紫外-可見分光光度分析法(參考版)
2024-08-27 01:47本頁面
【正文】 11 紫外 — 可見吸收光譜法概 一 . 何謂紫外 — 可見分光光度分析法 二 . 紫外 — 可見分光光度分析法的特點(diǎn) 三、分子吸收光譜的形成 1. 過程 2. 能級(jí)組成 四 分光光度分析原理 （ 一） LambertBeer 定律 (二） 偏離 LB 定律的因素 1. 樣品性質(zhì)影響 2. 儀器因素 五、 有機(jī)化合物的紫外吸收光譜 1. 分子中電子的躍遷類型 常用術(shù)語 4. 溶劑對(duì)紫外吸收光譜的影響（溶劑效應(yīng)） 2022/8/31 67 ? 六、 可見分光光度法 ? ? ? ? 七、紫外及可見分光光度計(jì) ? 儀器結(jié)構(gòu) ? 常用紫外可見光度計(jì)儀器 ? 八、 紫外 可見光譜的應(yīng)用 ? 定性分析 ? 1）未知物鑒定； 2）有機(jī)物雜質(zhì)檢驗(yàn) ? 有機(jī)物定量分析 。 單波長法 1．吸光系數(shù)法 2．標(biāo)準(zhǔn)曲線法 3．對(duì)照法：外標(biāo)一點(diǎn)法 4．標(biāo)準(zhǔn)加入法 多波長法： 多波長線性回歸法等 導(dǎo)數(shù)光譜法等 2022/8/31 63 蘆丁含量測定：取樣品 3mg稀釋至 25mL。 2022/8/31 56 2022/8/31 57 2022/8/31 58 ▲ 八、 紫外 可見光譜的應(yīng)用 定性分析 1）未知物鑒定 原則： 定性鑒別的依據(jù) → 吸收光譜的特征吸收光譜的形狀 → 吸收峰的數(shù)目 → 吸收峰的位置（波長） → 吸收峰的強(qiáng)度 → 相應(yīng)的吸光系數(shù)。精度更高。 2022/8/31 53 2022/8/31 54 2022/8/31 55 ? 2）雙 波長分光光度計(jì) ? 光路：有兩個(gè)單色器，產(chǎn)生兩個(gè)波長的光。 2022/8/31 49 2022/8/31 50 2022/8/31 51 2022/8/31 52 ? * 雙光束 ?光路：通過切光器將光源發(fā)出的光分成兩路，一路通過參比，一路通過樣品，再通過減法器扣除參比信號(hào)，從而將光源不穩(wěn)定的影響消除。 常用紫外可見光度計(jì)儀器 ? 類型： 分光光度計(jì)分為 單波長和 雙波長儀器。 ? 與原子吸收光度儀不同，在 UVVis光度計(jì)中，單色器通常置于吸收池的前面，（ 可防止強(qiáng)光照射引起吸收池中一些物質(zhì)的分解） 2022/8/31 47 2022/8/31 48 4）檢測器：將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置，包括信號(hào)放大系統(tǒng)、工作站和打印機(jī)等。 ? * 6) 導(dǎo)數(shù)光譜及雙波長技術(shù) 2022/8/31 43 ▲ 七、紫外及可見分光光度計(jì) 儀器結(jié)構(gòu) ： 光源、分光系統(tǒng)、吸收池、檢測器 鎢燈或鹵鎢燈 —— 可見光源 350~1000nm 氫燈或氘燈 —— 紫外光源 200~360nm 1）光源： S1 S2 光柵 準(zhǔn)直鏡 匯聚鏡 反射鏡 吸收池 檢測器 光源 2022/8/31 44 2022/8/31 45 2022/8/31 46 作用：產(chǎn)生 足夠強(qiáng)度 、 穩(wěn)定 、 連續(xù)輻射且強(qiáng)度隨波長變化小 的光 。如在 ，雙硫腙與 Hg2+生成穩(wěn)定有色配合物，而與 Pb2+、 Cu2+、 Ni2+、 Cd2+等離子生成的有色物不穩(wěn)定。 選波長 選制備樣品 選擇掩蔽劑 選擇顯色劑 測定 2022/8/31 41 ? 2） 顯色劑用量 ： ? 配位數(shù)與顯色劑用量有關(guān)；在形成逐級(jí)配合物，其用量更要嚴(yán)格控制。 2022/8/31 36 ▲ 4. 溶劑對(duì)紫外吸收光譜的影響（溶劑效應(yīng)） 1)溶劑極性的影響 λ max影響 ：當(dāng)溶劑極性 ↑ nπ *躍遷： λ max↓ 藍(lán)移 π π *躍遷： λ max↑ 紅移 2022/8/31 37 ： 溶劑極性 ↑ 時(shí) ， （ 苯環(huán) ） 精細(xì)結(jié)構(gòu)消失 溶劑影響吸收波長，吸收強(qiáng)度及精細(xì)結(jié)構(gòu)（ fine structure） 2022/8/31 38 2022/8/31 39 ? 2) 溶劑的選擇原則： ? 極性適當(dāng)； ? 透明、能溶解被測物； ? 化學(xué)、光學(xué)穩(wěn)定性高； ? 純度高； ? 截止吸收波長 λmax 2022/8/31 40 ? ▲ 六、 可見分光光度法 ? ▲ ? ▲ ? 包括顯色劑種類、用量、酸度、溫度、顯色時(shí)間和放置時(shí)間等。 S C NFeS C NFeLMLMhbnhbn?? ????? ???????????23)1()1(??2022/8/31 35 ▲ 2. 配場躍遷 (Ligand field transition) 過渡元素的 d 或 f 軌道為簡并軌道 (Deg
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