【文章內(nèi)容簡介】 TFⅢ A分子與TFⅢ C結(jié)合形成 TFⅢ ATFⅢ C 復合物 。 ?當 RNA聚合酶 Ⅲ 與該復合物結(jié)合時 5SrRNA的基因的轉(zhuǎn)錄即發(fā)生 。 上海海洋大學 Shanghai Ocean University ? Switch gene: 發(fā)育中可以決定細胞向兩種不同命運分化的基因（主基因的表達決定） ?果蠅腹中線外胚層細胞具有分化成為上皮細胞或神經(jīng)母細胞的雙重潛能； notch轉(zhuǎn)錄缺乏時，腹中線所有細胞都分化成神經(jīng)母細胞，胚胎不能正常發(fā)育； notch 控制分化成皮膚細胞和神經(jīng)母細胞 ? myod1轉(zhuǎn)錄子是肌細胞分化的主要開關基因，也是肌母細胞決定子。將其通過病毒載體轉(zhuǎn)染其它細胞（如色素細胞、神經(jīng)細胞、脂肪細胞、肝細胞等），可使它們轉(zhuǎn)分化為肌細胞。 (三 )轉(zhuǎn)錄調(diào)控的 “ 開關基因 ” (switch gene) 上海海洋大學 Shanghai Ocean University 三、差異基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控機制 ?真核生物基因的結(jié)構 ： ? (一 )外顯子與內(nèi)含子 ?真核生物的基因主要由 兩種 DNA序列 組成：一種是蛋白質(zhì)編碼序列稱為 外顯子 (exon)，另一種是非蛋白質(zhì)編碼序列稱為 內(nèi)含子 (intron)。 ?編碼一個蛋白質(zhì)的序列常以 外顯子和內(nèi)含子鑲嵌排列的方式存在 。不同基因具有內(nèi)含子的數(shù)目和內(nèi)含子的長度差異很大。 ?真核生物的基因還包括 5’和 3’末端長度不等的特異性序列，這些序列雖然 不編碼氨基酸 ，但在 基因表達的過程中起重要作用 。 上海海洋大學 Shanghai Ocean University 人 β珠蛋白基因的 10個區(qū)域 ?① 啟動子區(qū) ：啟動子區(qū)位于轉(zhuǎn)錄起始點上游 95 26bp，由兩個上游啟動子成分和 TATA盒組成。這個區(qū)域負責與RNA聚合酶結(jié)合，同時與以后的轉(zhuǎn)錄起始有關。 ?② ACATTG序列 ：該序列位于 RNA的 5’末端，又稱為帽子序列，是轉(zhuǎn)錄的起始點，在轉(zhuǎn)錄后帽子序列將被修飾，這段序列在不同的基因中有差異。 ?③ 翻譯起始密碼 ATG:該密碼子位于轉(zhuǎn)錄起始點后 50bp處，在轉(zhuǎn)錄的起始點和翻譯起始點間的這段序列稱為前導序列，其長度在不同基因中差異很大。由前導序列決定翻譯的速率。 ① ① ① ② ③ 上海海洋大學 Shanghai Ocean University 人 β珠蛋白基因的 10個區(qū)域 ?④ 第一外顯子 ：長 90bp，編碼人 β珠蛋白的 130個氨基酸。 ?⑤ 第一內(nèi)含子 ：長 130bp，是人 β珠蛋白的非編碼序列，但對于 RNA加工成為 mRNA并轉(zhuǎn)運到細胞核外具有重要作用。 ?⑥ 第二外顯子 ：長 222bp，編碼人 β珠蛋白的 31104個氨基酸。 ④ ⑤ ⑥ 上海海洋大學 Shanghai Ocean University 人 β珠蛋白基因的 10個區(qū)域 ?⑦ 第二內(nèi)含子 ：長 850bp，也是人 β珠蛋白的非編碼序列。 ?⑧ 第三外顯子 ：長 126bp，編碼人 β珠蛋白的 105146個氨基酸。 ?⑨ 翻譯終止密碼子 TAA ⑦ ⑧ ⑨ 上海海洋大學 Shanghai Ocean University 人 β珠蛋白基因的 10個區(qū)域 ?⑩ 3’末端非翻譯區(qū) ：這段序列雖然轉(zhuǎn)錄但是并不參與蛋白質(zhì)的翻譯。該區(qū)域包括 AATAAAA序列，此序列為轉(zhuǎn)錄的RNA產(chǎn)物在 3’末端增加 200300多聚核苷酸 [poly（ A） ]尾所必需。 poly（ A）尾插入進 RNA的位置是在 AAUAA下游約 20bp處，但是轉(zhuǎn)錄繼續(xù)進行超過 AATAAAA序列的位置，終止在大約 1000bp處。在 3’末端非翻譯區(qū)序列中，從AATAAAA位點后 600900bp具有增強子功能，對于成體紅細胞前體 β珠蛋白基因適時的和組織特異性的表達是必需的。 ⑩ 上海海洋大學 Shanghai Ocean University （二）啟動子和增強子 ?真核生物基因的轉(zhuǎn)錄起始和表達的調(diào)控依賴于 兩類調(diào)控元件 的相互作用，一類是 順式調(diào)節(jié)子 ，另一類是 反式調(diào)節(jié)蛋白 。 ?啟動子 和 增強子 都是順式調(diào)節(jié)子，它們能與特定功能基因連鎖 ， 作用于鄰近基因的表達 。 ?反式調(diào)節(jié)蛋白是 可溶性的分子 ，包括具有調(diào)控作用的 蛋白因子 和 RNA，它們可 作用于鄰近基因或其他基因 。 上海海洋大學 Shanghai Ocean University ?啟動子 ：是位于 轉(zhuǎn)錄起始位點上游 的特殊 DNA序列 。能被 RNA聚合酶 Ⅱ 識別和結(jié)合，對于 決定基因轉(zhuǎn)錄起始 和保證 DNA精確 ， 有效地轉(zhuǎn)錄 具有極其重要作用。 ?轉(zhuǎn)錄量相對較大的基因，啟動子都具有相似的結(jié)構。一個保守性較高且富含 TA的序列，又稱為 TATA框 ，位于 轉(zhuǎn)錄起始位點上游大約 30bp處 。另外在 TATA框的上游還有一個或多個上游啟動子元件，如： CCAAT(CAAT框）、GGGCGGG(GC序列）、 GGGAGAGGG和 ATGCAAAT序列。 ? TATA框的主要作用 ：是使轉(zhuǎn)錄精確地從起始位點開始，其他的上游啟動子元件： 主要調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始頻率和維持基因轉(zhuǎn)錄，特別是 CAAT框的作用相對較大。 上海海洋大學 Shanghai Ocean University ?基因轉(zhuǎn)錄還需要 RNA聚合酶與啟動子的相互作用。在轉(zhuǎn)錄開始之前，首先要形成 RNA聚合酶和啟動子的 轉(zhuǎn)錄起始復合物 。絕大多數(shù) 真核生物的細胞有 3種類型 RNA聚合酶 ，即RNA聚合酶 Ⅰ 、 RNA聚合酶 Ⅱ 和 RNA聚合酶 Ⅲ 。 ?其中 RNA聚合酶 Ⅱ 負責作用于多種基因的轉(zhuǎn)錄。在細胞核中存在一些 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白因子為 RNA聚合酶與啟動子結(jié)合所必需 ，如果 缺乏這些因子 ，純化的 RNA聚合酶 Ⅱ 并不能識別啟動子序列， 轉(zhuǎn)錄只能起始于任意位置。 ?從不同動物細胞，甚至從酵母細胞分離的基本轉(zhuǎn)錄因子具有相似的活性。 基本轉(zhuǎn)錄因子負責識別啟動子序列中 TATA框 ，并與 RNA聚合酶 Ⅱ 一起形成轉(zhuǎn)錄起始復合物，進而起始轉(zhuǎn)錄。 ?已經(jīng)經(jīng)過鑒定的 普通轉(zhuǎn)錄因子 有 TFⅡ D、 TFⅡ B、 TFⅡ F、TFⅡ A等。按一定順序參與形成轉(zhuǎn)錄起始復合物。 上海海洋大學 Shanghai Ocean University 上海海洋大學 Shanghai Ocean University ? RNA聚合酶 Ⅰ 和 RNA聚合酶 Ⅲ 分別負責 18S、 28S核糖體RNA和 5S核糖體 RNA， tRNA基因的轉(zhuǎn)錄，也需要多種蛋白因子參與，這些轉(zhuǎn)錄因子也必須與啟動子結(jié)合。 上海海洋大學 Shanghai Ocean University ?增強子 (enhancer)指增加同它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率的 DNA序列。增強子是通過啟動子來增加轉(zhuǎn)錄的。 ?有效的增強子可以位于基因的 5’端，也可位于基因的 3’端，有的還可位于基因的內(nèi)含子中。 ?增強子的效應很明顯，一般能使基因轉(zhuǎn)錄頻率增加 10～200倍，有的甚至可以高達上千倍。 ?增強子的作用同增強子的取向 (5’3’或 3’5’)無關，甚至遠