20xx人教版高中生物選修3專題1第2節(jié)基因工程的基本操作程序(參考版)
2024-11-20 22:31本頁面
【正文】 [解析 ] 由于 mRNA是以 DNA一條鏈為模板轉錄出來的 ，所以 A、 C可以使用同一種探針篩選含目的基因的菌株 。 (2)B過程需要的酶是 ________； A、 C過程中 ________(可以 /不可以 )使用同一種探針篩選含目的基因的菌株 。 下圖是獲取植酸酶基因的流程 。 植酸易同鐵 、 鈣等金屬離子或蛋白質結合排出體外 ， 是多種動物的抗營養(yǎng)因子；同時 ， 排出的大量磷進入水體易引起水華 。 通過細胞增殖而構成各個片段的無性繁殖系 。 (3)目的基因是基因工程操作中需要的外源基因 ， 它是編碼某種蛋白質的結構基因 ， 如生物的抗逆性基因 、 抗蟲基因等 。 如果基因文庫中含有一種生物的部分基因 ， 這個基因文庫就叫做 cDNA文庫 。 建立基因文庫的目的就是為獲得大量的目的基因作準備 。 下列各項中能說明目的基因完成了在受體細胞中表達的是 ( ) A． 棉花二倍體細胞中檢測到細菌的抗蟲基因 B． 大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其 mRNA C． 山羊乳腺細胞中檢測到人生長激素 DNA序列 D． 酵母菌細胞中提取到人干擾素蛋白 [答案 ] D [ 解析 ] 目的基因表達的依據― →得到相應的蛋白質― → D 項正確 ??????A 、 C 項 ― →完成目的基因的導入B 項 ― →完成目的基因的轉錄― → 都未表達 思 維 升 華 一 、 易混淆概念辨析 1． 基因 、 基因文庫 、 目的基因 (1)基因是有遺傳效應的 DNA片段 ， 是控制性狀的遺傳物質的基本結構和功能單位 ， 基因的脫氧核苷酸序列代表遺傳信息 。 目的基因的檢測首先要檢測轉基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因 ， 方法是用 DNA分子雜交技術 ， 使 DNA探針與基因組 DNA雜交；其次檢測目的基因是否轉錄出了 mRNA， 方法是用基因探針與 mRNA雜交；最后檢測目的基因是否翻譯成了蛋白質 ，方法是用抗原 —抗體雜交 。 目的基因導入受體細胞后 ， 是否可以穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性 ， 只有通過鑒定和檢測才能知道 。 DNA分子雜交是指 DNA片段在適合的條件下能和與之互補的另一個片段結合 。 由于各種因素的影響 ， 有時還需要采取一定的措施去促使目的基因的表達 。 目的基因的檢測內容和方法的比較如下表： 類型 步驟 檢測內容 方法 結果顯示 分子 檢測 第一步 目的基因是否進入受體細胞 DNA分子雜交(DNA和 DNA之間 ) 是否成功顯 示出雜交帶 第二步 目的基因是否轉錄出 mRNA 分子雜交技術(DNA和 mRNA之間 ) 同上 第三步 目的基因是否翻譯出蛋白質 抗原 —抗體雜交 同上 個體 水平 鑒定 包括做抗蟲、抗病的接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產品與天然產品的功能進行活性比較，以確定功能是否相同 知識貼士： ① 目的基因在受體細胞中的存在與表達是有區(qū)別的 。 四 、 目的基因的檢測與鑒定 目的基因導入受體細胞后 ， 是否可以穩(wěn)定維持和表達其中遺傳特性 ， 只有通過檢測與鑒定才能知道 。 [答案 ] C (2020 基因工程的操作步驟是：目的基因的獲取 ―→ 基因表達載體的構建 ―→ 目的基因導入受體細胞 ―→ 目的基因的檢測和鑒定 。 ② 以上介紹的幾種方法 ， 在導入受體細胞之前 ， 都必須進行目的基因表達載體的構建 ， 也就是說導入受體細胞的必須是重組 DNA分子 ， 而不能直接導入目的基因 。 生物種類 植物細胞 動物細胞 微生物細胞 常用方法 農桿菌轉化法 顯微注射法 Ca2＋ 處理法 受體細胞 體細胞 受精卵 原核細胞 轉化過程 目的基因插入 Ti質粒的 T－ DNA上 → 農桿菌 → 導入植物細胞 → 融合到受體細胞的DNA→ 表達 目的基因表達載體提純 → 取卵 (受精卵 )→ 顯微注射 → 受精卵發(fā)育 → 獲得具有新性狀的動物 Ca2＋ 處理細胞→ 感受態(tài)細胞 →表達載體與感受態(tài)細胞混合 → 感受態(tài)細胞吸收DNA分子 知識貼士： ① 農桿菌是一種在土壤中生活的微生物 ， 能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物 ， 而對大多數(shù)單子葉植物沒有感染力 。 將目的基因導入受體細胞的方法很多 ， 應具體情況具體分析 。 三 、 將目的基因導入受體細胞 將目的基因導入受體細胞是實施基因工程的第三步 。 [答案 ] (1)0、 2 (2)高 (3)SmaⅠ 會破壞質粒的抗生素抗性基因 、 外源 DNA中的目的基因 (4)質粒和含目的基因的外源 DNA片段自身環(huán)化 (5)DNA連接 (6)鑒別和篩選含有目的基因的細胞 (2020(5)DNA連接酶可以連接具有能夠互補配對黏性末端的 DNA片段 。 (4)若用同種限制性內切酶切割質粒和外源 DNA中的目的基因 ， 因為兩端的黏性末端能夠互補配對 ， 會出現(xiàn)自身環(huán)化的情況 。 (2)因為 SmaⅠ 識別序列中均為 G—
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