第三章酶的生產(chǎn)(參考版)
2025-01-08 13:41本頁面
【正文】 （ 1）形態(tài)上分 : 固體 液體 （ 2）用途：工業(yè)酶制劑、飼料酶制劑、食品酶制劑、醫(yī)藥酶制劑和洗滌酶制劑 （ 3）組成：?jiǎn)我幻钢苿┖蛷?fù)合酶制劑 （ 4）含量：普通酶制劑和濃縮酶制劑 （ 5）來源： （ 6）生產(chǎn)加工方法：游離酶制劑、固定化酶制劑、酶試紙、酶電極等退出二、工業(yè)酶制劑的要求，有利生物催化的專一性，操作穩(wěn)定性和儲(chǔ)存穩(wěn)定性（固定化酶）退出三、酶的保存（一）失活機(jī)理（酶空間結(jié)構(gòu)改變） 變性劑、去污劑、巰基試劑 顆粒狀退出（二）酶活性的保護(hù) 無機(jī)鹽（硫酸銨、氯化鈉）、糖（蔗糖、乳糖等）、多元醇（山梨醇、甘油等）或高分子聚合物（聚乙二醇）。退出酶的比活力 指每 mg酶蛋白（或每 mg蛋白氨）所含的酶活力單位數(shù)即：比活力 =活力單位數(shù) /酶蛋白（氮） mg 表示酶制劑的純度，比活力愈高，酶愈純。 IU： umol/min Kat： mol/s 1 Kat=6107 IU Kcat,單位 1/s退出（二）酶活力單位及比活力用酶催化的反應(yīng)速度來表示酶活力，即用單位時(shí)間內(nèi)，單位體積中底物的減少量或產(chǎn)物增加量來表示。酶活力退出③ 提取方法的經(jīng)濟(jì)性和可分析性 盡量減少添加劑的使用 盡早使用高效分離方法，將昂貴、費(fèi)時(shí)的分離方法放在最后階段。 建立一個(gè)可靠和快速、易行的測(cè)定酶活方法 物理因素、化學(xué)因素和生物因素導(dǎo)致酶失活（經(jīng)濟(jì)、宜行）： 純化倍數(shù)、酶活回收率和重現(xiàn)性 （衡量?jī)?yōu)劣） 經(jīng)濟(jì)、可靠，建立靈敏、快速、特異、精確的檢測(cè)（酶活和蛋白質(zhì)的含量）手段。 前者給純化帶來了困難，而后者卻迅速找出純化過程的關(guān)鍵所在。退出兩個(gè)基本環(huán)節(jié)：分離和純化 分離：將酶從原料中抽提出來，并盡可能少引入雜質(zhì)，得到粗酶液 純化：將酶和雜質(zhì)中分離開來，或者有選擇地將酶從包含雜質(zhì)中分離出來，得到一定純度的酶。③ 降低產(chǎn)酶溫度。退出目的：提高產(chǎn)酶率和縮短發(fā)酵周期最理想的合成模式：延續(xù)合成型策略措施：① 菌種選育：提高 mRNA的穩(wěn)定性，解除分解代謝物阻遏和反饋?zhàn)瓒簟蠛铣尚停?盡量減少甚至解除分解代謝物阻遏，使 酶的合成提早開始。細(xì)胞開始生長(zhǎng)就有酶的產(chǎn)生，直至細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后，酶還可以繼續(xù)生成一段時(shí)間。dX/dt （解除阻遏后）v 滯后合成型 (+) 分解代謝物阻遏 dP/dt=βdX/dt＋ βv mRNA穩(wěn)定性 代謝調(diào)節(jié) 產(chǎn)物生成模型v 同步合成型 () 誘導(dǎo) dP/dt=α 所對(duì)應(yīng)的 mRNA穩(wěn)定性高。許多水解酶的生物合成都屬于這一類型 。 所對(duì)應(yīng)的 mRNA相當(dāng)穩(wěn)定。 枯草桿菌堿性磷酸酶合成曲線 （又稱延續(xù)合成型） 酶的合成在細(xì)胞的生長(zhǎng)階段開始，在細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)入平衡期后，酶還可以延續(xù)合成較長(zhǎng)一段時(shí)間。特點(diǎn)： 酶的合成受產(chǎn)物的反饋?zhàn)瓒艋蚍纸獯x物阻遏。 當(dāng)去除誘導(dǎo)物、細(xì)胞進(jìn)入平衡期后，酶的合成立即停止，表明這類酶所對(duì)應(yīng)的 mRNA很不穩(wěn)定。 流加和連續(xù)培養(yǎng)退出（ 3） .其他 促進(jìn)分泌：添加表面活性劑 離子型 對(duì)細(xì)胞有毒害作用 表面活性劑 T
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