固定化木瓜蛋白酶與溶液酶性質(zhì)的比較1(參考版)
2024-10-03 05:44本頁(yè)面
【正文】 固定化酶與溶液酶最適PH的比較 實(shí)驗(yàn)方法木瓜蛋白酶 酪蛋白 5mg/ml三氯乙酸 15%戊二醛 5%磷酸緩沖液 （ mol/、 mmol/ mmol/L EDTA,） g木瓜蛋白酶(), mol/L、 mL,過(guò)濾,，用比色法測(cè)定酶活力。（操作過(guò)程見表2）表2 木瓜蛋白酶溶液酶加樣順序 管號(hào)0 （對(duì)照）1 （樣品）2( 樣品 )激活劑（ ml ）恒溫預(yù)熱 5 分鐘固定化酶（g）酪蛋白（ ml ）0恒溫水浴 10 分鐘15%TCA （ ml ）酪蛋白（ ml ）00搖勻，25℃靜置 30 分鐘過(guò)濾OD 280nm 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表3 不同溫度下，固定化木瓜蛋白酶與其溶液酶活性酶組溫度溶液酶固定化酶第一組第二組第三組平均值第一組第二組第三組平均值30405060708090100根據(jù)三次檢測(cè)的平均值，繪圖如下（見圖1）固定化酶與游離酶最適溫度的選擇 圖1 結(jié)果分析檢測(cè)結(jié)果如圖1所示，可見在同一反應(yīng)體系中，溶液酶的最適反應(yīng)溫度為60℃，固定化酶為90℃?；旌暇鶆蚝?， 25℃下放靜置5 min后,漏斗過(guò)濾,濾液于280 nm波長(zhǎng)下測(cè)定光吸收值（操作過(guò)程見表1）表1 木瓜蛋白酶溶液酶加樣順序 管號(hào)0 （對(duì)照）1 （樣品）2( 樣品 )酶液（ ml ）激活劑（ ml ）恒溫預(yù)熱 10 分鐘酪蛋白（ ml ）0恒溫水浴 10 分鐘15%TCA （ ml ）酪蛋白（ ml ）00搖勻，靜置 10 分鐘過(guò)濾OD 280nm mL mol/L， (含30m mol/,)，分別于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃預(yù)熱5 min， mL 酪蛋白溶液。
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