【正文】 ? 通過(guò)蛋白質(zhì)修飾（磷酸化、乙?；┒せ睿~(yú)精蛋白、晶體蛋白。 ? 特定的亞細(xì)胞定位，膜蛋白、核蛋白等 。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University 2. 秀麗隱桿線蟲(chóng)發(fā)育的翻譯調(diào)控 —— mRNA 3’UTR調(diào)控配子的決定 TRA2是卵子發(fā)育所必需的一種蛋白質(zhì)，如果 tra2 mRNA翻譯活性被抑制，生殖細(xì)胞 → 精子； tra2 mRNA的 3’UTR區(qū)含有 2個(gè)區(qū)域，它們可能結(jié)合在幼蟲(chóng)精子發(fā)生時(shí)合成的抑制蛋白；如果這兩個(gè)區(qū)域突變，精子不能形成 3’ UTR對(duì)發(fā)育的時(shí)空調(diào)控作用： 調(diào)控配子的決定； 調(diào)控許多卵母細(xì)胞貯存 mRNA的翻譯活動(dòng)； 調(diào)控一些 mRNA在卵母細(xì)胞中的定位； 參與某些組織分化的維持 FEM3是精子發(fā)育所必需的一種蛋白質(zhì)，如果fem3 mRNA翻譯活性被抑制，生殖細(xì)胞 → 卵子； 在幼蟲(chóng)四齡時(shí)， fem3 mRNA 3’UTR區(qū)結(jié)合翻譯抑制因子（ TRA2）， 70 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University 翻譯后水平上的調(diào)控 ? 一條長(zhǎng)鏈被剪切并除去部分而激活 , 胰島素 。 在減數(shù)成熟分裂前不表達(dá)的 mRNA的 poly(A)較短 (1590A), 但其 3`UTR具有胞質(zhì)多聚腺苷酸化信號(hào)序列 (CPEs)(UUUUAU in mice and frogs)。受精后pH升高的作用 可能包括去除 mRNA的封閉蛋白和激活翻譯起始因子。 ? Poly(A)對(duì)翻譯的調(diào)控： 卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟前后， mRNA polyA的長(zhǎng)度發(fā)生變化（由 3’UTR調(diào)控）。 ? mRNA sequester（隱蔽） : 指 mRNA被阻隔于蛋白合成裝置。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University 卵母細(xì)胞中翻譯調(diào)控機(jī)制的假說(shuō) ? mRNA masking（掩蔽） : mRNA與其它蛋白結(jié)合成 ribonucleoprotein (RNP) plex,阻止與核糖體結(jié)合；卵成熟或受精后，離子強(qiáng)度改變或蛋白磷酸化等導(dǎo)致 RNP不穩(wěn)定 /解體，翻譯得以進(jìn)行。 短壽命 mRNA的 3’UTR通常含有一個(gè)或多個(gè) AU富集區(qū) ，其作用是促進(jìn) Poly(A)降解。 ?當(dāng) 外來(lái)抗原 與 淋巴結(jié) 或 脾 中的淋巴細(xì)胞膜上抗原受體結(jié)合后通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)控基因表達(dá)，使細(xì)胞分裂和進(jìn)一步分化。 ?在與抗原接觸之前，處于休止期的 B淋巴細(xì)胞就合成免疫球蛋白分子，但并不分泌。 ?能夠與激素受體蛋白特異性結(jié)合的 DNA序列稱為激素效應(yīng)元件，它們既可以是增強(qiáng)子，也可以是啟動(dòng)子。 ?具有轉(zhuǎn)錄因子活性的類固醇激素特異性受體以非活性狀態(tài)存在時(shí)與一種熱體克蛋白結(jié)合，當(dāng)激素與受體蛋白結(jié)合后熱體克蛋白脫離，同時(shí)受體構(gòu)象發(fā)生改變。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University (四 )激素應(yīng)答成分 ?在發(fā)育過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)基因表達(dá)的協(xié)同調(diào)節(jié)現(xiàn)象。 ?通用轉(zhuǎn)錄因子 ：指與啟動(dòng)子 TATA框序列結(jié)合的蛋白質(zhì)，他們與 RNA聚合酶 II共同裝配成為轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物，以啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。通過(guò)相互作用使任何一種細(xì)胞中只有很少的一部分啟動(dòng)子發(fā)生轉(zhuǎn)錄。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University 脂肪體 卵巢組織 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University （三）轉(zhuǎn)錄因子 ?轉(zhuǎn)錄因子是 基因調(diào)控的反式作用因子 ，是能與啟動(dòng)子和增強(qiáng)子結(jié)合的蛋白質(zhì)。 ?說(shuō)明 卵黃蛋白基因有兩個(gè)增強(qiáng)子 ，而且都位于 5’末端，分別負(fù)責(zé)在卵巢和在脂肪體中的轉(zhuǎn)錄，使兩個(gè)基因在兩種細(xì)胞中正常轉(zhuǎn)錄。 ?卵黃蛋白基因僅在成體的雌性果蠅中表達(dá)。 ?在卵巢和脂肪體中卵黃蛋白基因都轉(zhuǎn)錄，但是他們能用限制性內(nèi)切酶分解，在共同的 5’末端分開(kāi)。 受體細(xì)胞 外分泌蛋白基因 5’末端旁序列 + cat 內(nèi)分泌蛋白基因 5’末端旁序列 + cat 卵巢細(xì)胞 不表達(dá) 不表達(dá) 分泌胰島素 的胰腺細(xì)胞系 不表達(dá) 表達(dá) 產(chǎn)生外分泌蛋 白的胰腺細(xì)胞系 表達(dá) 不表達(dá) 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University (4)卵黃蛋白增強(qiáng)子 ?果蠅卵黃蛋白是在雌性成體果蠅的特殊細(xì)胞中才大量合成的一種蛋白。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University (3)胰腺增強(qiáng)子 ? Walker等 (1983)分別構(gòu)建這些基因 5’末端旁序列和 cat的重組基因，再將不同的重組基因分別轉(zhuǎn)人 3種受體細(xì)胞 ： ?①不產(chǎn)生胰島素和胰凝乳蛋白酶的卵巢細(xì)胞； ?②分泌胰島素的胰腺細(xì)胞系； ?③一種產(chǎn)生外分泌蛋白的胰腺細(xì)胞系。 ?利用報(bào)道基因可對(duì)某一特定增強(qiáng)子的功能進(jìn)行研究。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University (3)胰腺增強(qiáng)子 ?有時(shí)基因的活性在不同類型的相鄰細(xì)胞中由不同的增強(qiáng)子所調(diào)控。如果 缺失此增強(qiáng)子區(qū)將引起所有 β珠蛋白基因家族的基因沉默 。 ?其中一種增強(qiáng)子位子 β珠蛋白基因的第三個(gè)內(nèi)含子序列內(nèi)，其作用使 β珠蛋白基因的轉(zhuǎn)錄只能在紅細(xì)跑發(fā)生 。 ?通常 γ珠蛋白基因在 人胚胎時(shí)期轉(zhuǎn)錄 ，如果把含有 β珠蛋白基因的時(shí)間特異性增強(qiáng)子的 DNA片段移到 γ珠蛋白基因的附近，在 β珠蛋白基因的時(shí)間特異性增強(qiáng)子的作用下，γ珠蛋白基因 可在成體中表達(dá) 。兩棲類的這種增強(qiáng)子位于 MBT基因閱讀框 5’末端上游約 700bp。 ?在 兩棲類 胚胎發(fā)育中存在最典型的基因活性的時(shí)間開(kāi)關(guān)，即 囊胚中期轉(zhuǎn)換 (MBT)。 ?根據(jù)增強(qiáng)子的 功能特征 可以將其分為以下幾類。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University 增強(qiáng)子的分類 ?同一增強(qiáng)子在有的細(xì)胞中是 順式調(diào)控元件 ，但在其他細(xì)胞中可能是 沉默子 ，這是 由細(xì)胞中其他轉(zhuǎn)錄因子決定 的。 ?有一類增強(qiáng)子對(duì)基因的轉(zhuǎn)錄起抑制作用，稱為 沉默子(suencer)。 ?增強(qiáng)子的效應(yīng)很明顯，一般能使基因轉(zhuǎn)錄頻率增加 10～200倍，有的甚至可以高達(dá)上千倍。增強(qiáng)子是通過(guò)啟動(dòng)子來(lái)增加轉(zhuǎn)錄的。 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University 上海海洋大學(xué) Shanghai Ocean University ? RNA聚合酶 Ⅰ 和 RNA聚合酶 Ⅲ 分別負(fù)責(zé) 18S、 28S核糖體RNA和 5S核糖體 RNA， tRNA基因的轉(zhuǎn)錄，也需要多種蛋白因子參與，這些轉(zhuǎn)錄因子也必須與啟動(dòng)子結(jié)合。 ?已經(jīng)經(jīng)過(guò)鑒定的 普通轉(zhuǎn)錄因子 有 TFⅡ D、 TFⅡ B、 TFⅡ F、TFⅡ A等。 ?從不同動(dòng)物細(xì)胞，甚至從酵母細(xì)胞分離的基本轉(zhuǎn)錄因子具有相似的活性。 ?其中 RNA聚合酶 Ⅱ 負(fù)責(zé)作用于多種基因的轉(zhuǎn)錄。在轉(zhuǎn)錄開(kāi)始之前，首先要形成 RNA聚合酶和啟動(dòng)子的 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物 。 ? TATA框的主要作用 ：是使轉(zhuǎn)錄精確地從起始位點(diǎn)開(kāi)始，其他的上游啟動(dòng)子元件： 主要調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始頻率和維持基因轉(zhuǎn)錄，特別是 CAAT框的作用相對(duì)較大。一個(gè)保守性較高且富含 TA的序列，又稱為