸和氨含量分別低于 30 107/ml以上 ,每次可收無(wú)血清培養(yǎng)上清 80~87L。0mg/L/d,比滾瓶的產(chǎn)率增加 12~14倍。使用填充床生物反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞 ,能維持培養(yǎng) 20~25d,rHuEPO表達(dá)水平達(dá) 12~28這種培養(yǎng)較傳統(tǒng)的單層細(xì)胞培養(yǎng) ,面積大大增加 ,將這種微載體在流化床式、固定床式反應(yīng)器中進(jìn)行培養(yǎng) ,則可獲得比原來(lái)多 20~50倍的高密度細(xì)胞 . 14 常用的微載體 15 Cytodex微載體上細(xì)胞生長(zhǎng)情況 16 17 18 19 20 21 Cytopore的性質(zhì) 22 動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器 23 常見(jiàn)動(dòng)物細(xì)胞生物反應(yīng)器類型 ? 氣升式 (airlift)生物反應(yīng)器 ? 中空纖維管 (hollowfiber)生物反應(yīng)器 ? 流化床 (fluidizbed)生物反應(yīng)器 (FBR) ? 攪拌罐 (stirtank)生物反應(yīng)器 (STR) ? 固定床 (fixedbed)生物反應(yīng)器 ? 填充床 (packedbed)生物反應(yīng)器 24 填充床生物反應(yīng)器 動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)需要合適的生物反應(yīng)器 . 目前國(guó)內(nèi)用的比較多的適合CHO細(xì)胞生長(zhǎng)并能高效表達(dá)產(chǎn)物的反應(yīng)器是填充床式生物反應(yīng)器 ,其中比較有名的是美國(guó) NBS公司生產(chǎn)的 Celligen系列 . 25 Celligen plus Celligen 310 26 Cellgen 系列生物反應(yīng)器的特點(diǎn) 1. 適合貼壁培養(yǎng)細(xì)胞和懸浮細(xì)胞 ,適合各種動(dòng)物細(xì)胞 ,昆蟲細(xì)胞和植物細(xì)胞等 2. 灌流式的培養(yǎng)過(guò)程 3. 低（無(wú)）剪切力攪拌 ,無(wú)氣泡通氣； 4. 特殊的貼壁載體 ,比表面積大 ,靜止培
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